- нарушение клеточного звена (лейкопения, снижение CD3+, CD4+, CD21+-лимфоцитов).
Именно цитокиновому дисбалансу, по нашему мнению, отводится одна из ключевых ролей в генезе формирования хронизации патологии кожных инфекций.
Содержание цитокинов в периферической крови определяли в группе 29 пациентов с ХРФ. В зависимости от уровня IgE сформированы 2 группы: первую группу составили 12 больных с повышенным уровнем IgE, вторую – 17 пациентов с нормальными значениями указанного иммуноглобулина. Контрольную группу составили 10 доноров, без ГВЗ сопоставимых по полу и возрасту. Клиническое обследование больных включало тщательный сбор аллергоанамнеза.
При изучении уровня сывороточного IgE у больных с ХРФ получены следующие результаты: концентрация IgE была выше верхней границы нормы (130МЕ/мл) в 41% случаев. Разброс показателей повышенного уровня IgE составил от 150 МЕ/мл до значений, превышающих 1000МЕ/мл.
Известно, что повышенный уровень общего IgE является маркером аллергических реакций или причиной его повышения являются внешние воздействия – паразитарные инфекции. При клиническом обследовании пациентов с ХРФ и повышенным уровнем IgE сопутствующая аллергопатология была выявлена в 44% случаев. При этом в 7,5% был выявлен поллиноз, в 13% - аллергодерматозы, в 5,5% - респираторные аллергозы, в 3,7% - крапивница, в 11% - лекарственная сенсибилизация. Неотягощенный аллергоанамнез отмечен в 58% случаев.
Также в сыворотке крови больных ХРФ с повышенным уровнем IgE обнаружены антитела к следующим гельминтам: описторхисам, трихинеллам, токсокарам и эхинококку.
Таким образом, можно считать, что были установлены этиологические факторы повышения сывороточногоIgE.
В настоящий момент диагностическая значимость оценки уровня цитокинов заключается в констатации самого факта повышения или понижения их концентрации у данного больного с конкретным заболеванием. Причём для оценки тяжести и прогнозирования течения заболевания целесообразно определять концентрацию как противо-, так и провоспалительных цитокинов в динамике развития патологии. Например, содержание цитокинов в периферической крови определяется сроками обострения, отражает динамику патологического процесса‚ в частности при ГВЗ.
В нашей работе мы определяли концентрацию двух цитокинов – интерлейкина-4 и гамма-интерферона – с помощью твердофазного иммуноферментного. Оба исследуемых цитокина участвуют в активации и развитии иммунного реагирования при инфекционно-воспалительных заболеваниях бактериальной природы. Эти цитокины являются антагонистами по механизму действия. По современным данным, ИЛ-4 в комплексе с гамма - интерфероном является ключевым фактором, определяющим тип иммунитета [Кетлинский С.А. // Роль Т-хелперов типов 1и 2 в регуляции клеточного и гуморального иммунитета / Иммунология, 2002. - том. 23. - № 2. - С.77 - 79. ]
Интерлейкин-4 – цитокин, отвечающий за активность гуморального звена. Он участвует не только в развитии провоспалительных реакций, но и играет значительную роль в процессах хронизации. [Пекарева Н. А., Чупрова А. В., Шваюк А. П., Горбенко О. М., Обухова О. О., Трунов А. Н. Сравнительный анализ баланса цитокинов в сыворотке крови и моче у детей с хроническим пиелонефритом в стадии клинической ремиссии // Аллергология и иммунология, том 8, №1, 2007, С. 132-133]
В наших исследованиях при анализе уровня сывороточного ИЛ-4 было выявлено повышение концентрации при ХРФ в группах больных как с повышенным уровнем иммуноглобулина Е (выше 150 МЕ/мл), так и с нормальным уровнем (130 МЕ/мл) указанного иммуноглобулина. Результаты исследования уровня интерлейкина-4 в сыворотке крови у больных с хроническим рецидивирующим фурункулезом приведены на рис. 8 и табл. 1 (Приложение 1).
Нами был сделан вывод, что повышение уровня интерлейкина-4 во время ХРФ отражает участие этого цитокина в процессе воспаления.
Известно‚ что ведущими изменениями иммунной системы при ХРФ являются дефекты фагоцитарного и гуморального звеньев иммунитета.[А.С. Манько, Н.Х. Сетдикова, Т.В. Латышева, Ю.А. Горностаева, О.М. Котова, Н.М. Голубева «Клинико-иммунологическая эффективность серамида у больных хроническим рецидивирующим фурункулезом» //Российский Аллергологический Журнал, №5, 2005г]. Вероятно‚ что обнаруженное повышение концентрации ИЛ-4 является свидетельством уменьшения антигенпрезентирующую и цитокинпродуцирующую активность макрофагов при ХРФ.
Вместе с тем в обеих группах больных не выявлено корреляции уровня сывороточного IL4 с уровнем общего IgE. Вероятно, отсутствие корреляции обусловлено межклеточным характером действия IL4 и различной кинетикой синтеза указанных субстанций.
Не исключено‚ что обнаруженное в нашем исследовании повышение уровня сывороточного ИЛ-4 при ХРФ может способствовать подавлению освобождения цитокинов воспаления (ИЛ-1, ИЛ-8), а также продукции цитокинов ТН-1-лимфоцитами (ИЛ-2, гамма-ИНФ и др.).
ТН-1-лимфоциты – это‚ клекти-продуценты гамма-ИНФ. ИФНγ –важнейший эндогенный иммуномодулятор, способный активировать Т-клеточное звено иммунной системы и клеточную цитотоксичность. Повышение уровня ИФНγ может способствовать повышению возможностей специфической и неспецифической защиты организма‚ и‚ ограничению развития воспаления при ХРФ.
В ходе исследования было выявлено, что изменения уровня ИФНγ как у больных с повышенными‚ так и нормальными значениями общего иммуноглобулина Е при ХРФ‚ достоверно не отличались от показателей концентрации гамма-интерферона контрольной группы (рис. 9 и табл. 1 (Приложение 1). Поскольку известно‚ что продукция ИФНγ подавляется ИЛ-4‚ то‚ вероятно‚ что обнаруженный в обследуемой группе пациентов с ХРФ низкий уровень сывороточного ИФНγ‚ является следствием повышенного уровня ИЛ-4.
Показатели концентрации гамма-интерферона в обследуемой группе больных с ХРФ не зависели от уровня сывороточного иммуноглобулина Е.Таким образом, определение уровня ИФНγ, ответственного за ингибирование синтеза IgE в сыворотке крови, не имеет диагностического значения для выявления механизмов повышения IgE при ХРФ.
Кроме того‚ анализ полученных позволил сделать вывод о необходимости формирования групп больных, в первую очередь, в зависимости от остроты процесса при ХРФ (ремиссия, подострый период, обострение). Нам представляется, что оценка уровня ИЛ-4 и ИФНγ в период обострения позволит получить большую информацию о характере иммунного ответа при ХРФ.
4.2. Интерлейкин-4 и гамма-интерферон при хроническом остеомиелите
Остеомиелит – гнойное воспаление костного мозга, распространяющееся на близлежащие ткани. Возникает в результате заражения организма бактериями гноеродной природы на фоне сниженной иммунной реактивности.
Результаты многочисленных клинико-лабораторных наблюдений показывают, что при О. происходят изменения в иммунной системе организма. [Панченко М. К., Вертигора И.П., Грицай Н. П. Комплексное лечение больных с хроническим остеомиелитом с применением костной пластики // Вестн. хир. – 1988. –№10. –С.42-46 Пинегин Б. Ф., Юдина Т. И., Карсанова М. И. Общие вопросы иммунитета, иммунодиагностики и иммунотерапии на модели хирургических инфекций // Современные проблемы аллергологии, клинической иммунологии и иммунофармакологии. –М.,1998. –С 10-178 Хаитов Р. М., Пинегин Б. В. Вторичные иммунодефициты: клиника, диагностика, лечение // Иммунология.-1999. -№2. –С.14-17 ] В зависимости от типа микроорганизма и состояния макроорганизма (выраженности системного воспалительного ответа, длительности заболевания, эндотоксемии и т.д.) при О. возникают различные нарушения клеточного и гуморального иммунитета, которые характеризуются снижением фагоцитарной активности, изменением синтеза компонентов комплемента, отсутствием или снижением цитотоксичности лимфоцитов и макрофагов, изменением цитокинового статуса организма [Вишневский А. А., Тиходеев С. А., Андрианова Т. Р. Белки острой фазы, молекулы низкой и средней массы в оценке эндотоксемии при остеомиелите позвоночника // Труды городской многопрофильной бльницы №2. – СПб.: Ольга, 2001.-С.4-11 Тиходеев С. А., Вишневский А. А. Неспецифический остеомиелит позвоночника. –СПб.:Изд.дом СПбМАПО, 2004. -250с]
Течение воспалительных заболеваний зависит от состояния иммунной системы и от степени выраженности воспалительного ответа. В этой связи ранняя иммунодиагностика и оценка стадии заболевания является неотъемлемым комплексом в лечении пациентов, позволяет не только прогнозировать течение заболевания, но и дает возможность подобрать патогенетическую терапию. [Вишневский А. А., Орлов А. Б., Тиходеев С. А. Выбор иммуномодулирующей терапии при неспецифическом остеомиелите позвоночника // Вестн. хир. Т.165.-№2.-2006.-С.32-36]
Исследование уровня цитокинов у здоровых людей и больных О. поможет понять роль этих молекул в течении заболевания, что можно будет использовать для ранней диагностики и лечении препаратами цитокинов.
Результаты исследования содержания интерлейкина-4 показывают достоверное повышение уровня ИЛ-4‚ по сравнению с контрольной группой‚ как у больных с повышенными‚ так и нормальными значениями общего иммуноглобулина Е. Результаты исследования уровня интерлейкина-4 в сыворотке крови у больных с хроническим остеомиелитом приведены на рис. 10 и табл. 2 (Приложение 2).
Повышение уровня ИЛ-4 в сыворотке крови больных свидетельствуют о вовлечении этого цитокина в процесс воспаления при хроническом остеомиелите. Известно, что некоторые бактерии способны выключать процессы антителообразования через индукцию факторов, препятствующих активации Т-клеток [Белохвостикова Т.С., Кирдей Л.Е., Гаврилова Е.Ю., Промтов М.В., Леонова С.Н., Кирдей Е.Г. Коррекция вторичных нарушений иммунной системы при хроническом посттравматическом остеомиелите./Медицинская иммунология, 2002, т.4, №2, с.228-229.].Не исключено‚ что повышение уровня ИЛ-4 является одним из звеньев в цепочке иммунного ответа, приводящего к отсутствию или снижению цитотоксичности Т-лимфоцитов и макрофагов при хроническом остеомиелите. Наши данные согласуются с данными ряда авторов о ингибировании цитотоксической активности Т-лимфоцитов и макрофагов при остеомиелите [Вишневский А. А., Тиходеев С. А., Андрианова Т. Р. Белки острой фазы, молекулы низкой и средней массы в оценке эндотоксемии при остеомиелите позвоночника // Труды городской многопрофильной бльницы №2. – СПб.: Ольга, 2001.-С.4-11 Тиходеев С. А., Вишневский А. А. Неспецифический остеомиелит позвоночника. –СПб.:Изд.дом СПбМАПО, 2004. -250с]. Вероятно‚ИЛ-4 стимулирует пролиферацию тимоцитов и Т-клеток и вызывает рост тучных клеток при развитии и течении воспаления при хроническом остеомиелите‚ и таким образом, играет центральную роль в модуляции иммунного ответа.