Подготовка рабочего стола.
Техник осеменатор готовит рабочее место в следующей последовательности:
1. Снимает верхнюю одежду, надевает проглаженный халат утюгом, косынку (колпак) и
сапоги .
2. Проверяет состояние дезоковрика , при необходимости заливает его раствором 2-%-ного
едкого натрия .
3. Моет руки с мылом .
4. Осматривает коров , карточки на которых помещены в карманчики календаря на дан-
ный период.
5. Предупреждает доярок и скотников , какие коровы должны быть в охоте сегодня и
завтра , а при наличии коров в охоте ведет их на пункт искусственного осеменения.
6. Включает плитку , ставит на нее колбу на 800 мл. с дистиллированной водой , вклю -
чает утюг.
7. В толстостенную чашку наливают до половины теплой воды , берет кусок серой ва-
ты и моет лабораторный и манежный столы , затем насухо вытирает их вначале лабо –
раторный , затем манежный.
8. Затем использованную вату помещают в мусорное ведро и моет руки.
9. Готовит путем проглаживания полотенце и по две марлевые салфетки на одну коро-
ву , кладет салфетки в тампонницу. Берет тампонницу снимает крышку , кладет в нее
тампоны , гладкой поверхностью вверх и пропитывает 96 спиртом с помощью пинцета
переносит в тампонницу и закрывает крышкой.
Приготовление рабочих растворов .
Техник осеменатор должен :
1. Приготовить 2 – 3%-ный раствор бикарбоната натрия по 0,5 литра на одну корову ,
500 мл. 1%-ного раствора бикарбоната натрия, или 0,9%-ного раствора хлористого натрия,
или 2,9%-ного раствора лимонно - кислого натрия (для этого в 100 мл. дистиллированной
воды растворить 1 гр. двууглекислой (пищевой) соды, лимонно - кислого натрия 2,9 );
остудить, разлить растворы в банки под номером 1, 3, 4 (предварительно простирилизо -
ванные и пронумерованные ) с притёртыми пробками.
2. Приготовить 70 раствор спирта путём добавления к 73 мл. 96 спирта 27 мл. прокипичёной
дистиллированной воды ; правильность приготовления раствора спирта проверить спирто –
метром и налить раствор в баночку под №2.
3. Поставить на лабораторный стол баночки под №1, 2, 3, 4, тампонницу со стерильными мар –
левыми салфетками и тампонницу с полувлажными спиртовыми тампонами ; для отработан-
ных растворов поставить шашку из толстого стекла .
4. Взять подставку для инструментов, обработать её спиртовым тампоном, затем протереть
этим же тампоном стол и установить подставку ; использованный тампон поместить в
толстостенную чашку.
5. Вторым тампоном обработать наружную поверхность шприца катетера (тампон должен
выходить на половину за канюлю шприца , затем двумя пальцами, вращательными движе-
ниями, обработать канюлю и продвинуть тампон до середины, затем свернув тампон в двое
обработать наружную поверхность до конца.
6. Третьим тампоном обработать пинцеты, стеклянную палочку, термометр и положить на
подставку.
Хранение замороженной спермы .
Во время хранения обменные процессы в сперме при кислотном анабиозе, а также при температуре 0 - -5 с хотя и значительно снижены, но все же протекают на довольно заметном
уровне. Спермии стареют , расходуют питательные вещества , отравляются продуктами обме-
на , разрушаются и гибнут . В результате оплодотворяющая способность их при хранении спер-
мы ограничена несколькими сутками . Более глубокий анабиоз с почти полным прекращением обменных процессов достигается замораживанием спермы при низких температурах (-79-196).
В настоящее время способ медленного замораживания спермы быков уступил более произ-
водительному быстрому замораживанию, при котором глубокое охлаждение спермы до тем-
пературы жидкого азота ( -196 С) достигается в течении нескольких минут. В результате
удается лучше сохранить структуру спермиев, получить относительно высокую активность
спермы после оттаивания.
Время осеменения самок.
Эффективность искусственного осеменения самок животных в значительной мере зависит от
своевременного введения спермы. Причиной низкой оплодотворяемости часто бывает неуме-
ние выбрать время, наилучшее для осеменения.
Яйцеклетки при выходе из яичников сохраняют способность к оплодотворению всего лишь
несколько часов. Поэтому для самок всех видов будет верным общее положение; проводить ис-
кусственное осеменение перед овуляцией как можно ближе к её началу.
У коров в отличии от самок других видов овуляция фолликулов происходит через 6 – 15 ча-
сов после угасания признаков половой охоты, поэтому их необходимо осеменять в конце поло-
вой охоты, которая длится 12 – 18 часов (зимой короче).
При проведении искусственного осеменения учитывают все их физиологические особеннос-
ти, но они имеют видовые отклонения, которые следует знать при освоении разных способов
осеменения маточного поголовья.
Техника оттаивания
Размораживание спермы производится следующим образом:
1. Поставить на стол перед источником света микроскоп, протереть зеркало. (Увеличение
должно быть в 200 раз).
2. Навести освещение (освещение должно быть равномерное по всему полю зрения.
3. Навести освещение, подключить электрический столик или заправить столик «Морозова»
водой с температурой 40 – 42 С и установить его на предметный столик так, чтобы поле
зрения было равномерно освещено.
4. Взять предметное и покровное стекла, протереть стерильной марлевой салфеткой и по-
ложить на столик «Морозова».
5. Приготовить водяную баню с температурой 40 – 42 С (для определения температуры
водыобязательно воспользоваться термометром;затем отмерить цитрат , вылить его в сте-
рильный флакончик , закрыть резиновой пробкой и поместить в паровую баню.
6. Надеть защитные очки и перчатки.
7. Снять крышку с сосуда Дьюара и положить ее на табурет , вынуть пробку и положить ее на
крышку , обработанным пинцетом достать мешочек со спермой (не выше горловины сосуда),
извлечь пинцетом гранулу из мешочка и положить ее во флакон с подогретым концентратом ,
мешочек опустить в азот , закрыть сосуд Дьюара, снять очки и перчатки , взять флакончик с
гранулой , вращательными движениями перемешать содержимое флакона (оттаивать гранулу
в течении 5 – 8 сек.
8. Взять подогретое предметное стекло, нанести стеклянной палочкой каплю спермы , сверху
положить покровное стекло и определить активность спермиев.
9. При помощи макро-винта опустить тубус до прикосновения объектива с покровным стек-
лом.
10. Посмотреть в окуляр, медленно подняв тубус вращением макро- винта до появлениев спе-
рмиев в поле зрения, а при помощи микро-винта навести резкость. Сперма к использованию
допускается с оценкой не ниже 3 баллов (т.е. не менее 30% спермиев должны иметь прямо-
линейное поступательное движение.
При наличии спермиев только с колебательными движениями сперму оценивают буквой К.
При наличии только манежного движения – буквой М.
Неподвижность всех спермиев обозначают – буквой Н (некроспермия).
В свежеполученной хорошей сперме быка 80 – 90 % спермиев двигается поступательно.
Одновременно с оценкой под микроскопом подвижности спермиев глазомерно определяют
густоту спермы – степень насыщенности ее спермиями.
При этом сперма может быть:
1. Густая – все поле зрения заполнено спермиями , обозначают буквой Г.
2. Средняя – между спермиями промежутки примерно равны длине спермиев , обозначают
буквой С.
3. Редкая – между спермиями в поле зрения большие промежутки, обозн. Буквой Р.
Техника искусственного осеменения коров.
Осеменение коров проводят тремя способами , при которых разбавленную сперму вводят в шейку матки (цервикальное осеменение).
Визоцервикальный способ осеменения коров.
Для подготовки шприца – катетера к использованию перед осеменением необходимо иметь четыре нумерованные баночки с притертыми пробками. В баночке № 1,3,4 наливают свежеприготовленный стерильный 1%-ный раствор хлористого натрия. А в баночку №2 - 70%-ный спирт – ректификат. Кроме того , надо приготовить баночку со стерильными марлевыми салфетками и баночку с полувлажными ватными тампонами, пропитанными
96%-ным спиртом , для фламбирования влагалищных зеркал, обработки наружной поверхности шприца-катетера и других инструментов. Перед началом работы вымытый и
обеззараженный шприц-катетер отмывают от дезинфектора (70%-го спирта ректификата ),
набирая в шприц 3 – 4 раза 1%-ный раствор хлористого натрия из баночки №3, а затем №4.
Ухватив канюлю шприца стерильной марлевой салфеткой, движением поршня удаляют
остатки хлористого натрия и набирают сперму для осеменения.
Раствор в баночках №3 и №4 должен быть теплым (38 – 40 С) для нагревания шприца пе-
ред наполнением его спермой.
Остатки физиологического раствора из шприца можно удалить, держа его тонким концом вниз и передвигая несколько раз поршень. Набрав сперму, шприц поворачивать вертикально катетером вверх, движением поршня вниз втягивает сперму из катетера, а затем продвигает поршень вверх, вытесняют из целиндра воздух до появления капли спермы на конце катете-
ра.
Корову фиксируют в специальном станке и перед осеменением обмывают наружные поло-
вые органы с помощью тампона , чистой теплой водой из кружки Эсморха , орошают раст-
вором фурацилина или фуразолидола , насухо вытирают , раскрывают половые губы и вво-
дят обеззораженое фламбированием , охлаждённое стерильным физиологическим раство-
ром теплое влагалищное зеркало ( обычно с осветителем ). Влагалищное зеркало вводят так,
чтобы ручки были направлены в сторону , затем поворачиваем ручки вниз и открываем вла-
галищное зеркало .
Обнаружив визуально шейку матки , подготовленный шприц-катетер или осеменительную пипетку с баллончиком вводят через раскрытое влагалищное зеркало в шейку матки коровы
на глубину 4 – 6 см., слегка оттягивают влагалищное зеркало назад и медленно , нажимая на