Абсолютное значение рекомендуется подсчитать в камере Горяева (а не в полях зрения). Для этого идет подсчет общего числа нейтрофильных лейкоцитов в пяти больших квадратах. Общая концентрация определяется по следующей формуле:
C = L * 50 000,
где C это концентрация нейтрофилов в 1 мл экулята,
L – число нейтрофилов в 5 больших квадратах.
Клиническое значение лейкоспермии
В норме в эякуляте должно быть не более 1000000 лейкоцитов в 1 мл. Повышение этого числа носит название лейкоспермия. Лейкоспермия является признаком воспалительных процессов, которые могут возникать на любом участке, начиная от места созревания сперматозоидов до всех отделов семявыносящих путей и придаточных половых желез.
Чаще всего лейкоспермия является признаком наличия бактериальных урогенитальных инфекций. Поэтому в таких случаях показано проведение всестороннего бактериологического исследования эякулята, секрета простаты, уретры, мочи. Для этих целей проводят культуральные исследования (бактериологические посевы) и ПЦР-диагностику (в различных модификациях, таких как РНК-NASBA-тест).
В результате воспаления происходит образование активных кислородных радикалов, которые оказывают неблагоприятное влияние на клеточные мембраны сперматозоидов. Также наблюдается снижение их подвижности.
Если при спермограмме была обнаружена лейкоспермия, то рекомендуется провести и вирусологическое исследование, включающее в себя ПЦР- и ИФА-диагностику.
Клиническое значение определения незрелых половых клеток
В норме в эякуляте должно быть не более 4% незрелых половых клеток, причем большую часть занимают сперматиды. Это значение ведется от общего числа клеток экулята. Увеличение числа незрелых половых клеток говорит о том, что происходит блокирование процессов мейоза. Также это может указывать на нарушение спермиогенеза. Причины, которые приводят к этим нарушениям, многогранны и могут быть обусловлены генетикой, мутациями, токсическими влияниями, неблагоприятными экзогенными факторами.
Для более точной оценки процесса сперматогенеза, кроме спермограммы, применяется гистологическое исследование ткани яичка, полученное путем биопсии.
Исследование эритроцитов и других клеточных элементов в эякуляте
При обнаружении эритроцитов в эякуляте при спермограмме следует заподозрить патологический процесс.
Появление эритроцитов в сперме носит название гемоспермия. Она может быть истинной и ложной. При ложной примесь крови появляется в сперме из-за микротравм слизистой уретры или, например, после массажа простаты. При микроскопии они видны в виде нитей или скоплений.
Истинная гемоспермия характеризуется тем, что эритроциты попадают в эякулят в результате заболевания (чаще в зоне семенного бугорка). Это может быть симптомом воспалительных заболеваний предстательной железы, семенного бугорка, семенных пузырьков, а также опухолей этой же локализации. В этих случаях сперма равномерно окрашена кровью. При микроскопии эритроциты расположены диффузно. Однако стоит заметить, что гемоспермия может быть и у здоровых людей после длительного отсутствия половых контактов.
В норме в эякуляте может встречаться небольшое число эпителиальных клеток, которые являются слущенными клетками почек, мочевого пузыря, простаты, уретры. Для их подсчета используются нативные препараты. Большого клинического значения эти клетки не имеют.
Также в эякуляте могут быть обнаружены клетки макрофаги, которые поглощают и фагоцитируют сперматозоиды. Определение этих клеток также не имеет большого клинического значения.
Достаточно редко выявляются гигантские клетки, которые могут быть истинными и ложными (псевдогигантские клетки). Истинные характеризуют воспалительный процесс. Псевдогигантские клетки представляют собой неразделившиеся сперматозоиды.
Окраска по методу Май-Грюнвальду-Гимзе
Технология приготовления препарата, окрашенного данным методом следующая:
1. Полученный мазок на предметном стекле фиксируется метанолом, после чего на него наносится раствор Май-Грюнвальда в течение 3-х минут.
2. Затем добавляется дистиллированная вода (на 1 минуту).
3. Полученный раствор удаляется без использования проточной воды (путем сливания раствора с поверхности стекла).
4. Далее на мазок наносится раствор Гимзе (0,3 мл краски Гимзе, разведенной в 10 мл дистиллированной воды).
5. Препарат промывается в дистиллированной воде.
6. Высушивание при комнатной температуре.
При данной окраске хорошо дифференцируются «круглые» клетки эякулята. Ядра окрашиваются в красно-фиолетовы цвет, цитоплазма – в светло-голубой. Гранулы нейтрофильных лейкоцитов окрашиваются в коричневый цвет, гранулы базофилов – в ярко-синий или фиолетовый. Эритроциты имеют розоватую окраску. У сперматозоидов имеется следующая окраска: акросома – розовая, головка – интенсивноголубая и жгутик – бледно-голубой.
Под агглютинацией сперматозоидов понимают такое явление, как склеивание сперматозоидов между собой. Данный процесс хорошо визуализируется при исследовании нативных и окрашенных препаратов.
Выделяют истинную и ложную (неспецифическую) агглютинацию. Под вторым типом понимают слипание сперматозоидов с эпителиальными клетками, макрофагами, с фрагментами разрушенных клеток или комками слизи.
При истинной же агглютинации происходит прилипание сперматозоидов друг к другу, причем это слипание может быть разным – некоторые сперматозоиды соединяются головками, некоторые хвостами, а некоторые в виде головка-хвост. Причины процесса точно не ясны. Однако, если имеется большое значение, то это может говорить о наличии иммунологических причин бесплодия. Также это встречается при аутоиммунных процессах и хронических воспалениях. Иногда умеренное слипание наблюдается в сперме здоровых, фертильных мужчин.
Существует некие условные критерии для оценки агглютинации сперматозоидов. Результат выдается в количестве плюсов «+»:
1. «+» – небольшие единичные группы слипшихся сперматозоидов (не более 5 в группе).
2. «++» – группы агглютинирующихся сперматозоидов составляют значение 10 – 20 клеток. Группы единичны.
3. «+++» – определяются более 5 групп, склеенных сперматозоидов, причем в группе их число достаточно большое (несколько десятков).
4. «++++» – в этом случае имеются множество полей зрения, занятых слипшимися сперматозоидами.
При микроскопии эякулята нередко определяются неклеточные структуры. К ним относятся:
· лецитиновые зерна,
· кристаллы Беттхера,
· амилоидные тельца,
· слизь.
Лецитиновые зерна представляют собой мелкие образования округлой формы. Имеют белесоватый цвет. В норме их достаточно много. Уменьшение числа лецитиновых зерен свидетельствует о наличии хронического воспалительного процесса в предстательной железе.
Кристаллы Беттхера – бесцветные структуры, имеющие удлиненную форму. При окраске раствором Люголя окрашиваются в синий цвет. По своей сути это продукт кристаллизации секрета предстательной железы. Большое их количество также говорить о наличии хронического простатита.
Амилоидные тельца являются аналогами конкрементов округлой формы. Центр образований может быть мелкозернистым, желтого цвета. Эти образования образуются в случаях длительного отсутствия семяизвержений. Иногда могут быть и при простатите.
В норме в эякуляте отсутствует слизь. При наличии большого числа слизи стоит заподозрить хронический воспалительный процесс в семенных пузырьках и в предстательной железе. Возможно, что наличие слизи может приводить к нарушениям подвижности сперматозоидов из-за того, что вязкая слизь окружает сперматозоиды и затрудняет их движение.
Показатель плодовитости Фарриса
Показатель плодовитости Фарриса определяется по формуле:
I = V * N * M/100,
где V – это объем эякулята, мл; – число сперматозоидов в 1 мл;
M – процент подвижных сперматозоидов.
В норме показатель должен составлять не менее 200.
Все данные спермограммы необходимо индивидуально интерпретировать, т. к. спермограмма не только «зеркало» репродуктивной функции, но и «зеркало» образа жизни.
Исследование эякулята – это одно из самых субъективных лабораторных исследований, а его результат – спермограмма во многом зависит от уровня квалификации спермиолога.
В некоторых организациях для исследования эякулята широко применяют специальные приборы – спермоанализаторы. Но спермограмма, выполненная на аппарате обязательно должна дублироваться исследованием спермиолога, так как аппараты могут «путать» некоторые морфологические структуры между собой. Например, головки сперматозоидов и мелкие лейкоциты.
В заключение следует отметить, что ни один из нормативных показателей эякулята не указывает минимальных значений, при которых возможно наступление беременности.
Список использованных источников
1.Ромашкина К.И. Мужское здоровье и долголетие. М. – 2008 г.
2.Шафеи Р.А. Что такое спермограмма, анализ спермограммы. М. – 2005 г.
3.Печурина И.Н., Еркович А.А. Мужское бесплодие. М. – 2007 г.
4.Назаренко Г.И., Кишкун А.А. Клиническая оценка результатов лабораторных исследований. М.: Медицина, 2006. – 544 с.