При легкой форме гепатита В+С повышенная, по сравнению с нормой. активность СОД в 1,9-2.0 раза (90,0±10.0 ед, Р<0,001) в период разгара. сохранялась на протяжении всего заболевания и к периоду ранней реконвалесценции составляла 88,3±30,0 ед.
Процессы свободнорадикального окисления в одинаковой мере затрагивают все мембранные образования внутриклеточных структур и субклеточные образования, в том числе оказывают дестабилизирующее влияние на ядерный хроматин Содержание продуктов деградации нуклеотидов (ПДН) в лимфоцитах в разгар ОВГВ повышалось вне зависимости от формы тяжести в 1.2-1,3 раза по сравнению с нормой (легкая форма -57,9±2,74%, Р<0,01; форма средней тяжести - б2.1±1.94%> Р<0,001; тяжелая форма - 58,8±3.2%, Р<0,001, норма - 48.5+1,19%) К периоду ранней реконвалесценции содержание ПДН не менялось, оставаясь стабильно повышенным на протяжении всего заболевания.
При легкой форме ВГВ+С в период разгара происходило увеличение уровня ПДН в 1,4-1.5 раза (70.7±5,85%), что достоверно превышало норму. В реконвалесценцию показатель соответствовал уровню ПДН здоровых лиц (49,2±5,79%)
Содержание нуклеотидов в лимфоцитах можно оценить по показателю соотношения РНК и ДНК (Ко), отражающего биосинтетические процессы, усиление которых сопровождает клеточное деление и дифференцировку лимфоцитов в процессе развития иммунных реакций (Юсупова Л Б . Шевляков В В , 1993, Гладких С.И и др., 1995; Scott D. I., Lincoln Y.S , 1983) Усиление функциональной активности лимфоцитов по величине Ка наблюдалось у всех больных ОВГВ в период разгара вне зависимости от формы тяжести. При норме 5,01+0.77 ед, у больных легкой формой Ко, был повышен в 1,6 раза (7.97+1.01 ед. Р<0,05), средней тяжести - в 1,8-1,9 раза (9,47±1,79 ед, РО.05), тяжелой формой - в 1.6-1,7 раза (8,3±1,2 ед. Р<0,02) В динамике гепатита Ко имел тенденцию к повышению у больных легкой (9.55±2,74 ед) и формой средней тяжести (12.1+0,90 ед). При тяжелой форме показатель оставался стабильно повышенным на протяжении заболевания (8,28±3,71 ед), что может свидетельствовать о меньших компенсаторных возможностях биосинтетических процессов в ИКК.
Иммунная система, имеющая основное значение в развитии и проявлениях HBV- и HCV-инфекций. характеризуется определенным уровнем метаболизма своих клеточных элементов Снижение или повышение энергетики лимфоцитов отражает уровень реакций иммунной системы на различные воздействия, что проявляется изменением активности ферментов основных обменных циклов (Захарова Л.Б и др. 1989, Робинсон М.В . 1989, 1994).
Метаболизм лимфоцитов больных ОВГВ существенно изменен за счет снижения активности альфа-ГФДГ - фермента глицеролфосфатного челночного механизма митохондриального переноса электронов, характеризующего напряженность энергетического обмена. Достоверное, по сравнению с нормой, снижение активности цитозольной изоформы альфа-ГФДГ в лимфоцитах наблюдалось у больных легкой (0,17±0.01 ед. экс.. Р<0,01) и формой средней тяжести (0.19+0,01 ед. экс , Р<0,01), при норме - 0,28±0,02 ед. экс. Выявлена зависимость активности альфа-ГФДГ от формы тяжести наименьшая при легкой форме ОВГВ и без существенного отличия от нормы - при тяжелой (0,21 ± 0,02 ед. экс. ). Активность митохондриальной изоформы альфа-ГФДГ имела тенденцию к снижению в разгар гепатита. По мере купирования острых проявлений заболевания прослеживалась тенденция к повышению активности обеих изоформ альфа-ГФДГ при легкой и форме средней тяжести и к снижению - при тяжелом течении ОВГВ.
Активность одного из ферментов основного пути окисления (цикла Кребса) - сукцинатдегидрогеназы (СДГ) во всех группах обследованных находилась в пределах показателей здоровых лиц.
Изучение активности основного фермента анаэробного окисления (гликолиза) - лактатдегидрогеназы (ЛДГ) показало тенденцию к ее снижению в разгар ОВГВ. Достоверное уменьшение показателя в сравнении с нормой было у больных средней тяжести (0,22±0,01 ед зкс., норма - 0,29±0,02 ед экс , Р<0,05) При легкой форме этот показатель находился в пределах 0.2±0.01 ед экс, тяжелой - 0,20+0,01 ед. экс. В период ранней реконвалесценции выявленное изменение активности ЛДГ во всех группах сохранялось без существенной динамики.
У больных ОВГВ выявлена тенденция к снижению активности НАД- и НАДФ-оксидаз, осуществляющих восстановление окисленных форм НАД и НАДФ, необходимых для синтеза АТФ. Данные показатели не различались у больных обследованных групп. Достоверно низкими, по сравнению с нормой, были показатели активности НАДФ-оксидазы у больных средней тяжести, как в разгар, так и в период ранней реконвалесценции.
У больных легкой формой гепатита В+С активность изученных ферментов в лимфоцитах имела изменения, аналогичные легкой форме ОВГВ. за исключением активности ЛДГ, которая была достоверно снижена в разгар заболевания по сравнению со здоровыми лицами (0,19±0,01 ед экс, Р<0,02) и оставалась сниженной в восстановительный период (0.175±0,006 ед. экс.) и активности НАДФ-оксидазы, достоверно сниженной по сравнению с нормой в период разгара и в период ранней реконвалесценции (0.09±0,01 ед. экс, Р<0,05 и 0,080+0,004 ед, экс., Р<0,02, соответственно).
Несмотря на отсутствие достоверньк отличий от показателей здоровых лиц активности большинства изученных ферментов, выявленные изменения свидетельствуют о сдвигах в биоэнергетических процессах и внутриклеточном метаболизме лимфоцитов в ходе развития иммунного ответа на HBV- и НВС-инфекции, что может оказывать влияние на функционирование ИКК и иммунной системы в целом. Учитывая выявленные нарушения обменных процессов, происходящих в лимфоцитах. представляло интерес изучить показатели Т- и В-клеточного звена иммунитета и состояние неспецифической резистентности у больных ОВГВ.
Как показали наши исследования, изменения клеточного звена иммунной системы у больных острой HBV-инфекцией характеризовались нарушением регуляции и количественным дисбалансом субпопуляций Т- и В-лимфоцитов и изменением функциональных возможностей ИКК, что соответствуют литературным данным ( Юшук Н Д и др. 1994, Соринсон С.Н. и др., 1996; Чешик С.Г и др., 1996: Barhaba V ct al., 1993; Davis G L . 1993, Moreno Otero R. et al., 1996, Chisari F V.. 1997).
Таким образом, обнаруженные изменения в иммунном статусе больных ОВГВ, по данным большинства показателей, оказались несущественными, что свидетельствует о достаточности компенсаторных механизмов, развивающихся в ответ на вирусную гепатитную инфекцию. В то же время, выявленные нами функционально-метаболические сдвиги в основной рабочей клетке иммунной системы - лимфоците являются более чувствительным индикаторным методом оценки состояния ИКК, которые оказывают влияние на состояние и функционирование иммунной системы в целом, что отражается на течении и исходах вирусных гепатитов В, С. В+С
ВЫВОДЫ
1 В разгар ОВГВ у большинства обследованных больных выявлено усиление процессов липопероксидации в лимфоцитах и в плазме крови. характеризующееся увеличением уровня вторичного продукта ПОЛ - малонового диальдегида Аналогичные изменения обнаружены у больных гепатитом В+С
Степень повышения уровня МДА соответствовала форме тяжести- При тяжелой форме показатель был достоверно выше- чем у больных легкой и средней тяжести.
2. При вирусных гепатитах различной этиологии (ОВГВ. ВГС. ВГВ+С) установлены разнонаправленные изменения показателей интенсивности ПОЛ в лимфоцитах.
В разгар легкой формы ОВГВ и ВГВ+С выявлено достоверное увеличение уровня МДА в лимфоцитах По мере угасания клинических и биохимических признаков гепатита выявлена тенденция к снижению показателя МДА, но у 90,0% больных показатель был выше нормы.
При легкой форме ВГС уровень МДА в разгар заболевания не отличался от нормы, а к периоду реконвалесценции был достоверно повышен.
3. По мере угасания клинико-биохимических проявлений гепатита обнаружено снижение уровня МДА у большинства обследованных больных, значения которого оставались достоверно выше показателей здоровых лиц
У больных, обследованных в первые дни после курса АЛОК отмечено на фоне уменьшения активности АлАТ значительное повышение уровня МДА в лимфоцитах.
4 Усиление антиоксидантной защиты в лимфоцитах при ОВГВ характеризуется увеличением активности ее основного фермента - супероксиддисмутазы в разгар легкой и среднетяжелой формы в среднем в 1,4 раза, тяжелой - в 2,3-3,8 раза. В динамике заболевания наблюдается еще большее увеличение активности СОД при нетяжелых формах и, напротив. снижение показателя у больных тяжелой формой ОВГВ,
5 Усиление процессов ПОЛ в лимфоцитах закономерно приводит к усилению эндонуклеолиза, деструкции хроматина и выходу продуктов деградации нуклеотидов в цитозоль клетки. Это подтверждается стабильно увеличенным содержанием ПДН в лимфоцитах на протяжении ОВГВ при всех формах тяжести,
6. При ОВГВ происходит изменение внутриклеточного метаболизма лимфоцитов, о чем свидетельствует достоверное снижение активности альфа-ГФДГ при формах легкой и средней тяжести и НАДФ-оксидазы при среднетяжелом течении.
При легкой форме ВГВ+С активность ферментов была аналогична показателям при легкой форме ОВГВ
7 Структурно-функциональные и метаболические изменения в лимфоцитах при ОВГВ, ВГС и ВГВ+С соответствуют форме тяжести и периоду заболевания и связаны с активацией иммунокомпетентных клеток при гепатитной инфекции, что имеет патогенетическое значение и может служить дополнительным критерием оценки тяжести и прогноза течения заболевания.
В качестве дополнительного критерия оценки формы тяжести и прогнозирования течения вирусных гепатитов В, В+С с первых дней желтушного периода рекомендуется использовать определение уровня вторичного продукта ПОЛ - малонового диальдегида (МДА) в лимфоцитах и в плазме крови.