Н.С. Морозкина, Н.С. Шпаковская
Иммунодиагностика Туберкулеза
Минск 2003
МИНИСТЕРСТВО Здравоохранения РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ
Белорусский государственный медицинский университет
Кафедра фтизиопульмонологии
Н.С. Морозкина, Н.С. Шпаковская
Иммунодиагностика туберкулеза
Методические рекомендации
Минск 2003
УДК- 616-002.5-02:616.98 (075.8)
ББК – 55.4я73
Т81
А в т о р ы: канд. мед. наук, асс. Морозкина Н.С., канд. биол. наук, вед. научный сотрудник ГУНИИ пульмонологии и фтизиатрии Министерства здравоохранения Республики Беларусь Шпаковская Н.С.
Р е ц е н з е н т ы: научный руководитель отдела иммуноморфологических методов исследования НИИ ПиФ МЗ РБ, доктор мед. наук, Л.К. Суркова
Утверждено Научно-методическим советом университета в качестве методических рекомендаций _________ 2003 г., протокол № _____
Морозкина Н.С., Шпаковская Н.С.
Иммунодиагностика туберкулеза : метод. рекомендации. – Мн.: БГМУ. 2003 – 19 с.
Приводится краткое описание тестов оценки иммунного статуса человека. Излагаются отдельные варианты иммунологической реактивности больных туберкулезом в зависимости от формы и стадии болезни. Особое внимание уделяется методам иммунодиагностики туберкулеза.
Предназначается для студентов IV-V-VI курсов педиатрического, лечебного и медико-профилактического факультетов, а также для врачей-стажеров.
УДК- 616-002.5-02:616.98 (075.8)
ББК – 55.4я73
Общее время занятия: 3 часа
Мотивационная характеристика темы
Тема «Иммунодиагностика туберкулеза» является одним из разделов темы занятия: туберкулинодиагностика; методы определения специфической сенсибилизации организма; значение иммунологических тестов в диагностике, определении активности туберкулезного процесса и оценке эффективности лечения.
Современная диагностика любого инфекционного заболевания, в том числе и туберкулеза, основывается на обнаружении возбудителя болезни или его специфических маркеров (антигенов, антител). От сроков установления правильного клинического диагноза, назначения адекватного лечения зависят эффективность терапии, прогноз заболевания и часто - жизнь больного. Нередко общепринятый доступный комплекс клинико-рентгенологических и лабораторных исследований не позволяет выявить туберкулезную этиологию процесса и провести дифференциальную диагностику туберкулеза. В таких случаях большую практическую ценность приобретают дополнительные специальные методы исследования, результаты которых подтверждают или отрицают предполагаемый диагноз. Среди этих методов важнейшими являются иммунологические.
Цель занятия: изучить современные методы иммунодиагностики туберкулеза.
Задачи занятия:
1. Закрепить знания по оценке иммунного статуса человека (тесты гуморального и клеточного иммунитета, факторы неспецифической резистентности).
2. Изучить методы иммунологической диагностики туберкулеза.
3. Изучить методы оценки противотуберкулезного иммунитета.
4. Изучить показания к проведению ИФА
5. Научиться давать клиническую оценку результатов иммунологических исследований различных сред организма у больных туберкулезом.
Требования к исходному уровню знаний
Повторить из патологической анатомии: особенности туберкулезного воспаления; нормальной анатомии: строение иммунной системы человека; иммунологии: иммунокомпетентные клетки, специфические, неспецифические факторы защиты, иммунологические реакции клеточного и гуморального типов.
Контрольные вопросы из смежных дисциплин
1. Центральные и периферические органы иммунной системы человека.
2. Лимфоциты, макрофаги, нейтрофилы: их субпопуляции, основные функции.
3. Этапы фагоцитоза.
4. Иммуноглобулины классов М, G, А, секреторный иммуноглобулин А, их биологическая функция.
5. Иммунологические реакции клеточного и гуморального типов.
6. Методы выявления антител в биологических жидкостях организма (РПК, РПГА, ИФА).
Контрольные вопросы по теме
1. Иммунокомпетентные клетки и их роль в противотуберкулезном иммунитете.
2. Гуморальный противотуберкулезный иммунитет.
3. Неспецифические факторы защиты организма от инфекции.
4. Тесты I и II уровня оценки иммунного статуса человека.
5. Цели иммунологических исследований во фтизиатрии.
6. Характеристика нарушений иммунитета у больных туберкулезом.
7. Влияние нарушений иммунного статуса больного на течение туберкулезного процесса, прогноз заболевания.
8. Методы иммунодиагностики туберкулеза.
9. Провокационные тесты с антигеном возбудителя в иммунодиагностике туберкулеза (ИФА, РПК, РПГА, РТМЛ).
Учебный материал
Иммунная система – это система контроля, обеспечивающая индивидуальность и целостность организма за счет способности отличать собственные структуры от генетически чужеродных, перерабатывать и элиминировать последние. Иммунная система обеспечивает прежде всего защиту организма от инфекции. Ключевым этапом в развитии иммунного ответа являются представление распознавание чужеродного антигена (АГ) иммунокомпетентными клетками.
Центральным звеном в проявлении резистентности к возбудителю туберкулеза (МБТ) являются СД4+Т-лимфоциты, специфически сенсибилизированные к микобактериальным АГ (антигенным компонентом МБТ, индуцирующим ГЗТ, являются белки; полисахариды и жиры такое действие не оказывают). Вместе с тем, Т-лимфоциты не действуют непосредственно на МБТ. СД4+Т-лимфоциты активируют фагоцитозную и бактериоцидную активность макрофагов, а СД8+Т-клетки способны оказывать прямое цитотоксическое действие на клетки, инфицированные МБТ. Эффекторным звеном противотуберкулезной резистентности служат макрофаги.
Туберкулез – классический пример хронического инфекционного заболевания, протекающего с внутриклеточным (в макрофагах) паразитированием МБТ; микобактерии размножаются и гибнут именно в макрофагах. Защитные системы этих клеток лишь ингибируют размножение микроорганизмов, поскольку МБТ, располагаясь внутриклеточно, уклоняются от разрушения лизоцимами, радикалами и реактивными производными азота.
Взаимодействие макрофагов с МБТ неспецифическое и требует иммунологического усиления. Такое усиление активности макрофагов контролируется Т-лимфоцитами посредством синтезируемых ими медиаторов. Сенсибилизированные Т-лимфоциты стимулируют миграцию макрофагов в очаги воспаления, повышают фагоцитарную активность и ингибицию МБТ внутри макрофагов.
При распространенных формах туберкулеза выявляется дефект антигенспецифического Т-клеточного ответа Это проявляется в угнетении пролиферации периферических Т-лимфоцитов, снижении содержания Т-хелперных лимфоцитов I типа и интенсивности продуцирования ими интерлейкина-2, g -интерферона при стимуляции ППД. Это предопределяет развитие регуляторной, а при углублении патологического процесса – и структурно-функциональной вторичной иммунной недостаточности клеточного типа. Иммунодефициты у больных, при распространенном и прогрессирующем течении патологического процесса, связаны с цитолизом (некрозом) иммунокомпетентных клеток (макрофагов и СД4+ Т-лимфоцитов). Не последнюю роль при этом играет апоптоз лимфоцитов (запрограммированная гибель клеток), особенно СД4+.
Изучать иммунный статус (ИС) больных туберкулезом необходимо для решения ряда практических задач, в частности, для:
1.Диагностики и дифференциальной диагностики туберкулеза.
2.Определения активности процесса и прогноза заболевания.
3.Контроля за эффективностью лечения.
4.Выявление глубины нарушений иммунитета с целью иммунокоррекции.
ИС человека можно охарактеризовать комплексом информативных показателей, отражающих состояние различных звеньев системы иммунитета в момент исследования при конкретном заболевании. Оценка ИС организма заключается в поиске основного дефекта, который может локализоваться в различных звеньях лимфоидной системы (Т- и В-лимфоцитах и их субпопуляциях, медиаторах, иммуноглобулинах, в мононуклеарно-фагоцитарной системе, в факторах комплемента и др.). Оценку ИС проводят в два этапа.
На первом этапе (уровне) выявляются обобщенные характеристики или грубые дефекты (ориентирующие тесты).
К тестам первого уровня оценки Т-системы иммунитета (клеточного звена) можно отнести определение:
- общего числа лимфоцитов (N-18-38%, при общем количестве лейкоцитов 4,5-9,5х109/л);
- процентного и абсолютного числа зрелых Т-лимфоцитов (СД3+), это фенотипическая характеристика иммунокомпетентных клеток с помощью моноклональных антител к соответствующим антигенам (N-50-76%, 800-1216/мкл);