регистрация / вход

Биохимические показатели крови человека при сальмонеллезной интоксикации

Реферат. Дипломная работа на тему: «Биохимические показатели крови человека при сальмонеллезной интоксикации» содержит 46 страниц печатного текста, таблиц, 8 рисунков, 59 использованных источников литературы, из них 10 иностранных.

Реферат.

Дипломная работа на тему: «Биохимические показатели крови человека при сальмонеллезной интоксикации» содержит 46 страниц печатного текста, таблиц, 8 рисунков, 59 использованных источников литературы, из них 10 иностранных.

Перечень ключевых слов: сальмонеллез, перекисное окисление липидов, циркулирующие иммунные комплексы, каталаза, молекулы средней массы, сывороточный альбумин, эндогенная интоксикация.

Объект исследования: сыворотка крови практически здоровых людей и больных сальмонеллезом г. Пензы.

Практическое применение: в здравоохранении.


Список сокращений.

ПОЛ – перекисное окисление липидов;

ЦИК – циркулирующие иммунные комплексы;

ЧСА – человеческий сывороточный альбумин;

МДА – малоновый диальдегид;

ПЭГ – полиэтиленгликоль;

АОС – антиокислительная способность;

АТ – антитело;

АГ – антиген;

ИК – иммунный комплекс;

ЛПС – липополисахаридный комплекс;

МСМ – молекулы средней массы;

ТБК – тиобарбитуровая кислота;

ЭКА – эффективная концентрация альбумина;

ОКА – общая концентрация альбумина;

ТХУ – трихлоруксусная кислота;

ЦНС – центральная нервная система;

ц-АМФ – циклический аденозинмонофосфат;

АФК – активные формы кислорода;

LOOH, HOOH – гидроперекиси;

СОД – супероксиддисмутаза.

Содержание.

Введение………………………………………………………………..

1. Обзор литературы ………………………………………………...

1.1. Биохимическая характеристика интоксикации при сальмонеллезной инфекции…………………………..……..

1.2. Молекулярные механизмы развития эндогенной

интоксикации при сальмонеллезе……………………..…..

1.3. Показатели уровня эндогенной интоксикации

организма при сальмонеллезе……………………………….

2. Материалы и методы исследования………………………….

2.1. Материалы исследования…………………………………….

2.2. Методы исследования…………………………………………

3. Результаты и обсуждение………………………………….……

3.1. Определение показателей уровня интоксикации в

сыворотке крови практически здоровых людей……..

3.2. Определение показателей уровня интоксикации в

сыворотке крови больных сальмонеллезом………….…..

Список использованных источников……………………….…..

Выводы………………………………………………………………….

Приложения…………………………………………………………….

5-6

7-19

7-11

11-14

14-19

20-25

20

20-25

26-34

26-27

28-34

35-40

41

42-46


Введение

Успехи в борьбе с инфекционными заболеваниями в нашей стране общепризнанны. Вместе с тем в инфектологии еще остаются проблемы, имеющие серьезное социально-экономическое значение для всех стран мира. К их числу относятся острые кишечные инфекционные заболевания [1].

Сальмонеллез – группа острых кишечных инфекционных болезней, вызываемых бактериями рода Salmonella, характеризующихся значительным полиморфизмом клинического течения, частым наличием интоксикации, лихорадки, признаков поражения желудочно-кишечного тракта [2].

Крупные достижения отечественных и зарубежных исследователей, установивших патогенетическое значение нарушения биологической регуляции при острых кишечных инфекциях, дали новый импульс в изучении патогенеза сальмонеллеза [3].

Иммунная система представляет собой сложную многокомпонентную систему из быстроделящихся и покоящихся клеток. Она является высокочувствительной к воздействию токсинов бактерий. Это приводит к нарушению иммунорегуляторных процессов.

Наиболее информативными являются показатели состояний прооксидантно-антиоксидантного равновесия, которое при усилении действия на организм токсинов смещается в сторону активизации ПОЛ, уровня холестерина, ЦИК, Ит, МСМ.

ПОЛ – это фундаментальный универсальный молекулярный механизм, лежащий в основе устойчивости и адаптационных возможностей организма. В норме ПОЛ обеспечивает условие для жизненно важных функций клетки, в случае же интоксикации становится пусковым механизмом патобиохимических изменений в организме человека.

Целью моей дипломной работы является изучение биохимических показателей эндотоксикоза в динамике патологического процесса. В задачи исследования входило:

1. Определение содержания МДА, уровня холестерина, ЦИК, Ит, МСМ и активности каталазы в группе контроля, которую составили практически здоровые люди.

2. Определение содержания МДА, уровня холестерина, ЦИК, Ит, МСМ и активности каталазы у больных сальмонеллезом.

3. Исследование изменения изучаемых показателей у больных в зависимости от степени тяжести заболевания.


1. Обзор литературы

1.1. Биохимическая характеристика интоксикации при сальмонеллезной инфекции

Сальмонеллезы принадлежат к числу инфекционных заболеваний, весьма широко распространенных на всех континентах мира. Возбудителем сальмонеллезов являются микроорганизмы, принадлежащие к роду Salmonella, семейства кишечных Enterobacteriaceae.

Сальмонеллы – это мелкие бактерии вытянутой формы с закругленными концами длиной от 1 до 3 и диаметром 0,5-0,8 нм [4].

Сальмонеллез встречается чаще у жителей городов, чем сел, что связывается с лучшей регистрацией заболеваемости, наличием множественных детских учреждений, широким употреблением пищевых полуфабрикатов. Заболевание отмечается круглый год, но максимальное число регистрируется в теплое время года, что объясняется благоприятными условиями размножения сальмонелл в пищевых продуктах и реализации инфекции [5].

Таблица 1.1.1.

Статистические данные больных сальмонеллезом г. Пензы.

Год

Количество больных

г. Пензы

На 100 тыс. населения, %

Кол-во больных Пензенской

области

На 100 тыс. населения, %
1996 187 34,9 362 23,1
1997 140 26,1 316 20,3
1998 230 43,0 448 28,8

В возникновении сальмонеллеза ведущую роль играют живые бактерии, гибель которых в организме больного сопровождается развитием эндотоксинемии. Принято выделять два вида токсичных продуктов жизнедеятельности микробов-экзотоксии и эндотоксии. К экзотоксинам отнесены токсичные продукты жизнедеятельности бактерий, активно (при жизни) секретируемые в окружающую среду, а к эндотоксинам – те ядовитые для макроорганизма продукты жизнедеятельности, которые освобождаются только при лизисе микробной клетки [6].

Кроме токсина палочка имеет ряд антигенов клеточной стенки. О-антиген расположен на поверхности микробной клетки и представляет собой фосфолипидно-полисахаридный комплекс, включающий 60 % полисахарида, 20-30 % липида и 3-4,5 % гексозамина. Н-антиген определяется жгутиками. Поверхностные антигены клеточной стенки провоцируют типоспецифический антительный ответ, а глубинные – видоспецифический [6,7].

При сальмонеллезе развитие и тяжесть симптомов обусловлены интоксикацией и обезвоживанием. По мнению А.Ф. Билибина интоксикация – явление сложное, сводящееся к изменению нервнорефлекторной деятельности и гуморальной регуляции с обменными сдвигами. К.В. Бунин в основу синдрома интоксикации ставит воздействие токсина на :

1) падение артериального давления, снижение сократительной способности миокарда;

2) гормональную регуляцию водно-солевого обмена с изменениями биосинтеза гормонов в коре надпочечников с угнетением процесса их метаболизма;

3) функцию почек (снижение клубочковой фильтрации, повышение канальцевой реабсорбции воды, снижение концентрации очищения мочевины) [8].

Сальмонеллезная интоксикация возникает как результат патологии первичного ответа на инфекционный агент вследствие значительных потерь воды и электролитов с рвотой и жидким стулом. По мере увеличения дефицита воды и электролитов на первый план выступают симптомы обезвоживания и поражения ЦНС. Если процесс прогрессирует, обезвоживание нарастает, появляются признаки недостаточности кровообращения, которые при интоксикации имеют клинику шока. Частая рвота и понос – первые признаки интоксикации [9].

Обязательным условием развития заболевания являются наличие большого количества возбудителей и их токсинов, массовое проникновение антигенов в кровь. Наибольшей токсичностью отличается липид А, вызывающий следующие основные реакции: активацию лейкоцитов и макрофагов, стимуляцию выброса эндогенного пирогена, антогониста глюкокортикоидов, интерферона, интерлейкинов, подавление тканевого дыхания, активацию системы комплемента, тромбоцитов, факторов свертывания крови другие [10,11], [рис. 1.1.1].

Главной причиной развития шока при сальмонеллезе считается не повреждающее действие самих микробов или их токсинов, а своеобразный ответ организма на них. Под токсико-инфекционным шоком следует понимать экстремальное состояние организма, наступающее в результате действия токсичных субстанций возбудителей, патогенных иммунных комплексов на органы и ткани организма, сопровождающееся острым нарушением метаболизма в них [12].

Схематическое изображение липополисахаридов

стенок микробов.


Рис. 1.1.1.

С.А. Степанов с помощью аспирационной биопсии обнаружил в тонкой кишке больных сальмонеллезом изменение эпителия, острое воспаление слизистой оболочки, нарушение микроциркуляции и сосудистой проницаемости. К.Х. Ходжаев в эксперименте на крысах показал, что сальмонеллезная инфекция вызывает нарушение процесов тканевого дыхания и фосфорилирования. Состояние поджелудочной железы изучено Белянской Т.А. В острый период болезни отмечено снижение ферментативной активности панкреатического сока – уровень трипсина был снижен в 71 % случаев, липазы в 55 %, амилазы – в 66 %.

Таким образом эндотоксин вызывает активацию синтеза, преимущественно протеолитических ферментов, задержку экструзии секретируемых проэнзимов, что приводит к секреции и поступлению ферментов в лимфатическое и кровеносное русло [13,14].

При сальмонеллезе развивается обезвоживание, обусловленное потерей внеклеточной жидкости, а при тяжелом течении заболевания и части клеточной. Дегидратация в большинстве случаев имеет изотонический характер, сочетаясь с развитием сгущения крови, дефицитом электролитов, метаболическим ацидозом в капиллярной и венозной крови [15], [рис. 1.1.2].

1.2. Молекулярные механизмы развития эндогенной

интоксикации при сальмонеллезе

Явления интоксикации вызывают заболевания, сопровождающиеся повышенным распадом тканей, усиленными процессами катаболизма, недостаточностью функции печени и почек, снижением процессов микроциркуляции [16].

В ответ на действие первичного патогена, которым являются эндотоксины, сальмонелл, в организме развиваются типовые каскадные реакции, что лежит в основе современной концепции СЭИ.

На Международном симпозиуме в Санкт-Петербурге (1994 г) было дано определение этого синдрома как клинического синдрома с проявлением симптомов интоксикации при патологических состояниях неоднородных по этиологии и обуславливающих накопление в тканях и биологических жидкостях организма продуктов патологического обмена веществ, метаболитов, деструкции клеточных и тканевых структур, разрушения белковых молекул [17,18].



Шано В.П. с соавторами подчеркивает, что токсическое влияние липополисахаридной субстанции эндотоксина проявляется комплексом нарушений, обусловленных повреждением как циркулирующих клеток в кровотоке, так и эндотелиоцитов, эозинофилов, нейтрофилов, макрофагов, следствием чего является выброс в кровоток ряда биологически активных веществ – цитокинов, интерлейкинов. Главной точкой приложения эндотоксина являются эндотелиальные клетки, активация их приводит к высвобождению простациклина, выделению эластазы, токсических метаболитов кислорода, факторов активации тромбоцитов и комплемента с высвобождением терминального комплекса комплемента, брадикинина с последующим формированием синдрома повышенной проницаемости капилляров. Это приводит к тому, что в очаг воспаления начинают входить компоненты крови, прежде всего фибриноген и тромбоциты. Фибрин способствует агрегации тромбоцитов, полимеризации фибрина и – возникновению тромбов. Следствием тромбоза являются нарушения микроциркуляции с последующей гипоксией, что приводит к дальнейшим повреждениям клеток в очаге воспаления. Метаболическим результатом этого является изменение аэробного метаболизма клеток на анаэробный, повышенное продуцирование лактата и протонов, снижение показателей рН [19].

Среди тканевых (клеточных) медиаторов воспаления важное место занимают простагландины. Исходными продуктами для биосинтеза простагландинов являются ненасыщенные жирные кислоты: линолевая, арахидоновая, пентаноевая. Наибольшее значение имеет в организме арахидоновая кислота, которая содержится в фосфолипидах клеточных мембран.

Простагландины вызывают сильное диуретическое и натрийуретическое действие, оказывают разнообразное действие на желудочно-кишечный тракт. Они могут стимулировать и тормозить сокращение и секреторную активность тонкой кишки, тормозят секрецию соляной кислоты слизистой оболочки желудка. Простагландины вызывают секрецию воды и электролитов в просвет кишки, вызывая диарею, повышают концентрацию ц-АМФ в слизистой оболочке тонкой кишки, влияют на прочность и упругость эритроцитарной мембраны [20, 21, 22, 49].

1.3. Показатели уровня эндогенной интоксикации

организма при сальмонеллезе

Анализируя данные литературы за последние десятилетия, можно сказать, что основными показателями интоксикации при сальмонеллезе являются ПОЛ, уровня холестерина, ЦИК, ИТ, МСМ и активность каталазы. При развитии интоксикации на фоне сальмонеллеза происходит активный хемотаксис нейтрофиллов в очаг воспаления, где они поглощая и переваривая чужеродный агент, изменяют свою метаболическую активность, характеризующуюся усилением поглощения кислорода, повышенной утилизацией глюкозы и гиперпродукцией АФК () [23, 24].

Перекисное окисление является универсальным механизмом взаимодействия кислорода со многими органическими субстратами, в том числе с липидами. Внедрение кислорода в молекулы окисленного субстрата приводит к образованию реакционно-способных промежуточных продуктов – свободных радикалов, гидроперекисей, которые в дальнейшем вызывают повреждение других классов соединений – белков, нуклеиновых кислот, углеводов (рис. 1.3.1).

Метаболизм супероксидного радикала в норме

и при патологии (Владимиров Ю.Я., 1998)

Рис. 1.3.1.

Накопленные к настоящему времени данные литературы позволяют сделать вывод о том, что свободнорадикальное окисление липидов при сальмонеллезной инфекции играет определенную патогенетическую роль [25, 50].

Установлено, что при развитии ПОЛ в биомембранах понижается содержание легкоокисляемых полиненасыщенных жирных кислот и изменяются физико-химические свойства: микровязкость, текучесть, мембранный потенциал, полярность внутренних областей мембран. Таким образом, изменяются транспортные свойства мембраны и активность ферментов [26].

Регуляция свободнорадикального окисления обеспечивается в клетке системой антиоксидантной защиты. Так, накапливающаяся в процессе ПОЛ перекись водорода обезвреживается с помощью каталазы, присутствующей во всех тканях организма. Каталаза (КФ 1.11.1.6.) представляет собой гемсодержащий фермент с молекулярной массой около 250000 Д, локализованный в пероксисомах клеток [27].

Митохондриальная каталаза участвует в оксидазном пути окисления, сопровождающемся запасанием энергии в виде АТФ. Блокирование транспорта электронов в дыхательной цепи приводит к стимуляции пероксисомального окисления. При потологиях, связанных с нарушением энергетических процессов, каталаза пероксисом может выходить из них и участвовать в окислении на мембранах эндоплазматического ретикулума [28, 53].

В работе Л.Б. Оконенко с соавторами о состоянии антиоксидантной системы судили по активности СОД, глутатионпероксидазы и каталазы, анализ данных выявил дефицит антиоксидантов [29, 30].

При инфекционном токсикозе в мембранах эритроцитов резко снижается содержание общих фосфолипидов, но увеличивается количество НЭЖК и лизофосфотидилхолина, что косвенно указывает на повышение активности фосфолилаз, которые избирательно разрушают липиды мембран. Холестерин подвергается как активному, так и пассивному обмену в мембранах эритроцитов [29]. Фермент лецитинхолестеролацил трансфераза превращает эфиры холестерина в свободный холестерин и тем самым регулирует уровень свободного холестерина в плазме, что способствует проникновению его в мембраны. Следовательно, инактивация этого фермента в результате гипоксии при эндотоксикозе ведет к повышению уровня эфиров холестерина в мембранах эритроцитов [31,32].

Наряду с уровнем МДА, активности каталазы и уровня холестерина для диагностики заболевания и его прогноза имеют значение и другие неспецифические показатели – ЦИК, Ит, МСМ.

Синтезирующиеся при формировании иммунитета специфические антитела обладают способностью взаимодействовать с антигенами возбудителей и тем самым вызывать нейтрализацию патогенных микробов и их токсинов. Эта реакция сопровождается образованием иммунных комплексов антиген – антитело [33, 34, 54, 55]. При патологических состояниях образование ИК выходит из под контроля, в результате чего развивается та или иная болезнь ИК [рис. 1.3.2.].

Патогенетические механизмы болезней иммунных

комплексов (Сура В.В., 1987)


Рис. 1.3.2.

В результате развития эндотоксемии при сальмонеллезе организм длительное время контактирует с избытком АГ как экзогенного (компоненты микробных клеток), так и эндогенного (компоненты разрушенных клеток самого организма) происхождения. Вместе с тем наблюдается угнетение системы комплемента, ответственного за лизис микробных клеток. В этих условиях значительного избытка АГ и недостаточности выработки АТ может привести к образованию ИК, которые способны откладываться в определенных тканях и вызывать острые воспалительные реакции. При значительных отложениях наблюдаются функциональные и морфологические повреждения органов и тканей [35].

Связываясь с клеточной мембраной ЦИК вызывают выделение в окружающую среду протеолитических ферментов и основных пептидов. Эти вещества повреждают протеогликановые компоненты тканей, действуют на базальную мембрану и вызывают некроз эндотелиальных клеток [36].

ЦИК наряду с продуктами ПОЛ вызывают нарушение проницаемости мембран, вплоть до их разрыва, что в конечном итоге может привести к гибели клетки. В результате появляются различные вещества пентидной природы. Из них наибольший интерес представляют молекулы средней массы.

Являясь олигопептидами с молекулярной массой 300-5000 Дальтон, они расцениваются как универсальный критерий эндогенной интоксикации и влияют на ее уровень и прогноз [37, 38].

МСМ образуются в организме под воздействием повреждающих эндогенных или экзогенных факторов различного генеза, являются промежуточными продуктами протеолиза. [39, 57].

Пристальное внимание исследователей к МСМ объясняется высокой биологической активностью их отдельных фракций, которые ингибируют гликолиз, глюконеогенез, пентозный цикл, синтез гемоглабина, нуклеиновых кислот, мембранный транспорт, дагоцитов, эритропоэз, микроциркуляцию, обладают иммунодепрессивным, цитотоксическим, нейро- и психотропным свойствами. Сейчас, квалификационная оценка степени тяжести состояния больных при сальмонеллезе немыслима без определения МСМ [40].

Установлено, что значительная часть циркулирующих в крови СМ не только растворена в плазме крови, но и связана с альбумином.

Человеческий сывороточный альбулин (ЧСА) – важнейший транспортный белок, осуществляющий перенос эндогенных метаболитов и ксенобиотиков в плазме крови, межклеточной жидкости, в лимфе.

Универсальность транспортной функции ЧСА обеспечивается его уникальной способностью связывать лиганды различной химической природы. Интенсивная лигандная нагрузка молекул альбулина приводит к изменению их структуры и связывающей способности. Такие модификационные формы ЧСА обнаруживаются при патологии [41].

О величине токсического действия вредных веществ можно судить по ЭКА, которая снижается после того, как токсические вещества займут центры связывания в молекуле альбулина, что приводит к снижению детоксикационных свойств организма. Изучение свойств альбулина является важным с точки зрения как диагностики, так и лечения [42].


2. Материалы и методы исследований

2.1. Материал исследований

Уровень интоксикации оценивался по изменениям в крови больных эффективной и общей концентраций сывороточного альбулина, малонового диальдегида, как одного из продуктов ПОЛ, уровня холестерина, ЦИК, МСМ и активности каталазы.

Для всех исследований бралась сыворотка крови. Исследовано 30 больных сальмонеллезом в возрасте от 17 до 46 лет. Для контроля набиралась группа 51 человека разного пола в возрасте от 20 до 46 лет.

Кровь бралась из локтевой вены, преимущественно натощак в количестве не менее 5 мл. Центрифугируем 1500 об/мин 10 минут. Для выполнения анализов сыворотки необходимо использовать сразу или заморозить и хранить при t=-20С.

2.2. Методы исследований

2.2.1. Определение МДА с тиобарбитуровой кислотой

(Конюхова В.С., 1989)

Об изменении интенсивности ПОЛ судим по изменению уровня вторичного продукта ПОЛ – малонового диальдегида.

Метод основан на том, что при высокой температуре в кислой среде МДА реагирует с 2-ТБК, образуя окрашенный розовый триметиновый комплекс с максимумом поглощения при 535 им.

Ход работы: К 0,2 мл сыворотки крови добавить 0,2 мл дистиллированной воды, 1 мл 0,6 % ТБК в ледяной уксусной кислоте. Кипятить 30 минут, охладить и добавить 1 мл 5№ КОН и 2 мл изопропанола. Центрифугируют при 6000 об/мин 20 минут. Колориметрируют при 535 нм и 580 нм против контроля, содержащего вместо плазмы воду.

Расчет: (мкМоль/л), где Е – оптическое поглащение изопропилового экстракта; 106 – коэффициент пересчета оптической плотности.

Пример расчета: больной Максимов С., 19 лет

концентрация МДА = (мкМоль/л).

2.2.2. Определение активности каталазы

(Королюк М.А., 1988)

Метод основан на способности перекиси водорода образовывать с солями молибдена стойкий окрашенный комплекс.

Ход определения: Реакция запускается добавлением 0,1 мл сыворотки крови к 2 мл 0,03 % раствора перекиси водорода. В холостую пробу вместо сыворотки вносят 0,1 мл дистиллированной воды. Реакцию останавливают через 10 минут добавлением 1 мл 4% молибдата аммония. Интенсивность окраски измеряют на спектрофотометре при длине волны 410 нм против контрольной пробы, в которой вместо перекиси водорода вносят 2 мл воды.

Расчет: (мкат/л), где

Е – активность каталазы в мкат/л;

А – оптическая плотность холостой и опытной проб;

V – объем вносимой пробы, 0,1 мл;

t – время инкубации, 600 сек;

К – коэффициент миллимолярной экстинкции перекиси водорода, равный .

За единицу активности каталазы принимают то количество фермента, которое участвует в превращении 1 мкат перекиси водорода за 1 секунду при заданных условиях. Расчет активности каталазы ведут на 1 л сыворотки крови.

Пример расчета: больной Крайнов Т.В., 31 год.

(мкат/л)

2.2.3. Определение общего холестерина в сыворотке крови ферментативным методом «Фотокол»

(Творогова М.Г., 1995)

Определение основано на сопряженных реакциях, которые катализирует холестеринэстераза, холесериноксидаза и пероксидаза:

Эфиры холестерина холестерин + Ж.К.;

Холестерин + О2 холестинон + Н2 О2 ;

Н2 О2 + хромогены Н2 О + окрашенный продукт.

Концентрация образующегося в ходе реакции окрашенного продукта пропорциональна концентрации холестерина в пробе.

Ход определения: Рабочий реагент обязательно вносить в пробирки после проб, содержащих холестерин. Пробирки встряхнуть и инкубировать при t = 37o С. Через 10 минут после начала инкубации пробирки повторно встряхнуть и инкубировать 20 минут при t = 37o С. Окрашенные пробы фотометрировать при 500 нм в кювете с длиной оптического пути 5 мм или 10 мм относительно холостой пробы. Окраска стабильна в течении двух часов при комнатной температуре.

Концентрацию холестерина в исследуемых пробах рассчитать по формуле:

ммоль/л, где

ЕОП и ЕК – оптические плотности исследуемой пробы и пробы с калибратором.

Норма: 3,62 – 5,2 ммоль/л.


2.2.4. Определение циркулирующих иммунных комплексов

в крови методом ПЭГ-теста (Гриневич Ю.А., 1988)

Метод основан на селективной преципитации комплексов АТ-АГ в 3,75 % ПЭГ (полиэтиленгликоля) с последующим определением плотности преципитата.

Реактивы:

1) 0,1 м боратный буфер (3,410 г борной кислоты, 4,275 г буры растворить в 1 л дистиллированной воды)

2) 10 г полиэтиленгликоль – 6000 ед. растворить в 240 мл буфера.

Ход определения: К 0,3 мл сыворотки крови добавить 0,6 мл реактива №1, перемешать и перенести по 0,3 мл в 2 пробирки. В I добавить 2,7 мл раствора №1 (контроль). Во II добавить 2,7 мл раствора №2 (опыт). Перемешать, инкубировать в течение 60 минут при комнатной температуре. На спектрофотометре (КФК-3) определяют оптическую плотность в кюветах при 450 нм.

Расчет: Высчитывают разность показателей оптической плотности, результат умножают на 1000 и получают количество ИК в 100 мл сыворотки. Ответ выражают в единицах оптической плотности. - количество ЦИК в 100 мл сыворотки.

Норма: 54,24 + 2,03 усл. ед.

Пример расчета: больной Максимов С.И., 19 лет.

Количество ЦИК в 100 мл сыворотки:

усл. ед.

2.2.5. Определение уровня МСМ в крови (Габриэлен Н.И., 1984)

Метод основан на осаждении белков из исследуемой жидкости 10 % раствором ТХУ с последующем центрифугированием и определением абсорбции света супернатантом в 10 раз разведенным дистиллированной водой.

Ход работы: Сыворотку крови обрабатывают 10 % раствором ТХУ. В качестве контроля лучше использовать сам раствор ТХУ в 30 раз разведенный дистиллированной водой. Оптическая плотность его против воды составляет 0,123±0,012 усл. ед. на волне 254 нм при 23-25С. Центрифигируем 3000 об/мин в течение 30 минут. К 0,5 мл надосадочной жидкости +4,5 мл дистиллированной воды. Измерение проводим на спектрофотометре в УФ свете при 280 нм для определения ароматических аминокислот и при длине волны 254 нм для определения нуклеотидов. Уровень МСМ выражают в единицах, количественно равных показателям экстинции.

2.2.6. Определение показателей «эффективная концентрация

альбумина» и «общая концентрация альбумина» в сыворотке крови человека флуоресцентным методом

(Миллер Ю.И., 1994).

Принцип метода:

Метод основан на специфическом взаимодействии флуоресцентных органических соединений с альбумином в сыворотке крови. В зависимости от условий этого взаимодействия интенсивность флуоресценции красителя из альбумина отражает различные свойства белка. Индекс ЭКА/ОКА не зависит от числа молекул альбумина в пробе и характеризует физико-химические свойства молекулы альбумина.

Состав набора:

Реактив I (4 ампулы по 5 мл). Предназначен для приготовления раствора используемого при разбавлении сыворотки крови. Он содержит антикоагулянт ЭДТА.

Реактив II (4 ампулы по 0,7 мл). Основным компонентом является специальное флуоресцирующее соединение, интенсивность флуоресценции которого в сыворотке крови пропорциональна концентрации сывороточного альбумина.

Реактив III (4 ампулы по 0,7 мл). Взаимодействие реактивов №2 и №3 с сывороткой позволяет определить ОКА.

Определение показателя ЭКА:

К 2,0 мл надосадочной жидкости добавить 0,025 мл реактива 2. Перемешать. Измерить интенсивность флуоресценции при длине волны возбуждения 420 нм и длине волны испускания 515 нм.

Определение показателя ОКА:

В ту же пробу добавить 0,025 мл реактива 3. Перемешать. Измерить интенсивность флуоресценции. Нормальные величины показателя ЭКА лежат в интервале нормальных значений ОКА от 40 г/л – 55 г/л.

Подготовка образцов крови к измерениям:

Буферный раствор: Содержимое ампулы с реактивом 1 перенести в 100 мл дистиллированной воды. Перемешать. 0,025 мл сыворотки крови добавить в пробирку, содержащую 5 мл раствора для разбавления крови. Для анализа берут жидкость 2,0 мл полученного образца.

Используют специализированный анализатор АКЛ-0,1.


3. Результаты исследования и их обсуждение

3.1. Определение показателей уровня интоксикации

в сыворотке крови практически здоровых людей

Нами было произведено исследование биохимических показателей – МДА, активность каталазы, уровень холестерина, ЦИК, МСМ, Ит в сыворотке крови 51 донора в возрасте от 20 до 46 лет. Сыворотка крови доноров была получена на ОСПК (областная станция переливания крови) г. Пензы.

Полученные результаты биохимических анализов были подвергнуты статистической обработке, согласно методам и приемам статистического анализа.

По данным комитета экспертов Международной федерации клинической химии по референтным величинам рекомендуется верхняя и нижняя границы нормы на уровне М±1,96σ, состояние предболезни М±2σ, состояние острой формы М±3σ.

Об уровне процессов ПОЛ судили по концентрации вторичного продукта МДА. Содержание количества МДА составляет 3,61±0,07 мкМоль/л. Это значение близко к данным, найденным в литературе (табл. 3.1.1). У 48 человек значение содержания МДА входит в границы М±1,96σ. У 3 человек (5 %) содержание МДА соответствует значению М±2σ, что соответствует состоянию предболезни.

Активность каталазы у практически здоровых людей составила 16,7±0,15 мкат/л (табл. 3.1.1). При исследовании активности каталазы в группе доноров отклонений за пределы М±1,96σ мы не наблюдали.

Уровень холестерина, определяемый нами у практически здоровых людей составил 4,45±0,68 ммоль/л (табл. 3.3.1.), показатели уложились в границу референтной величины М±1,96σ.

Содержание ЦИК, определяемое нами в сыворотке крови практически здоровых людей составило 52,62±3,52 усл. ед. (табл. 3.1.1). 94 % людей по показателям ЦИК входит в границы нормы, а 6% находятся в состоянии предболезни.

Уровень МСМ у обследованных доноров в среднем составил 0,280±0,01 усл. ед. Это значение близко к данным, найденным в литературе (табл. 3.1.1). При исследовании МСМ отклонений за пределы М±1,96σ мы не наблюдаем.

У практически здоровых людей определена детоксикационная нагрузка сывороточного альбумина, т.е. определение общей и эффективной концентрации альбумина. Токсичность по альбумину составляет 0,13±0,01 усл. ед. (табл. 3.1.1). Все значения токсичности по альбумину вошли в границы М±1,96σ.

Полученные нами данные не имели существенных отличий от значений этих показателей, имеющихся в литературе в сравнении с приложением 2.

Таблица 3.1.1.

Содержание биохимических показателей в сыворотке крови практически здоровых людей

Группа

обследованных

n

МДА

мкМоль/л

Активность

каталазы

мкат/л

ЦИК

усл. ед.

МСМ

усл. ед.

Ит

усл. ед.

Холестерин

ммоль/л

Практически

здоровые

51 3,61±0,07 16,7±0,15 52,62±3,52 0,28±0,01 0,13±0,01 4,45±0,68

3.2. Определение показателей уровня интоксикации

в сыворотке крови больных сальмонеллезом

Сыворотка крови больных исследовалась на базе центра госсанэпиднадзора г. Пензы. Исследования биохимических показателей велись в острую фазу заболевания и в период ранней реконвалесценции. Обследовано нами 30 больных сальмонеллезом в возрасте от 17 до 46 лет, с целью установления показателей, характеризующих эндотоксикоз: перекисное окисление липидов, уровень холестерина, Ит по сывороточному альбумину, циркулирующих иммунных комплексов, молекул средней массы и активности каталазы. Причем биохимические показатели крови в разгар заболевания отличались от показателей в период ранней реконвалесценции.

Таблица 3.2.1.

Биохимические показатели сыворотки крови

у больных сальмонеллезом

Группа

обследованных

МДА

мкМоль/л

Активность

каталазы

мКат/л

Ит

усл. ед.

ЦИК

усл. ед.

МСМ

усл. ед.

Холестерин ммоль/л

Контроль, n=51 (практически

здоровые)

3,61±0,07 16,7±0,15 0,13±0,01 52,62±3,52 0.280±0,01 4,45±0,68
Больные (острый период) n=30 7,19±0,2 13,09±0.16 0,29±0,01 100,63±4,04 0,550±0,02 6,54±0,07

Больные (ранняя

реконвалесценция) n=30

3,87±0,15 15,84±0,19 0,15±0,01 68,9±2,8 0,310±0,02 4,65±0,7
р≤0,001 р≤0,01 р≤0,001 р≤0,001 р≤0,05 р≤0,01

Так, в ходе исследования выявлено достоверное увеличение количества МДА в сыворотке крови больных сальмонеллезом на 99 % по отношению к контролю, т.е. возрастает в 2 раза. Данные наших исследований подтверждаются сведениями Л.Б. Оконенко, Л.Д. Мартыненко и другими. По данным этих авторов концентрация МДА при сальмонеллезе возрастает в 2-2,5 раза.

Как видно из таблицы (табл. 3.2.1), у больных наблюдается интенсификация ПОЛ.

Под воздействием сальмонеллезного токсина происходит нарушение липидных бислоев клеточных и субклеточных мембран. Накопление в крови первичных и вторичных продуктов ПОЛ идет не в силу количественных изменений в содержании фосфолипидов плазмы крови, а вследствие интенсификации их свободнорадикального окисления. Результатом инициации ПОЛ становится образование критических концентраций продуктов ПОЛ, которые токсичны для организма. Известно, что повышение ПОЛ может приводить к нарушению проницаемости мембран с последующей инактивацией мембранно-ассоциированных ферментных систем, выходом лизосомальных гидролаз в цитозоль, что вызывает повреждение ДНК т другие существенные изменения в структуре и функциональном состоянии клетки [29, 43, 51, 52].

Установлено, что при ряде инфекционных заболеваний развивается антиоксидантная недостаточность. Одновременно снижается актиность ферментов антиоксидантной защиты, в частности каталазы [44].

По нашим наблюдениям, активность каталазы снизилась на 22 % в острый период заболевания по отношению к контролю. В период ранней реконвалесценции показатель активности каталазы приближается к контролю (табл. 3.2.1).

Л.Б. Оконенко, Л.И. Волкова в своих работах отмечает угнетение каталазной активности. В острый период заболевания происходит резкое сокращение антиоксидантной обеспеченности организма [26, 29].

А.С. Волков указывает на то, что в процессе эндотоксикации метаболические расстройства приводят к гиперлипидемии. Это подтверждается данными наших наблюдений. Так, уровень холестерина в сыворотке крови больных сальмонеллезом в среднем составил 6,54±0,07 ммоль/л, что на 46,9% больше контроля (табл. 3.2.1).

Таким образом, гиперхолестеринемия характеризует патологию обмена липидов и липопротеидов [32,45].

В период ранней реконвалесуценции уровень холестерина приближается к контролю [рис. 3.2.1].


Процентное соотношение показателей липидного обмена при эндотоксикозе, вызванном сальмонеллезной инфекцией

Рис. 3.2.1.

Анализируя результаты проведенных исследований, мы установили, что содержание ЦИК в плазме крови больных сальмонеллезом на 91 % больше, чем в контроле [рис. 3.2.2]. Полученные данные согласуются с выводами исследования И.А. Ильинского, Т.В. Лукинской и других. Повышенное содержание ЦИК говорит о снижении антителообразования в присутствии избытка антигенов. В подобной ситуации ЦИК индуцирует острое иммунное воспаление, сопровождающееся повреждением эндотелия сосудов и почечных клубочков, активацией кининовой системы, что ведет к более серьезным метаболическим нарушениям [46, 47, 48].

Как правило, повышение уровня ЦИК обнаруживается уже в начальный период болезни, на этом же уровне содержание их остается и в острую фазу. Только в стадии реконвалесценции наблюдается понижение показателей [табл. 3.2.1].

Процентное соотношение показателей эндотоксикоза (ЦИК, МСМ) в сыворотке больных относительно контроля


Рис. 3.2.2.

При воспалении воздействие протеиназ на протеогликановые комплексы тканей приводит к образованию пула токсических веществ со среднемолекулярной массой (МСМ).

У обследованных нами больных сальмонеллезом уровень МСМ на 96 % выше по сравнению с контролем (рис. 3.2.2). По нашим данным содержание МСМ при сальмонеллезе повысилось в 1,9 раза, что согласуется с данными исследований Б.С. Нагаева и М.И. Габриловича. В наших исследованиях уровень МСМ повышается в разгар заболевания [табл. 3.2.1].

Как указывают многие авторы повышение уровня МСМ является неблагоприятным признаком. Объясняется это тем, что отдельные фракции МСМ обладают различной биологической активностью: ингибируют эритропоэз, угнетают синтез гемоглобина, ДНК, глюконеогенез, изменяют проницаемость мембран, нарушают тканевое дыхание и микроциркуляцию. Поэтому, среди широкого круга метаболитов, оказывающих токсическое действие, интегральным показателем эндотоксикоза считают уровень МСМ [39, 40, 48, 56].

Важное звено в системе детоксикации организама представляет альбулин, поскольку он переносит к гепатоцитам эндогенные метаболиты.

Эффективная концентрация альбулина при сальмонеллезе снижается, т.к. токсические вещества занимают центры связания в молекуле альбулина. Следовательно, связывающая способность альбулина может служить критерием общей интоксикации организма. Загруженность альбулина метаболитами дает информацию об эффективности функционирования печени и почек – основных детоксирующих органов человека [41, 42].

В результате наших исследований ЭКА в острый период заболевания составила 42,3±2,87 (г/л), в период ранней реконвалесценции 43±2,16 (г/л). Содержание ОКА в острую фазу заболевания составляет 54,5±3,52 (г/л), в период ранней реконвалесценции 50±3,8 (г/л) [прилож. 6,7].

Снижение ЭКА ведет к повышению коэффициента токсичности. Было установлено, что индекс токсичности у больных сальмонеллезом возрастает на 123 % по сравнению с контролем [рис. 3.2.3]. По нашим данным уровень Ит в острую фазу заболевания повысился в 2,3 раза [табл. 3.2.1].

На основании проведенных исследований можно сделать следующее заключение: у больных сальмонеллезом происходят интенсификация ПОЛ и угнетение иммунитета, снижение антиоксидантной защиты и детоксикационной способности организма.

Определение индекса токсичности по сывороточному

альбулину в сыворотке крови больных


сальмонеллезом

Рис. 3.2.3.

Таким образом, в наших исследованиях мы установили, что при сальмонеллезе уровень показателей ПОЛ, уровень холестерина, Ит, ЦИК, МСМ повышается, что согласуется с данными, имеющимися в литературе [рис. 3.2.4]. В исследуемой нами группе больных наиболее информативными показателями являются МДА, Ит, МСМ.


Выводы
Список литературы

1. Покровский В.И., Килессо А.В., Ющук Н.Д. Сальмонеллезы, результаты и перспективы их научных исследований // Советская медицина. – 1994. - №5. – С. 3-8.

2. Будагян Ф.Е. Пищевые токсикозы, токсиноинфекции, их профилактика. – М.: Медицина, 1989. – 207 с.

3. Покровский В.И. Острые кишечные инфекции // Советская медицина, 1989. - №5. – С. 6-13.

4. Тимаков В.Д., Петровская В.Г. Биологические и генетические характеристики рода salmonella. – М.: Медицина, 1990. – 293с.

5. Бунин К.В. Пищевые токсикоинфекции. – М.: Медицина, 1989. – 302 с.

6. Бойченко М.Н. Сальмонеллез: Распространение возбудителя в организме // Журнал микробиологии и эпидемиологии, 1991. - №5. – С. 9-13.

7. Мельников В.И., Гимранов М.Г. Ферменты патогенности и токсины бактерий. – М.: Медицина, 1995. – 252с.

8. Бунин К.В., Бродов Л.Е. О возможности возникновения инфекционно-токсического шока при сальмонеллезе // Терапевтический архив, 1995. - №8. – С. 27-32.

9. Пак С.Г., Гурьянов М.Х., Пальцев М.А. Сальмонеллез. – М.: Медицина, 1990. – 304с.

10. Кац Л.Н., Зигангирова Н.А. Жирнокислотный состав ЛПС бактерий рода salmonella // Журнал микробиологии и эпидемиологии. – 1990. - №7. – С. 35-38.

11. Вертиев Ю.В. Бактериальные токсины: Биологическая сущность и происхождение // Журнал микробиологии и эпидемиологии. – 1996. - №3. – С. 43-46.

12. Mannel D.N., More R.N. Endotoxinin – duced tumor cytotoxic factor //Jn. Microbiology. – 1990. – Р. 141.

13. Ющук Н.Д., Тендетник Ю.М. Патогенез сальмонеллезов// Советская медицина. - 1991. - №8. - С. 77-82.

14. Бунин К.В. Основы патогенетической иммунологии инфекционных болезней// Клиническая медицина. - 1990. - №3. - С.9-13.

15. Малов В.А., Пак С.Г. Медико-биологические аспекты проблемы интоксикации в инфекционной патологии // Терапевтический архив. - №1. - 1992. - С. 7-12.

16. Аркамов В.А., Межирова И.М., Ткачук З. А. Патофизиологические аспекты эндогенной интоксикации при кишечной инфекции // Анестезиология и реаниматология. - 1990. - №5. - С. 28-32.

17. Кузнецов Н.Н., Девайкин Е.В., Егоров В.М. Синдром эндогенной интоксикации при критических состояниях организма, новые диагностические и прогностические возможности //Анестезиология и реаниматология. - 1996. - №6. - С. 21-27.

18. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы и антиоксиданты // Вестник Российской академии медицинских наук. - 1998. - №7. - С. 43-57.

19. Шано В.П., Гюльмамедов Ф.И., Нестеренко А.Н. Варианты лечения критических состояний с учетом патогенеза SIRS-синдрома системного воспалительного ответа //Анестезиология и реаниматология. - 1997. - №6. - С. 48-52.

20. Юркив В.А. Эндогенные простагландины и их роль в механизме развития диареи //Простагландины в эксперименте и клинике. – 1990. - №5. - С. 176-177.

21. Марков Х.М. Современное учение о простагландинах //Патофизиология. - 1990. - №5 - С. 13-15.

22. Шубич М.Г., Авдеева М.Г. Медиаторные аспекты воспалительного процесса //Архив патологии. - 1997. - №2 - С. 3-8.

23. Ерин А.И. Механизмы ПОЛ. Запуск и регуляция //Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 1994. - Т.118. -№10. - С. 343-348.

24. Мамонтова Н.С. Инициирование ПОЛ в сыворотке крови //Клиническая медицина. - 1992. - №6. – С. 37-40.

25. Бурлакова Е.Б., Храпова И.Г. Перекисное окисление липидов мембран и природные антиоксиданты // Успехи химии. – 1990. - №9. – С. 1540-1557.

26. Волкова Л.И., Бондаренко М.И. Перекисное окисление липидов и механизм антиоксидантного действия // Врачебное дело. – 1991. - №12. – С. 35-38.

27. Бенина Н.Ф., Чеганова М.И. Активность окислительно-восстановительных ферментов у больных с хроническими воспалительными заболеваниями // Клиническая медицина. – 1989. - №1. – С.17-22.

28. Ахмедов Д.Р. Клинико-патогенетическое значение антиоксидантной системы при инфекционных заболеваниях // Иммунология. – 1994. - №2. – С. 25-27.

29. Оконенко Л.Б. Перекисное окисление липидов при сальмонеллезе // Журнал микробиологии и эпидемиологии. – 1994. - №6. – С. 55-58.

30. Махмудов О.С., Исматуллаев О.Ш. Клиническая эффективность применения витамина Е в лечении сальмонеллеза // Клиническая диагностика. – 1990. - №6. – С.93-95.

31. Титов В.Н., Творогова М.Г., Никитин С.В. Холестерин сыворотки крови: методические аспекты и диагностическое значение // Клиническая диагностика. – 1992. - №3. – С.45-51.

32. Курашвили Л.В., Волков А.С. Прогностическая значимость определения холестерина во фракции липопротеидов высокой плотности // Клиническая диагностика. – 1993. - №3. – С.5-8.

33. Лященко Ю.И., Трихлеб В.И. Циркулирующие иммунные комплексы при инфекционных заболеваниях // Советская медицина. – 1991. - №1. – С. 27-29.

34. Вельбри А.Л. Одновременная оценка уровня иммунных комплексов и иммуноглобулинов для характеристики патологического процесса // Лабораторное дело. – 1990. - №5. – С. 7-18.

35. Виноградова Т.В., Капелько М.А. Взаимосвязь между уровнем ЦИК и функциональным состоянием фагоцитирующей системы // Иммунология. – 1991. - №5. - С. 63-66.

36. Сура В.В., Масонов Е.Л., Борисов Н.А. Клинико-патогенетические закономерности развития болезней иммунных комплексов // Терапевтический архив. – 1987. - №12. – С. 3-10.

37. Владыка А.С., Левицкий Э.Р., Поддубная Л.П. Средние молекулы и проблема эндогенной интоксикации при критических состояниях различной этиологии // Анестезиология и реаниматология. – 1990. - №1. – С. 37-41.

38. Николайчик В.В., Кирковский В.В., Лобачева Г.А. «Средние молекулы» - образование и способы определения // Лабораторное дело. – 1989. - №8. – С. 31-33.

39. Киреев С.С., Багмут Т.А., Курочкин М.Ю. Определение тяжести эндотоскикоза при критических состояниях организма // Педиатрия. – 1990. - №6. – С.107-109.

40. Владыка А.С., Беляков И.А. Диагностическое значение уровня МСМ в крови при оценке тяжести эндотоксинемии // Вестник хирургии. – 1989. – №8. – С. 126-129.

41. Иванов А.И., Сарнацкая В.В., Короленко Е.А. Модификация лигандной нагрузки и структуры сывороточного альбулина человека при различных методах выделения // Биохимия. – 1996. – т. 61. – вып.№5. – С. 903-912.

42. Миллер Ю.И., Добрецов Г.Е. Молекулярные основы флюоресцентного метода определения связывающей емкости альбулина сыворотки крови // Биохимия. – 1994. - №5. – С.20-28.

43. Мартыненко Л.Д., Шепелев А.П. Перекисное окисление липидов при экспериментальной сальмонеллезной инфекции // Журнал Микробиологии и эпидемиологии. – 1990. - №4.– С.7-10.

44. Чудинова В.В., Алексеев С.М. Перекисное окисление липидов и механизм антиоксидантного действия // Биоорганическая химия. – 1994. - №10. – т. 20. – С. 1029-1047.

45. Творогова М.Г. Степень достоверности однократного определения холестерина (обзор литературы) // Клиническая диагностика. – 1997. - №1. – С. 4-5.

46. Ильинский И.А., Лукинская Т.В. Циркулирующие иммунные комплексы при сальмонеллезе // Иммунология. -–1994. - №4. – С. 105-108.

47. Фролов В.М., Ющук И.Д. Иммунный статус больных сальмонеллезом // Иммунология. – 1992. - №10. – С. 108-112.

48. Нагаев Б.С., Габрилович М.И., Кимова И.А. Содержание среднемолекулярных пептидов в плазме крови больных сальмонеллезом // Инфекционные болезни. – 1996. - №6. – С. 12-17.

49. Field M., Musch M.W. Role of prostaglandins in regulation of instestional elektrolyte transport // Prostaglandins. – 1991. – vol.21. – P. 73-80.

50. Jaya P.S., Agstine J., Menon V.P. Roll of lipid peroxides, glutathione and antiperoxidative erzymes in alcohd and drus toxicity // Exp. Biol. Jndian J. – 1993. - №5. – P. 453-459.

51. Praper H.H., Sgvires E.J., Agarwal S., Hadley M. A comporative evalution of thiobarbituric acid methods for the determination of malondialdehyde in biological materials // Free. Radic. Biol. Med. – 1993. - №4. – P. 353-363.

52. Anderson D., Phillips B.T. Schemere P. The effect of variovus antioxidants and other modifying agents on oxygen radical generated DNA famage in human lymphucytes in the comet assay // Environ. and Mol. Mutagenes. – 1994. – 23. Suppl n.23. – P. 2-8.

53. Desharer David, Wood Gwendolyn E., Friedman Richard L. Mollecular characterirution of catalase from Bortetella pertussis: Jdentification of the Kat A promot er in an upstream insertion seguence // Mol. Microbiol. – 1994. – №1. – P. 123-130.

54. Cheigton W.D., Zambent P.H., Mischer P.A. Circulationg immune complexes in infections diseases // Jmmunol. – 1993. – v.111. – P. 1219-1227.

55. Webster David M., Rees Anthohy R. Antibody – antigen interactions // Curr. Opinion struct. Biol. – 1994. - №1. – P. 123-129.

56. Schimuzu T., Kondo R. A method for the detection of Medium – sized molecules //Anch. Biochem. – 1991. – vol. 206. – P. 271-276.

57. Bannet E.V. Chia D., Restivo C. et al. – peptides of the “middle molecules” group // Analyt. Biochem. – 1994. – vol. 86. – P.271-278.

ПРИЛОЖЕНИЕ


Приложение 1.

Биохимические показатели крови

практически здоровых людей, n =51.

№ п/п Ф. И. О. Возраст Пол Дата анализа МДА (мкМоль/л)

ЦИК

(усл. ед.)

Уровень холестерина

ммоль/л

Активность каталазы

МСМ

(усл. ед.)

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
1 К. В. И. 35 Ж 5.02.98. 3,59 30 3,47 19,4 0,358
2 К. Б. А. 39 М 5.02.98. 3,62 30 4,95 17,2 0,225
3 У. С. Б. 29 М 15.02.98. 2,18 45 3,54 16,1 0,352
4 И. И. И. 31 Ж 17.02.98. 3,6 60 5,188 16,8 0,214
5 К. В. Л. 34 М 17.02.98. 3,48 100 4,90 17,1 0,287
6 М. В. В. 40 М 17.02.98. 4,6 69 3,915 15,8 0,254
7 С. П. Б. 40 М 25.02.98. 3,59 40 4,056 16,6 0,269
8 Л. Е. В. 32 М 25.02.98. 3,47 30 5,047 15,7 0,362
9 Г. Т. Ю. 28 Ж 15.03.98. 4,65 76 5,141 16,2 0,261
10 А. И. А. 28 Ж 16.03.98. 3,53 34 5,188 16,9 0,253
11 Л. Л. Я. 40 Ж 16.03.98. 4,00 99 3,77 17,4 0,357
12 С. Б. И. 46 Ж 19.03.98. 3,45 70 3,33 18,2 0,167
13 С. И. В. 28 Ж 16.04.98. 3,48 35 3,49 16,3 0,253
14 М. А. И. 31 М 16.04.98. 3,54 61 3,40 14,5 0,256
15 Х. А. И. 37 М 22.04.98. 4,47 30 4,24 16,1 0,268
16 К. И. П. 30 М 22.04.98. 3,59 34 3,91 16,4 0,377
17 Р. И. И. 33 М 22.04.98. 4,35 110 5,14 17,3 0,245
18 И. И. А. 29 Ж 27.04.98. 3,48 31 5,33 17,8 0,280
19 И. В. А. 40 М 27.04.98. 3,60 60 4,24 18,1 0,218
20 М. И. В. 36 Ж 10.05.98. 3,54 54 5,09 17,6 0,382
21 С. В. Г. 32 М 10.05.98. 4,0 33 4,86 16,7 0,355
22 З. О. А. 32 М 12.05.98. 3,77 45 3,77 16,3 0,232
23 Я. В. В. 30 М 12.05.98 3,61 120 3,33 15,8 0,274
24 П. И. В. 31 М 17.05.98. 3,44 100 3,96 14,9 0,286
25 А. С. Б. 36 М 17.05.98. 2,93 69 5,14 16,8 0,253
26 С. А. И. 20 Ж 3.02.99. 3,61 70 5,19 16,6 0,268
27 М. И. В. 34 М 9.02.99. 3,53 43 5,05 17,3 0,351
28 Д. О. В. 37 Ж 9.02.99. 3,61 27 4,9 17,8 0,194
29 Т. С. Д. 22 М 16.02.99. 3,75 30 4,95 14,5 0,309
30 К. В. А. 28 М 9.04.99. 3,48 60 3,77 16,2 0,214
31 Ш. А. Л. 30 М 17.02.99 3,59 58 4,48 17,2 0,232
32 Г. А. К. 41 Ж 17.02.99 4,21 41 3,91 16,8 0,305
33 Ч. И. В. 24 М 16.02.99 3,99 30 5,05 16,3 0,265
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
34 С. О. Ю. 30 М 16.02.99. 3,57 35 3,58 16,9 0,239
35 С. С. М. 27 М 16.02.99. 3,02 46 3,39 15,7 0,248
36 М. С. В. 29 Ж 9.02.99. 2,50 38 5,14 14,3 0,372
37 Р. Т. А. 28 Ж 9.02.99. 3,88 33 3,77 16,2 0,245
38 С. С. В. 28 Ж 16.04.98. 2,61 54 4,24 16,8 0,261
39 С. В. В. 32 М 16.04.98. 3,14 37 5,38 17,1 0,379
40 Р. Т. В. 23 М 15.05.98. 3,99 19 4,95 18,3 0,358
41 О. А. Е. 25 М 15.05.98. 3,24 75 5,05 16,9 0,251
42 А. В. Е. 33 М 18.05.98. 3,88 28 4,56 17,5 0,275
43 Б. В. С. 44 М 18.05.98. 4,26 110 3,33 15,6 0,213
44 С. В. И. 30 Ж 19.02.99. 4,09 46 4,81 14,8 0,307
45 К. Ю. И. 46 М 19.02.99. 3,77 48 5,03 16,3 0,264
46 В. Ю. И. 37 М 27.03.98. 3,81 43 4,95 16,7 0,280
47 К. Е. И. 32 М 27.03.98. 3,54 44 5,33 16,9 0,232
48 Ж. Ю. С. 30 М 5.04.98. 4,04 85 3,77 17,3 0,218
49 П. В. А. 31 Ж 5.04.98. 3,15 23 4,24 18,8 0,381
50 Б. А. И. 31 М 13.04.98 3,45 37 5,05 16,8 0,239
51 Л. Т. Ю. 42 М 9.02.99. 3,04 59 5,33
Μ 3,61 52,62 4,45 16,7 0,280
m 0,07 3,52 0,68 0,15 0,01
σ 0,48 25,17 0,09 1,04 0,06

Приложение 2

Содержание биохимических показателей в сыворотке крови практически здоровых людей по данным литературы

Группа

обследованных

n

МДА

мкМоль/л

Активность

каталазы

мкат/л

ЦИК

усл. ед.

МСМ

усл. ед.

Холестерин

ммоль/л

Мартыненко Л.Д., 1990 31

4,36±0,27

Оконенко Л.Б., 1994 34 16,3±0,3
Куликов И.Н., 1996 40 54,2±3,2
Нагаев Б.С., 1996 70 0,31±0,02
Творогова М.Г. 1995 40 4,62±0,31

Приложение 3

Биохимические показатели крови практически здоровых людей, n=51

№ п/п Ф. И. О. Возраст Пол Дата анализа ЭКА (г/л)

ОКА

(г/л)

ОКА

(%)

Ит

(усл. ед.)

1 2 3 4 5 6 7 8 9
1 К. В. И. 35 Ж 5.02.98. 43 49 88 0,13
2 К. Б. А. 39 М 5.02.98. 46 53 87 0,15
3 У. С. Б. 29 М 15.02.98. 34 41 84 0,16
4 И. И. И. 31 Ж 17.02.98. 38 44 86 0,15
5 К. В. Л. 34 М 17.02.98. 48 56 86 0,16
6 М. В. В. 40 М 17.02.98. 47 52 90 0,10
7 С. П. Б. 40 М 25.02.98. 46 53 87 0,15
8 Л. Е. В. 32 М 25.02.98. 48 57 84 0,18
9 Г. Т. Ю. 28 Ж 15.03.98. 44 49 90 0,11
10 А. И. А. 28 Ж 16.03.98. 42 49 86 0,17
11 Л. Л. Я. 40 Ж 16.03.98. 46 51 90 0,11
12 С. Б. И. 46 Ж 19.03.98. 36 50 89 0,11
13 С. И. В. 28 Ж 16.04.98. 47 54 87 0,14
14 М. А. И. 31 М 16.04.98. 47 52 90 0,10
15 Х. А. И. 37 М 22.04.98. 45 50 90 0,11
16 К. И. П. 30 М 22.04.98. 35 41 85 0,17
17 Р. И. И. 33 М 22.04.98. 42 46 91 0,09
18 И. И. А. 29 Ж 27.04.98. 38 44 86 0,15
19 И. В. А. 40 М 27.04.98. 47 52 90 0,10
20 М. И. В. 36 Ж 10.05.98. 47 54 87 0,14
21 С. В. Г. 32 М 10.05.98. 34 41 84 0,16
22 З. О. А. 32 М 12.05.98. 46 53 87 0,15
23 Я. В. В. 30 М 12.05.98 39 44 88 0,12
24 П. И. В. 31 М 17.05.98. 51 55 93 0,07
25 А. С. Б. 36 М 17.05.98. 43 48 89 0,11
26 С. А. И. 20 Ж 3.02.99. 47 54 87 0,14
27 М. И. В. 34 М 9.02.99. 38 44 86 0,15
28 Д. О. В. 37 Ж 9.02.99. 49 55 89 0,12
29 Т. С. Д. 22 М 16.02.99. 36 40 89 0,11
30 К. В. А. 28 М 9.04.99. 38 44 86 0,15
31 Ш. А. Л. 30 М 17.02.99 40 43 93 0,08
32 Г. А. К. 41 Ж 17.02.99 42 46 91 0,09
33 Ч. И. В. 24 М 16.02.99 48 56 86 0,16
1 2 3 4 5 6 7 8 9
34 С. О. Ю. 30 М 16.02.99. 49 55 89 0,12
35 С. С. М. 27 М 16.02.99. 47 52 90 0,10
36 М. С. В. 29 Ж 9.02.99. 45 50 90 0,11
37 Р. Т. А. 28 Ж 9.02.99. 39 44 88 0,13
38 С. С. В. 28 Ж 16.04.98. 43 48 89 0,11
39 С. В. В. 32 М 16.04.98. 36 40 90 0,11
40 Р. Т. В. 23 М 15.05.98. 38 44 86 0,15
41 О. А. Е. 25 М 15.05.98. 35 41 85 0,17
42 А. В. Е. 33 М 18.05.98. 48 53 91 0,10
43 Б. В. С. 44 М 18.05.98. 37 44 84 0,18
44 С. В. И. 30 Ж 19.02.99. 45 50 90 0,11
45 К. Ю. И. 46 М 19.02.99. 47 54 87 0,14
46 В. Ю. И. 37 М 27.03.98. 44 51 86 0,16
47 К. Е. И. 32 М 27.03.98. 42 46 91 0,09
48 Ж. Ю. С. 30 М 5.04.98. 48 56 86 0,16
49 П. В. А. 31 Ж 5.04.98. 47 53 89 0,13
50 Б. А. И. 31 М 13.04.98 36 40 89 0,11
51 Л. Т. Ю. 42 М 9.02.99. 43 48 89 0,11
Μ 43 48,8 88 0,13
m 0,01
σ 0,03

Приложение 4

Биохимические показатели крови

больных сальмонеллезом в острый период, n =30.

№ п/п Ф. И. О. Возраст Пол Дата анализа № истории болезни МДА (мкМоль/л)

ЦИК

(усл. ед.)

Уровень

холестерина

ммоль/л

Активность каталазы

МСМ

(усл. ед.)

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
1 М. А. М. 32 М 14.02.98. 160А02.8 5,84 74 5,37 13,6 0,611
2 Л. В. И. 37 М 14.02.98. 230А02.08 6,02 133 8,91 12,7 0,537
3 С. О. Е. 29 М 9.02.99. 410А02.1 7,18 96 5,74 13,8 0,683
4 Б. В. И. 46 Ж 9.02.99. 182А02.1 5,93 111 5,68 13,1 0,700
5 Х. В. В. 28 Ж 11.07.99. 523А02.0 8,13 120 4,75 14,4 0,570
6 С. Н. Е. 19 Ж 12.10.98. 728А02.8 9,34 82 7,03 11,8 0,700
7 М. О. И. 24 Ж 11.10.98. 615А02.8 6,59 140 9,85 10,9 0,782
8 К. Г. А. 32 М 3.03.98. 363А02.8 7,77 68 7,3 13,5 0,604
9 Д. И. Е. 39 М 3.03.98. 290А02.8 5,96 97 5,72 13,0 0,543
10 Е. Т. А. 17 Ж 10.02.98. 490А02.1 8,93 88 4,12 12,7 0,529
11 Р. О. А. 37 Ж 10.02.98. 517А02.1 7,13 105 8,91 13,5 0,690
12 К. С. И. 39 М 27.02.98. 560А02.8 6,60 92 5,7 13,1 0,581
13 Ш. Г. В. 25 Ж 13.03.98. 393А02.8 7,25 148 4,82 13,6 0,742
14 Б. И. Р. 41 М 13.03.98. 102А02.8 8,18 105 6,84 12,8 0,458
15 П. О. К. 33 Ж 4.07.98. 280А02.8 9,05 76 4,72 12,4 0,617
16 К. И. И. 29 Ж 4.07.98. 432А02.1 5,94 115 9,67 13,7 0,610
17 Т. С. И. 31 Ж 4.07.98. 630А02.0 6,64 73 5,9 13,2 0,623
18 С. И. В. 47 М 28.09.98. 216А02.0 7,81 108 5,06 13,6 0,542
19 К. И. Б. 42 Ж 28.09.98. 390А02.8 8,20 139 4,84 11,7 0,413
20 П. О. А. 53 М 15.02.99. 575А02.8 6,95 132 6,45 10,9 0,562
21 С. И. П. 25 М 15.02.99. 721А02.8 7,17 99 5,6 12,8 0,717
22 Е. Т. С. 24 Ж 17.02.99. 470А02.8 5,27 114 8,48 13,6 0,657
23 З. О. Ю. 36 М 17.02.99. 370А02.0 7,53 83 5,52 14,2 0,614
24 М. Л. А. 41 М 6.10.98. 182А02.0 8,41 92 7,73 13,3 0,534
25 Д. С. К. 22 Ж 6.10.98. 652А02.8 6,12 100 7,73 13,8 0,586
26 К. С. Д. 18 Ж 11.10.98. 713А02.8 7,03 86 10,15 12,9 0,570
27 Е. А. В. 43 М 28.08.98. 760А02.8 5,90 77 6,8 13,7 0,681
28 М. О. Р. 33 М 28.08.98. 535А02.8 7,77 69 6,24 13,6 0,649
29 П. З. Л. 30 Ж 7.12.98. 862А02.0 6,78 102 5,72 13,7 0,740
30 Е. В. В. 31 Ж 7.12.98. 718А02.8 8,27 95 3,89 12,9 0,531
Μ 7,19 100,63 6,54 13,09 0,550
m 0,196 4,04 0,07 0,16 0,02
σ 1,07 22,138 0,01 0,85 0,11

Приложение 5

Биохимические показатели крови

больных сальмонеллезом в стадии ремиссии, n =30.

№ п/п Ф. И. О. Возраст Пол Дата анализа № истории болезни МДА (мкМоль/л)

ЦИК

(усл. ед.)

Уровень

холестерина

ммоль/л

Активность каталазы

МСМ

(усл. ед.)

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
1 М. А. М. 32 М 14.02.98. 160А02.8 3,84 54 3,77 15,8 0,225
2 Л. В. И. 37 М 14.02.98. 230А02.8 4,02 48 4,95 15,6 0,287
3 С. О. Е. 29 М 9.02.99 410А02.1 5,18 35 5,14 14,5 0,354
4 Б. В. И. 46 Ж 9.02.99. 182А02.1 3,03 96 4,24 16,1 0,268
5 Х. В. В. 28 Ж 11.07.98. 523А02.0 4,15 77 5,19 16,4 0,256
6 С. И. Е. 19 Ж 12.10.98. 728А02.8 5,96 68 3,96 15,7 0,358
7 М. О. И. 24 Ж 11.10.98. 615А02.8 3,19 58 3,39 14,9 0,280
8 К. Г. А. 32 М 3.03.98. 363А02.8 4,17 60 5,05 14,5 0,332
9 Д. И. Е. 39 М 3.03.98. 290А02.8 2,98 56 5,14 16,2 0,253
10 Е. Т. А. 17 Ж 3.03.98. 490А02.1 5,63 73 4,95 17,3 0,209
11 Р. О. А. 37 Ж 10.02.98 517А02.1 3,65 100 5,24 15,8 0,209
12 К. С. И. 39 М 10.02.98. 560А02.8 3,53 83 5,09 14,3 0,214
13 Ш. Г. В. 25 Ж 27.02.98. 393А02.8 4,12 69 3,77 17,6 0,272
14 Б. И. Р. 41 М 13.03.98. 102А02.8 3,68 75 4,24 17,1 0,353
15 П. О. К. 33 Ж 13.03.98. 280А02.8 4,16 81 3,77 15,3 0,386
16 К. И. И. 29 Ж 4.07.98. 432А02.1 2,93 63 5,05 17,7 0,232
17 Г. С. И. 31 Ж 4.07.98. 630А02.0 3,57 77 3,75 16,8 0,305
18 С. И. В. 47 М 4.07.98. 216А02.8 3,69 68 4,24 16,4 0,265
19 К. И. Б. 42 Ж 28.09.98. 390А02.8 4,12 100 3,92 15,9 0,413
20 П. О. А. 53 М 28.90.98. 575А02.8 3,95 64 4,16 16,8 0,294
21 С. И. П. 25 М 15.02.99. 721А02.8 3,17 73 5,33 14,3 0,562
22 Е. Т. С. 24 Ж 15.02.99. 470А02.8 2,50 72 4,81 14,9 0,531
23 З. О. Ю. 36 М 17.02.99 370А02.0 4,53 59 4,24 15,6 0,309
24 М. Л. А. 41 М 17.02.99. 182А02.0 4,41 43 5,02 16,3 0,265
25 Д. С. К. 22 Ж 6.10.98. 652А02.8 3,12 48 3,33 16,9 0,272
26 К. С. Д. 18 Ж 6.10.98. 713А02.8 3,03 66 5,91 15,7 0,239
27 Е. А. В. 43 М 11.10.98. 760А02.8 2,90 72 3,89 15,9 0,245
28 М. О. Р. 33 М 28.08.98. 535А02.8 4,77 73 4,74 16,2 0,179
29 П. З. Л. 30 Ж 7.12.98. 862А02.0 3,78 80 5,58 14,7 0,524
30 Е. В. В. 31 Ж 7.12.98. 718А02.8 4,27 77 3,68 13,9 0,355
Μ 3,87 68,9 4,65 15,84 0,31
m 0,15 2,8 0,7 0,19 0,02
σ 0,81 15,41 0,09 1,02 0,1

Приложение 6

Биохимические показатели крови больных сальмонеллезом в острый период, n=30

№ п/п Ф. И. О. Возраст Пол Дата анализа ЭКА (г/л)

ОКА

(г/л)

ОКА

(%)

Ит

(усл. ед.)

1 2 3 4 5 6 7 8 9
1 К. В. И. 35 Ж 5.02.98. 42 54 78 0,28
2 К. Б. А. 39 М 5.02.98. 42 56 75 0,33
3 У. С. Б. 29 М 15.02.98. 44 59 74 0,35
4 И. И. И. 31 Ж 17.02.98. 38 49 77 0,29
5 К. В. Л. 34 М 17.02.98. 47 59 79 0,25
6 М. В. В. 40 М 17.02.98. 42 57 74 0,37
7 С. П. Б. 40 М 25.02.98. 42 55 76 0,31
8 Л. Е. В. 32 М 25.02.98. 43 54 80 0,26
9 Г. Т. Ю. 28 Ж 15.03.98. 44 59 75 0,35
10 А. И. А. 28 Ж 16.03.98. 45 55 82 0,22
11 Л. Л. Я. 40 Ж 16.03.98. 44 59 75 0,34
12 С. Б. И. 46 Ж 19.03.98. 40 51 78 0,27
13 С. И. В. 28 Ж 16.04.98. 42 58 72 0,38
14 М. А. И. 31 М 16.04.98. 42 56 75 0,34
15 Х. А. И. 37 М 22.04.98. 45 54 83 0,21
16 К. И. П. 30 М 22.04.98. 38 55 69 0,43
17 Р. И. И. 33 М 22.04.98. 38 49 78 0,29
18 И. И. А. 29 Ж 27.04.98. 44 55 80 0,25
19 И. В. А. 40 М 27.04.98. 42 57 74 0,36
20 М. И. В. 36 Ж 10.05.98. 43 57 75 0,32
21 С. В. Г. 32 М 10.05.98. 35 41 85 0,17
22 З. О. А. 32 М 12.05.98. 47 58 81 0,24
23 Я. В. В. 30 М 12.05.98 40 51 78 0,27
24 П. И. В. 31 М 17.05.98. 43 50 86 0,16
25 А. С. Б. 36 М 17.05.98. 42 56 75 0,33
26 С. А. И. 20 Ж 3.02.99. 43 54 80 0,26
27 М. И. В. 34 М 9.02.99. 42 58 72 0,38
28 Д. О. В. 37 Ж 9.02.99. 48 57 84 0,19
29 Т. С. Д. 22 М 16.02.99. 45 54 83 0,21
30 К. В. А. 28 М 9.04.99. 38 49 78 0,29
Μ 42,3 54,5 77,7 0,29
m 2,87 3,52 0,01
σ 17,6 24,12 0,07

Приложение 7

Биохимические показатели крови больных сальмонеллезом в стадии ремиссии, n=30

№ п/п Ф. И. О. Возраст Пол Дата анализа ЭКА (г/л)

ОКА

(г/л)

ОКА

(%)

Ит

(усл. ед.)

1 2 3 4 5 6 7 8 9
1 К. В. И. 35 Ж 5.02.98. 46 53 86 0,15
2 К. Б. А. 39 М 5.02.98. 34 41 84 0,16
3 У. С. Б. 29 М 15.02.98. 38 44 86 0,15
4 И. И. И. 31 Ж 17.02.98. 47 51 84 0,18
5 К. В. Л. 34 М 17.02.98. 42 51 86 0,16
6 М. В. В. 40 М 17.02.98. 36 40 89 0,11
7 С. П. Б. 40 М 25.02.98. 47 51 84 0,18
8 Л. Е. В. 32 М 25.02.98. 35 41 85 0,17
9 Г. Т. Ю. 28 Ж 15.03.98. 36 40 85 0,11
10 А. И. А. 28 Ж 16.03.98. 46 53 86 0,15
11 Л. Л. Я. 40 Ж 16.03.98. 39 44 88 0,12
12 С. Б. И. 46 Ж 19.03.98. 54 63 86 0,16
13 С. И. В. 28 Ж 16.04.98. 36 50 89 0,11
14 М. А. И. 31 М 16.04.98. 36 42 86 0,17
15 Х. А. И. 37 М 22.04.98. 44 52 85 0,18
16 К. И. П. 30 М 22.04.98. 48 56 86 0,16
17 Р. И. И. 33 М 22.04.98. 43 48 90 0,12
18 И. И. А. 29 Ж 27.04.98. 42 47 89 0,12
19 И. В. А. 40 М 27.04.98. 49 56 88 0,14
20 М. И. В. 36 Ж 10.05.98. 35 41 85 0,17
21 С. В. Г. 32 М 10.05.98. 47 52 90 0,10
22 З. О. А. 32 М 12.05.98. 43 49 88 0,13
23 Я. В. В. 30 М 12.05.98 44 49 90 0,11
24 П. И. В. 31 М 17.05.98. 46 51 90 0,11
25 А. С. Б. 36 М 17.05.98. 51 55 92 0,07
26 С. А. И. 20 Ж 3.02.99. 44 51 86 0,15
27 М. И. В. 34 М 9.02.99. 48 54 89 0,13
28 Д. О. В. 37 Ж 9.02.99. 42 49 86 0,17
29 Т. С. Д. 22 М 16.02.99. 48 57 84 0,18
30 К. В. А. 28 М 9.04.99. 45 54 83 0,20
Μ 43 50 84,3 0,15
m 2,16 3,8 0,01
σ 14,9 15,41 0,03
ОТКРЫТЬ САМ ДОКУМЕНТ В НОВОМ ОКНЕ

ДОБАВИТЬ КОММЕНТАРИЙ [можно без регистрации]

Ваше имя:

Комментарий