Между контрастными сортами люпина наблюдались специфические различия. Так, у алкалоидного сорта Немчиновский синий был значительно шире спектр мутаций, для него были характерны рецессивные мутации по окраске цветка и семян, реже встречались мутации по размеру бобов и семян. У малоалкалоидного сорта Н-846 наиболее широкий спектр мутаций наблюдался по признакам, определяющим габитус и структуру стебля (карлики, компактные, штамбовые и др.). В равной мере выделены у обоих сортов мутанты с бобами, устойчивыми к растрескиванию и лучшей выполненостью. Позднеспелые мутанты выделены у обоих сортов, а скороспелые - лишь у сорта Немчиновский синий. У обоих сортов обнаружены мутации с измененным ритмом роста (мутанты быстрорастущие и медленнорастущие по сравнению с исходным сортом). У алкалоидного сорта выделены малоалкалоидные мутанты. У обоих сортов на естественном и искусственных инфекционных фонах отмечены мутанты, устойчивые к фузариозу.
По J.Hackbarth (1957b), мутанты подразделяются на восемь групп: 1) листового аппарата - эта группа включает хлорофильные мутанты, мутанты с изменением интенсивности окраски, антоциановой пигментации и размера листьев; 2) цветка - с измененной окраской цветка; 3) семян - с измененной формой, размером и окраской семян; 4) боба - с измененным размером боба (крупнобобовые, мелкобобовые), выполненностью, с различной степенью устойчивости к растрескиванию; 5) физиологические - позднеспелые и скороспелые, с измененным ритмом роста; 6) биохимические - с изменением по содержанию белка и алкалоидов; 7) устойчивости - к болезням и другим стрессовым факторам; 8) всего растения - мутанты высокорослые, карлики, и с измененным габитусом (компактные, без ветвей, штамбовые).
При использовании физических факторов (рентгеновского и гамма-излучения в дозах от 150 до 250 Гр) учитывают мощность дозы и биологические особенности признаков, по которым желательно найти мутантную форму (Коновалов и др., 1990). Измененные наследственно формы можно отбирать в течение ряда поколений, начиная с М2.
В результате использования искусственного мутагенеза получены селекционно-ценные формы люпина с детерминированным ветвлением, фасциированным стеблем, нерастрескивающимися бобами, низким содержанием алкалоидов, повышенным содержанием белка и масла, отличающиеся скороспелостью и термонейтральностью. Они явились исходным материалом для создания кормовых сортов люпина белого - Киевский мутант, Старт, Горизонт, Пищевой, Приморский, Днепр, Олешка; люпина узколистного - Ладный, Дикаф 14; люпина желтого - Житомирский, Юбилейный, Искорость и др.
Этот метод, дающий положительные результаты в селекции многих сельскохозяйственных культур, в практической селекционной работе с люпином пока не используется в связи со сложностями, возникающими из-за большого числа хромосом в клетках этой культуры. Однако в Польше oпубликована работа (Kazimierska, Kazimierski, 1969) по изучению биологических особенностей гаплоидов люпина желтого, которые были выявлены среди химерных диплоидных растений. Они, а также полученные из них дигаплоиды оказались менее жизнеспособными в сравнении с диплоидными формами, имели меньшую массу семян и продуктивность. В последующих исследованиях (Kazimierski, Kazimierska, 1992) выявлены гаплоидные и тетраплоидные формы у люпина белого. Наибольший теоретический и практический интерес представляют тетраплоиды (2n=4х=100). Хотя они имели в бобе меньшее количество семян в сравнении с диплоидными формами, масса семян у них оказалась в два и более раза выше. В результате по урожайности они не уступали обычным диплоидным формам. Меньшее количество семян в бобе у тетраплоидов авторы объясняют нарушениями в процессе мейоза. Приведенные эколого-географическое изучение и отборы позволили выделить наиболее продуктивные растения, которые предполагается использовать в селекции.
Естественные тетраплоиды иногда встречаются также среди дикорастущих люпинов из западного полушария - Lupinus perennis L. (Майсурян, Атабекова, 1974).
Оценка селекционного материала на инфекционных фонах и путем искусственного заражения
Люпин подвержен многочисленным заболеваниям, среди которых самые распространенные и вредоносные - фузариоз и антракноз. Болезни вызывают возбудители, относящиеся к разным видам родов Fusarium Lk. и Colletotrichum gloesporioides Penz. Их соотношение и состав неодинаковы в различных почвенно-климатических зонах. Сорта люпина, устойчивые к фузариозу и антракнозу в одних регионах, часто оказываются восприимчивыми в других. Оценка селекционных образцов люпина на устойчивость к фузариозу проводится на инфекционных фонах.
Методика создания инфекционных фонов к почвенным патогенам (фузариозы) основана на накоплении инфекции в почве (Гешеле, 1964; Корнейчук, 1985). Для испытания люпина приемлемы самые распространенные методы - двух-трехлетняя монокультура сильновосприимчивого сорта, внесение в почву измельченных частей пораженных растений, а также метод искусственного внесения в почву размноженных на питательной среде патогенов (Корнейчук, 1985). В качестве питательного субстрата могут служить зерна хлебных злаков, особенно овса и проса. Можно использовать и зерна других культур и их смеси. Реже применяют внесение в почву чистой культуры патогена, приготовленной на жидкой питательной среде (Овчинникова, Андрюхина, 1984).
В зависимости от конкретных задач, возможны разные подходы к изучению устойчивости люпина к фузариозу. Например, мировая коллекция люпинов ВИР, включающая более 50 видов как средиземноморского, так и американского происхождения, в 1971-1989 гг. получила первичную оценку по устойчивости на комплексном инфекционном фоне Новозыбковского филиала ВИУА (Киселев и др., 1988). Этот фон создавали, внося в почву измельченную массу больных фузариозом растений, собранных в разных зонах люпиносеяния, а также чистую культуру разных видов и штаммов возбудителя. На таком фоне возможно первоначальное испытание всех видов люпина.
Однако, для более углубленного изучения фузариозоустойчивости образцов каждого вида люпина, целесообразно создание специального фона со специфичным для этого вида формами возбудителя. Так, в Украинском НИИ земледелия разработана методика создания инфекционного фона для оценки люпина желтого к фузариозному увяданию на основе выделенных в условиях Украины высоковирулентных штаммов (82, 66, 89, 90, 213) Fusarium oxysporum Schlecht. (Корнейчук, 1985). В НПО "Подмосковье" и НПО зернобобовых и крупяных культур с целью создания такого фона для люпина узколистного и белого выделяют изоляты с больных фузариозом растений, определяют их видовой состав и патогенность. Для закладки фона используют наиболее вирулентные из них (Дебелый и др., 1983; Ларионова, Овчинникова, 1987).
Важным направлением борьбы с фузариозом может быть создание сортов, обладающих групповой устойчивостью к разным видам и штаммам патогена. Как показали исследования (Курлович и др., 1990), для этого эффективно испытывать один и тот же исходный материал для селекции в контрастных условиях среды на разных фонах, уже созданных во многих селекционных учреждениях страны. Таким путем удалось выявить материал, устойчивый к фузариозу в разных регионах, а также изучить вариабильность признака устойчивости в зависимости от конкретных условий.
Значительные различия в поражении большинства сортов люпина в разных регионах люпиносеяния и на разных фонах обусловливают необходимость изучения качественного состава популяции возбудителя болезни в конкретных условиях, а также степень ее вирулентности. Обладая такой информацией, располагая данными об устойчивости материала к тому или иному составу патогенов, в перспективе будет возможно целенаправленно создавать устойчивые сорта для каждого региона, а при необходимости своевременно проводить сортосмену.
Организация разных инфекционных фузариозных фонов и методы оценки материала изложены в работах А.В. Хотяновича, Г.С. Муромцева (1975), Н.С. Корнейчука (1985), Л.И. Ларионовой, Б.С. Курловича (1990).
Что касается антракноза, то инфекция этого патогена передается в основном через семена и сохраняется в течение зимы на пораженных растительных остатках. Болезнь вызывает на листьях своеобразные пятна, которые на стеблях и бобах переходят в язвы. В местах поражения после дождя может выступать слизистая масса конидий. С брызгами дождя инокулюм распространяется и инфицирует соседние здоровые растения. В связи с этим, методика создания инфекционного фона к этому заболеванию несколько иная. Обычно тестируемые растения обрызгивают раствором, в котором содержатся в большом количестве наиболее вирулентные для данного региона штаммы патогена. Поскольку так же как и у фузариоза расовый и штаммовый состав возбудителей антракноза в разных местах не одинаков, поиск устойчивого материала следует вести в том самом месте, где ведется селекция культуры, используя для заражения наиболее вирулентные в местных условиях расы и штаммы. Подтверждением этому являются результаты испытания образцов люпина белого и желтого, привезенных нами из Бразилии, где имели место сильные эпифитотии этого заболевания, и на их фоне в Бразилии выделены устойчивые формы (Курлович и др., 1989). Однако их испытание в разных эколого-географических условиях стран СНГ при заражении местными штаммами и расами патогена в большинстве случаев не выявило у них высокой устойчивости к заболеванию.
Вирусная узколистность известна во всех районах люпиносеяния. На основании изучения биологических, морфологических, физиологических и других свойств вирусных изолятов в условиях, например, Украины (Курлович и др., 1989) выделены два штамма наиболее распространенного вируса желтой мозаики фасоли (ВЖМФ), различающиеся по степени вирулентности (слабо- и сильновирулентный). Также имело место распространение смешанной инфекции ВЖМФ и вируса огуречной мозаики (Cucumis virus 1, Smith.), но не столь распространенной, как инфекция, вызванная только ВЖМФ (Phaseolus virus 2, Smith.). В связи с этим изучение образцов на пораженность узколистностью и поиск источников обычно проводится в два этапа: на фоне естественного заражения (первичная оценка) и на фоне искусственного заражения ВЖМФ (основная оценка).