| Антиген | Количество образцов | Положительный тест результат, % | |
| Агглютинационный тест | Антиглобулиновый тест | ||
| О78:К80 | 15 | (8) 53,3 | (10) 66,7 |
| О119:К69 | 15 | (8) 53,3 | (11) 73,3 |
| О137:К79 | 15 | (10) 66,7 | (12) 80,0 |
Результаты титрации парных образцов сыворотки молозива, полученного при первом доении коров и сыворотки, приготовленной из крови телят через 12-24 ч после кормления молозивом представлены в табл. 2.17.
В таблице учтены только тест позитивные реакции против специфических О-антигенов Е. coli: О78:К80, О119:К69, О137:К79. В некоторых пробах титр антител в сыворотке крови телят был незначительно выше или равнялся уровню антител в сыворотке молозива. Тем не менее, средний титр в сыворотке крови телят был почти на два разведения меньше, чем в сыворотке молозива.
| Антиген | Тест | Количество проб | Средний титр в сыворотках | |
| молозива коров | крови телят | |||
| О78:К80 | Агглютинационный | 8 | 7,87±0,84 | 5,37±0,87 |
| Антиглобулиновый | 10 | 9,1±0,99 | 5,9±0,73 | |
| О119:К69 | Агглютинационный | 8 | 8,37±0,92 | 6,12±0,83 |
| Антиглобулиновый | 11 | 9,45±0,82 | 7,27±0,84 | |
| О137:К79 | Агглютинационный | 10 | 9,60±0,84 | 7,3±0,77 |
| Антиглобулиновый | 12 | 10,25±0,96 | 9,42±0,82 | |
2.2.7.4 Абсорбция антител против О-антигенов Е. coli из сыворотки молозива и крови телят.Две пробы сыворотки молозива и 3 сыворотки крови однодневных телят были абсорбированы Е. coliантигеном для определения специфичности антител. Данные, полученные абсорбционным тестом, представлены в табл. 2.18.
Все исследуемые пробы, абсорбированные антигеном, подавляли активность антител к антигену, в то же время, как правило, превосходили антитела против других антигенов. Антитела против антигена О137:К79 имели влияние на абсорбцию по сравнению с другими антигенами.
Почти все пробы сывороток имели антитела в высоких титрах против О-антигенов к трем серотипам Е. coli. Сходные антитела были выявлены в нормальном молоке в меньшей степени и в значительно низких титрах. Колостральные антитела вероятно, отражали контакт (инфицирование) коров с различными серотипами Е. coli. Титр антител против О78:К80 был наименьшим из трех тестированных антигенов. Результаты абсорбционного теста указывают, что антитела против О78:К80 наиболее легко абсорбируются по сравнению с другими серотипами Е. coli. Эти данные указывают, что антитела реагирующие с О78:К80 не обладают высокой специфичностью и могут вступать в перекрестную реакцию с другими микроорганизмами, инфицирующими коров. Высокий уровень антител, выявляемый в сыворотке молозива, соответствовал и высокому уровню антител в сыворотке крови телят через несколько часов после кормления молозивом.
| Источник антител | Абсорбент | Титр антител | |||||
| О78:К80 | О119:К69 | О137:К79 | |||||
| АГТ* | АНТ | АГТ | АНТ | АГТ | АНТ | ||
| Молозиво №4456 | нет | (1:32) 5 | (1:128) 7 | (1:128) 7 | (1:256) 8 | (1:64) 6 | (1:512) 9 |
| О78:К80 | 0 | 0 | (1:32) 5 | (1:128) 7 | (1:64) 6 | (1:512) 9 | |
| О119:К69 | 0 | 0 | 0 | 0 | (1:16) 4 | (1:128) 7 | |
| О137:К79 | 0 | 0 | (1:32) 5 | (1:128) 7 | 0 | 0 | |
| Молозиво №3457 | нет | (1:32) 5 | (1:64) 6 | (1:32) 15 | (1:256) 18 | (1:64) 6 | (1:1024) 10 |
| О78:К80 | 0 | 0 | (1:16) 4 | (1:64) 6 | (1:64) 6 | (1:1024) 10 | |
| О119:К69 | 0 | (1:32) 5 | 0 | 0 | (1:64) 6 | (1:1024) 10 | |
| О137:К79 | 0 | (1:8) 3 | (1:32) 5 | (1:128) 7 | 0 | 0 | |
| Сыворотка телят №4757 (однодневный возраст) | нет | (1:64) 6 | (1:128) 7 | (1:128) 7 | (1:256) 8 | (1:32) 5 | (1:512) 9 |
| О78:К80 | 0 | 0 | (1:16) 4 | (1:128) 7 | (1:32) 5 | (1:512) 9 | |
| О119:К69 | (1:32) 5 | (1:128) 7 | 0 | 0 | (1:32) 5 | (1:128) 7 | |
| О137:К79 | (1:16) 4 | (1:64) 6 | (1:128) 6 | (1:128) 7 | 0 | 0 | |
| Сыворотка телят №4759 (однодневный возраст) | нет | (1:128) 7 | (1:256) 8 | (1:256) 8 | (1:512) 9 | (1:256) 8 | (1:512) 9 |
| О78:К80 | 0 | 0 | (1:32) 5 | (1:64) 6 | (1:128) 7 | (1:256) 8 | |
| О119:К69 | (1:4) 2 | (1:8) 3 | 0 | 0 | (1:64) 6 | (1:256) 8 | |
| О137:К79 | (1:32) 5 | (1:64) 6 | (1:64) 6 | (1:128) 7 | 0 | 0 | |
| Сыворотка телят №4767 (однодневный возраст) | нет | (1:64) 6 | (1:64) 6 | (1:128) 7 | (1:512) 9 | (1:64) 6 | (1:1024) 10 |
| О78:К80 | 0 | 0 | (1:16) 4 | (1:256) 8 | (1:16) 4 | (1:32) 5 | |
| О119:К69 | (1:8) 3 | (1:16) 4 | 0 | 0 | (1:16) 4 | (1:128) 7 | |
| О137:К79 | (1:16) 4 | (1:32) 5 | (1:32) 5 | (1:512) 9 | 0 | 0 | |
* Титр выражен в log2АГТ — агглютинационный тестАНТ — антиглобулиновый тест
Антитела в сыворотках молозива и крови однодневных телят были резистентными к инактивации CH2SH-CH2OH-меркаптоэтанолом, что указывает на то, что они не являются макроглобулинами. Этот результат подтверждает данные, что антитела не продуцируются новорожденными телятами, а приобретаются после рождения из молозива. У семи из 23 телят, кормившихся молозивом, активность агглютинирующих антител против трех О-антигенов Е. coliне была установлена. Эти же телята имели и низкий уровень иммуноглобулинов после кормления молозивом, что указывает на анормальную абсорбцию иммуноглобулинов из желудочно-кишечного тракта.
Значение К агглютининов, как фактора в молозиве, который защищает телят против колибактериоза установили [С. J. Howard, A. A. Glynn, 1971], после того как некоторые телята приобретали после рождения агглютинины из молозива, которые реагировали с К-антигеном из штаммов Е. coliассоциирующими с заболеванием.
Агглютинины к К-антигену из Е. coliассоциировались с увеличением вирулентности микроорганизмов [С. С. Gay, S. M. Parish, T. C. McGuire 1982]. Следовательно, антитела против К-антигена считают доказанным фактором в резистентности неонатальных телят против Е. coliинфекции.
Вначале исследования по определению антител в К-антигену, проводили прямой агглютинацией к идентифицированным микроорганизмами [E. Neter, E. A. Gorzynski, R. M. Gino, O. Westphal and O. Luderwitz. 1956]. Более чувствительные методы выявления антител в человеческой крови из пуповины к энтеробактериальным антигенам были установлены при применении пассивной гемагглютинации [E. Neter, 1957]. Антитела, выявляемые этими чувствительными гемагглютинационными тестами, могут быть существенными в увеличении резистентности неонатальных телят против колибактериоза. Эти антитела, пассивно приобретенные после рождения телятами из молозива коров, были тестированы в динамике.
В опыте находились 23 телят черно-пестрой породы в первые 5 дней. Телят кормили молозивом, а затем свежим молоком.
Антигены приготовляли из трех серотипов Е. coli. Серотипы О78:К80, О119:К69 и О137:К79 были изолированы от телят с инфекционной диареей в учхозе «Кетросу» района Анений Ной. Бактерии выращивали на кровяном агаре, при этом гладкие и слизеподобные колонии пересевали на агар Мак-Конки.
Часть колоний из агара Мак Конки были тестированы пластинчатой реакцией агглютинации (на предметном стекле со специфическими К-антисыворотками). Колонии-тест-положительные были отобраны для приготовления К-антигена Е. coli.
Культивирование бактерий и приготовление антигенов было сходным с получением О-антигенов Е. coliза исключением того, что Е. coliприменявшаяся для приготовления К-антигена не нагревалась, и для смыва бактерий использовали солевой раствор (0,85 %), содержащий 0,5 % формальдегида. Бактерии были экстрагированы при добавлении ацетона непосредственно после их смыва с агаровой культуры и промыты.
Пробы молозива отбирали от 23 коров в молочном стаде учебного хозяйства при первом доении после отела. Двадцать три пробы цельного молока получали от коров средней лактации, сравнивая уровень антител с уровнем в молозиве. Молочную сыворотку приготовляли из молозива и молока и тестировали на антитела, подобным методом, как и сыворотку крови. Пробы крови отбирали у телят вскоре после рождения с интервалом 12-24 ч. Кровь выдерживали при комнатной температуре до появления сгустка и сыворотку отделяли в течение 6 ч. Пробы сыворотки крови, молозива и молока хранили при -20° С.