Так как у всех детей через 1 месяц после ревакцинации регистрировались защитные титры противодифтерийных и противостолбнячных антител, можно говорить о том, что несмотря на снижение абсолютного и относительного числа В-лимфоцитов их функциональная активность сохраняется на достаточно высоком уровне. Можно предположить, что снижение числа В-лимфоцитов связано с истощением их пула после антигенной нагрузки, восстанавливающееся по прошествии времени, о чем свидетельствует увеличение их числа через 6 месяцев. С чем связано стойкое снижение абсолютного и относительного числа натуральных киллеров, регистрируемое через 1, 6 и 12 месяцев после ревакцинации остается неясным и требует дальнейшего изучения. Однако можно предположить, что изменения, регистрируемые в системе иммунорегуляторных клеток через 6-12 месяцев после ревакцинации связаны не с введением вакцинного препарата, а с общим состоянием ребенка, перенесенными инфекционными заболеваниями, временем года и многими другими факторами.
ДИНАМИКА ПОКАЗАТЕЛЕЙ ГУМОРАЛЬНОГО ИММУНИТЕТА.
Анализ показателей гуморального иммунитета в процессе ревакцинации АДС-М анатоксином показал, что через 1 месяц после ревакцинации у большинства детей отмечается достоверное нарастание сывороточных иммуноглобулинов классов G (p<0.05) с 142.7+/-10 до 192,7+/-18 и М (p<0.05) с 156,1+/-20 до 241,2+/-32, причем изменения IgM достоверно более значимы. Через 6 месяцев после ревакцинации уровень иммуноглобулинов всех классов был близок к исходному. (Таблица 4, диаграмма 5).
Таблица4. ДИНАМИКА УРОВНЕЙ СЫВОРОТОЧНЫХ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ КЛАССОВ G, A, M, E В ПРОЦЕССЕ РЕВАКЦИНАЦИИ АДС-М АНАТОКСИНОМ.
| Показатель | До R | Через 1 мес | Через 6 мес | Через 12 мес |
| IgG | 142.7+/-10 | 192.7+/-18** | 126.2+/-16 | 131.3+/-12 |
| IgA | 87.1+/-10 | 114.5+/-14 | 81.3+/-17 | 123.4+/-22 |
| IgM | 156.1+/-20 | 241.2+/-32** | 178+/-36 | 105.3+/-12** |
| IgE,>7 лет | 32+/-15 | 44.2+/-16.9 | 29.8+/-9 | |
| IgE,<7 лет | 84.3+/-45 | 53.3+/-46 | 203.9+/-108 |
Примечания: **- p<0,05.
Мы не выявили никакого существенного влияния введения АДС-М анатоксина на процессы, ответственные за формирование IgE у детей с онкологическими заболеваниями.
ДИНАМИКА ТИТРОВ СПЕЦИФИЧЕСКИХ АТ К ДИФТЕРИИ И СТОЛБНЯКУ ПРИ РЕВАКЦИНАЦИИ.
Ревакцинация АДС-М анатоксином была проведена 26 детям, имеющим в анамнезе солидные опухоли. Результаты исследований специфического иммунитета против дифтерии и столбняка методами РПГА и ИФА представлены в таблице 5.
Таблица 5. ДИНАМИКА ТИТРОВ СПЕЦИФИЧЕСКИХ АТ ПРОТИВ ДИФТЕРИИ И СТОЛБНЯКА В ПРОЦЕССЕ РЕВАКЦИНАЦИИ АДС-М АНАТОКСИНОМ.
| УРОВЕНЬ СПЕЦИФИЧЕСКИХ АНТИТЕЛ | ||||
| ДО РЕВАКЦИ-НАЦИИ | ПОСЛЕ РЕВАКЦИНАЦИИ | |||
| ЧЕРЕЗ 1 МЕС. | ЧЕРЕЗ 6 МЕС. | ЧЕРЕЗ 12 МЕС. | ||
| ДИФТЕРИЯ РПГА | 1:11.3--(log23.5+/-0.8) | 1:1780--(log210.8+/-0.7) | 1:1910--(log210.9+/-0.9) | 1:676--(log29.4+/-0.7) |
| ДИФТЕРИЯ ИФА МЕ/мл | 0.035+/-0.02 | 15.6+/-3.4 | 7.98+/-2.2 | 4.9+/-1.8 |
| СТОЛБНЯК РПГА | 1:112--(log26.8+/-0.7) | 1:3850--(log211.9+/-0.8) | 1:3125--(log211.6+/-0.5) | 1:2720--(log211.4+/-1.4) |
| СТОЛБНЯК ИФА МЕ/мл | 0.61+/-0.023 | 22.9+/-4.5 | 16.9+/-3.1 | 14.3+/-4.6 |
Из таблицы 5 видно, что через 1 месяц после ревакцинации происходит достоверное (p<0,001, W<0,001) нарастание титров противодифтерийных антител с 1:11.3 (log2 3.5+/-0.8) до 1:1780 (log210.8+/-0.7), через 6 месяцев - незначительное нарастание уровня антител к дифтерии до 1:1910 (log210.9+/-0.9), через 12 месяцев - некоторое снижение титров противодифтерийных антител до 1:676 (log29.4+/-0.7), антитела, однако, сохранялись на достаточном уровне.
Исследование противодифтерийного иммунитета методом ИФА выявило достоверное нарастание специфических антител через 1 месяц после ревакцинации до высоких защитных значений с 0,035+/-0,02 МЕ/мл до 15,6+/-3,4 МЕ/мл с последующим снижением показателей через 6 и 12 месяцев до 7,98+/-2,2 и 4,9+/-1,8 соответственно, что является защитным уровнем.
Ревакцинация привела к достоверному (p<0,005, W<0,005) нарастанию уровней противостолбнячных антител через 1 месяц после прививки, что установлено методами РПГА и ИФА с 1:112 (log26.8+/-0.7) до 1:3850 (log2 11.9+/-0.8) и с 0.61+/-0.023 МЕ/мл до 22.9+/-4.5 МЕ/мл, соответственно. Через 6 месяцев после ревакцинации отмечалось некоторое снижение титров противостолбнячных антител до 1:3125 (log211.6+/-0.5) в РПГА и до 16.9+/-3.1 МЕ/мл в ИФА. Через 12 месяцев произошло дальнейшее снижение специфических антител до 1:2720 (log211.4+/-1.4) методом РПГА и до 14.3+/-4.6 МЕ/мл методом ИФА, что соответствует достаточному уровню антитоксической защиты.
Проведенные исследования свидетельствуют о том, что дети, перенесшие злокачественное новообразование и интенсивное противоопухолевое лечение и находящиеся в длительной ремиссии, способны адекватно реагировать на введение АДС-М анатоксина и вырабатывать специфический иммунитет в защитных титрах (Диаграмма 6).
При исследовании специфического антитоксического иммунитета против дифтерии и столбняка у детей получивших до выявления онкологического заболевания первичный курс профилактических прививок нами установлено, что несмотря на комплексное противоопухолевое лечение, обладающее иммуносупрессивным действием, дети сохраняют защитные титры противодифтерийных и противостолбнячных антител в течение 5 лет после иммунизации. Таблица 6.
Таблица 6. СОСТОЯНИЕ ПРОТИВОДИФТЕРИЙНОГО ИММУНИТЕТА У ДЕТЕЙ, ЗАВЕРШИВШИХ ПЕРВИЧНЫЙ КУРС ВАКЦИНАЦИИ.
| ПРЕПАРАТ | ЧИСЛО ДЕТЕЙ | СРОК ПОСЛЕ ВАКЦИНАЦИИ | ТИТР АНТИТЕЛ МЕНЕЕ 1:40 (РПГА) (<0,1 МЕ/мл - ИФА) | ПРОТИВ ДИФТЕРИИ БОЛЕЕ 1:40 (РПГА) (>0,1 МЕ/мл - ИФА) | СГТ АТ | ||
| АКДС | 39 | МЕНЬШЕ 5 ЛЕТ | - | - | 2 | 5.1% | 1:2048 |
| БОЛЬШЕ 5 ЛЕТ | 9 | 23,8% | 28 | 71.8% | 1:512 | ||
| АДС-М | 15 | МЕНЬШЕ 5 ЛЕТ | 1 | 6.7% | 4 | 26.7% | 1:223 |
| БОЛЬШЕ 5 ЛЕТ | 6 | 40% | 4 | 26.7% | 1:158 | ||
Примечание: СГТАТ-средняя геометрическая титров антител
ПЕРВИЧНАЯ ИММУНИЗАЦИЯ ПРОТИВ ДИФТЕРИИ И СТОЛБНЯКА ДЕТЕЙ, ИМЕЮЩИХ В АНАМНЕЗЕ СОЛИДНЫЕ ОПУХОЛИ.
Из 120 обследованных нами детей, 14 детей до выявления онкологического заболевания не получали профилактических прививок. 5 из них редко болели респираторно-вирусными инфекциями и имели показатели клеточно-гуморального иммунитета в пределах возрастной нормы, именно им мы начали проводить первичный курс иммунизации. Клинические диагнозы у этих детей были следующие: 1) нейробластома без первично выявленного очага с метастазами в лимфоузлы шеи (IV стадия злокачественного новообразования); 2) нейробластома шеи (III стадия); 3) нейробластома забрюшинная (II стадия); 4) гранулематозная опухоль правого яичника (II стадия); 5) рабдомиосаркома полости малого таза, с поражением забрюшинных лимфоузлов (III стадия), цистаденома правого яичника. Остальным 9 детям по разным причинам иммунизация не проводилась.
У одного ребенка с гранулематозной опухолью яичника через 5 месяцев после второй вакцинации отмечалось нарастание уровней противодифтерийных и противостолбнячных антител до 1:640 и 1:1280 соответственно. Учитывая высокие титры специфических антител проведение ревакцинации было решено перенести на более поздние сроки. При исследовании через 11 месяцев отмечалось дальнейшее увеличение титров противодифтерийных и противостолбнячных антител до 1:5120 и 1:10240 соответственно. В связи с этим проведение ревакцинации признано нецелесообразным.
У другого ребенка с рабдомиосаркомой малого таза после первой вакцинации не было нарастания титров противодифтерийных и противостолбнячных антител, через 1 месяц после второй вакцинации их уровень составлял 1:10 и 1:640 соответственно. В связи с тем, что в школе был случай дифтерии, а у ребенка был обнаружен низкий уровень антител, решено было сделать третью вакцинацию, через 1 месяц после третьей вакцинации отмечалось нарастание титров специфических антител против дифтерии и столбняка до 1:320 и 1:5120 соответственно. Контрольное исследование через 8 месяцев после третьей вакцинации выявило некоторое снижение специфического иммунитета до 1:160 - противодифтерийных и 1:1280 - противостолбнячных антител, значения были на достаточном уровне. В данном случае на фоне нормального количественного содержания иммунорегуляторных клеток, иммунный ответ на введение АДС-М анатоксина формировался замедленно, что может свидетельствовать о некоторой функциональной недостаточности иммунной системы; однако, следует отметить, что результатом иммунизации явилась выработка специфического иммунитета, достаточного для защиты ребенка от инфекций.
У 3-х наблюдавшихся нами первично привитых детей вакцинация не была продолжена по разным причинам: наличие отклонений показателей клеточного иммунитета; отказ от вакцинации по месту жительства ребенка в связи с невозможностью провести необходимые исследования показателей иммунитета; отказ от дальнейшей вакцинации 14-летнего подростка. У этих 3 детей мы не получили выраженного специфического иммунного ответа - антитела против дифтерии не достигли защитного уровня, противостолбнячные антитела у 2 детей, получивших 2 прививки определялись в защитных титрах (более 1:20).
Результаты, полученные нами при первичной вакцинации детей против дифтерии и столбняка, свидетельствуют о том, что АДС-М анатоксин хорошо переносится детьми, имеющими в анамнезе солидные опухоли; иммунизация, проведенная в стадии длительной ремиссии (не менее 2 лет) не вызвала рецидива основного заболевания и метастазирования опухолевого процесса в течение периода наблюдения. Мы не смогли установить определенную закономерность изменений показателей клеточного иммунитета у первично вакцинированных детей. Возможно, эти изменения зависят непосредственно от индивидуальной реактивности иммунной системы каждого ребенка.