Лічильну камеру покривають покривним склом І притирають його до появи радужних кілець. Взяту і розведену в меланкері кров переміщують, видаляють на папір або вату перші 3-4 краплі, а слідуючу краплю підводять під покривне скло камери. Знову перевіряють камеру на наявність райдужних кілець, чекають 2-Зхв, поки еритроцити осядуті і поміщають камеру на предметний столик мікроскопа. Під малим збільшенням знаходять камеру, перевіряють рівномірність розприділення еритроцитів, після чого ставлять об'єктив на "40" і рахують.
Еритроцити рахують у 5 "великих" квадратах (або "80"малих). Для підрахунку беруть 4 квадрати, які розміщені по кутах, і один, який розміщений в центрі сітки, або рахують у квадратах, розміщених по діагоналі.
Щоб уникнути повторного підрахунку одного і того ж еритроциту, дотримуються слідуючої методики: підрахунок починають з "малого" квадрата, розміщеного в лівому верхньому куті "великого" квадрата, далі по черзі рахують еритроцити, розміщені в ІІ, ІІІ, ІV квадратах верхнього ряду, після чого переходять до другого ряду, починаючи рахувати справа наліво, міняючи з кожним рядом напрям.
При підрахунку еритроцитів в кожному "малому" квадраті, рахують еритроцити вільно лежачі в середині квадрата І до отриманої кількості додають еритроцити, що прилягають до лівої і верхньої лінії квадратів. Клітини, які доторкуються правої і нижньої лінії відносяться до близлежачих квадратів.
При вираховуванні кількості еритроцитів в 1 мл крові, користуються слідуючою формулою:
Х - кількість еритроцитів в 1мл крові,
П - сума еритроцитів в 5 "великих" квадратів,
4000 - число, яке виходить Із 1/4000 – об’єм "малого" квадрата,
У - ступінь розведення крові,
80 - кількість підрахованих еритроцитів в "малих" квадратах.
При розведенні крові 1:200, для підрахунку еритроцитів в 1 мл
крові, до суми еритроцитів, підрахованих у "великих" квадратах, приписують 4 нулі справа, а при розведенні крові 1:100 - множать на 500.
У здорових тварин кількість еритроцитів в 1мкл крові слідуючи:
Збільшення кількості еритроцитів в крові-еритроцитоз (поліцитемія, поліглобулія).
Зменшення кількості еритроцитів-еритроцитопенія(олігоцитемія).
Підрахунок лейкоцитів .
Методика. Підрахунок лейкоцитів в крові сільськогосподарських тварин.
Лейкоцитарний меланжер являє собою капіляр з поділками 0,5 та 1. Над ампулою - мітка II. В середині ампули знаходиться скляна біла кулька.
Отриману шляхом вколювання краплю крові набирають у меланжер
до мітки 0,5 (розведення 1:20)або до мітки І(розведення 1:10)1 насмоктують до мітки II 1% або 2% розчин оцтової кислоти, підфарбованої метиленовою синькою (рідина Тюрка) оцтова кислота розчиняє еритроцити, а фарба фарбує ядра і робить їх більш помітними. Далі затис
кають капіляр між пальцями і струшують протягом 5 хв.
При наповненні меланжерів потрібно слідкувати, щоб під час на всмоктування крові або розчиненої рідини в капіляр не попали пухирці повітря і щоб кров і розчинна рідина бралися строго до відповідної мітки.
Техніка зарядки лічильної камери така ж сама, як і при підрахунку кількості еритроцитів.
Підрахунок проводять під мікроскопом при об’єктивах і в окулярі 15 в 50 або 100 "великих" квадратах. По кутах сітки беруть 25 "великих" квадратів, або рахують по ряду, в кожному ряді по 25 "великих" квадратів.
Для підрахунку кількості лейкоцитів користуються формулою:
Х - кількість еритроцитів в 1мл крові,
П - сума еритроцитів в 5 "великих" квадратів,
4000-обернена величина об¢єму “малого квадрата”
У - ступінь розведення крові,
800(1600)- кількість підрахованих "малих" квадратів,
4000- обернена величина об’єму "малого" квадрата.
Фізіологічний - при вагітності, у новонароджених (в перші дні після народження),після прийому корму (харчотравний), після важкої фізичної роботи (міогенний).
Медикаментозний - після парентерального введення тваринам білкових препаратів, вакцин, сироваток, алкалоїдїв, ефірних масел.
Патологічний - при захворюваннях септичного і інфекційного характерному, при лейкозах.
Зменшення кількості лейкоцитів – лейкопенія – спостерігається при вірусних захворюваннях при паратифі телят.
При захворюваннях може проходити зміна насичення еритроцитів гемоглобіном, що можна визначити шляхом визначення кольорового показника по формулі:
КП - кольоровий показник,
Нв1 - середня кількість Нв в нормі (г/100мл),
Нв2 - кількість Нв в досліджуваній крові (г/ІООмл),
Е1 - середня кількість еритроцитів в нормі (млн мкл),
Е2 - кількість еритроцитів в досліджуваній крові (млн мкл).
Кольоровий показник у сільськогосподарських тварин слідуючий:
Коні -8,0-1,2
ВРХ -0,7-1,1
Вівц -0,5-0,7
Кози -0,44-0,41
Собаки-0,8-0,12
Кури-2,0-3,0.
Відхилення кольорового показника на 15% і більше від норми свідчить про порушення складу, крові, що враховується при диференціації анемії.
Підвищення кольорового показника – гіперхромія - спостерігається при гемолітичній анемії.
Пониження кольорового показника - гіпохромія - характерна для вторинних анемій.
Кольоровий показник не знижується при постгеморагічних анеміях.
Середній вміст гемоглобіну в еритроцитів визначається по формулою
Середній вміст гемоглобіну в одному еритроциті і кольоровий показник залежить від величини еритроцитів і кількості гемоглобіну в них. В залежності від їх співвідношення розрізняють нормо-, гіпер- і гіпохромію еритроцитів. Якщо КП та СВГ в еритроциті в границях норми – це нормохромія.
Однак, вона може зустрічатися і при деяких анеміях (гострі постгеморагічні і гемолітичні, гіпопластичні).
Збільшення СВГ разом з КП (в цьому разі збільшується об¢єм еритроцитів-макроцитез, а не підвищується насиченість еритроцитів гемоглобіном) позначається як гіперхромія. Такий стан зустрічається при хронічних гемолітичних, міелотоксичних анеміях, при В12 - авітамінозі
Зниження КП-гіпохромія може зустрічатися при зменшенні об¢єму еритроцитів (мікроцитоз), або при зниженні насиченості нормальних по і величині еритроцитів гемоглобіном. Вона спостерігається при залізодифіцитній анемії.
Методика визначення імунного стану новонароджених телят.
Застосовувана нами методика визначення імунного стану новонароджених телят натрій-сульфітна проба, перевірена рядом зарубіжних дослідників, рекомендується як метод, зручний для застосування в виробничих умовах.
Пробу ставили в трьох ампулах з різними позначками-синьою, зеленою,червоною(позитивна реакція в яких(поява осаду) вказує на вміст імуноглобулінів в сироватці крові більше 15,5-15,менше 5мг/мл відповідно),до яких додавали 0,1 мл сироватки досліджуваної крові.
Технічний опис приладу ПЕРТ-4м.
І.Призначення.
1.1. Прилад використовують для пошуку біологічно-активних точок(БАТ)контактним способом І терапевтичної дії на них електричним струмом однієї або змінної полярності.
1.2.Прилад застосовують в тваринництві з метою лікування методом електропунктури ВРХ і інших домашніх тварин: стимуляція лактації, профілактика І лікування маститів, лікування диспепсії телят, підвищення ефективності відтворення і інше.
1.3. Прилад повинен експлуатуватися при температурі плис 10 плюс 40 вологості до 90% при температурі 20С.
2. Технічні дані.
2.1. Мінімальна напруга в ланцюгах діючих електродів при протидії нагрузки дорівнює нулю-10 мкл.
2.2. Максимальна напруга дії при протидії нагрузки рівна нулю -500 мкл.
2.3. Максимальна кількість біологічно-активних точок, яка піддається одночасній дії -2 шт.
2.4. Діапазон напруги живлення від батареї типу "Крона"-7+9 вольт.
2.5. Час автоматичного переключення полярності діючого току рівний:
а) в положенні В4 - "Торможение" від 1 секунди до 40 +30%.
б) в положенні В4 - "Возбуждение" від 0,1 до 1 сен.+30%.
2.6. Габаритні розміри - 170 * 115 * 75 мм. 2.7.Вага-900 грам.
2.1. Комплект приладу .
2.1.1.У комплект приладу входить :
а) власне прилад ПКРТ-4м-Ішт.
Б) джгут І 1шт
В) джгут ІІ 1шт
Г) джгут ІІІ 1шт
е) кронштейн для
підвіски 1шт.
ж) опис і інструкція
по експлуатації 1 шт.
2.2. Будова приладу ПЕРТ-4м.
2.2.1. Прилад має таку конструкцію:
а) прилад (рис.1)виконаний в металічному корпусі, який дозволяє експлуатувати його в середовищі, який має агресивні фактори,
б) накривка приладу одночасно виконує функцію лицевої панелі приладу, на якій розміщені елементи управління і мікроамперметр для індикації струму дії на біологічно-активні точки.
2.2.2. На лицевій панелі приладу встановлені :
- мікреампеметр типу М 4205 з відповідними шкалами 500-0-500 мікроампер (при включеному тумблері-"500" мкА).
- ручка "Ток" для регуляції вихідного струму,
- ручка "2+ "сек. для плавної регуляції часу дії на біологічно-активні точки струмом позитивної полярності.
- ручка "3- "сек.для плавної регуляції часу дії на біологічно-активні точки струмом від’єемної полярності,
- тумблер "Полярность" для ручного переключення полярності діючого на біологічно-активні точки струму(при діагностиці по стану біологічно-активних точок,
- тумблер В2 "Род Работ" для пошуку біологічно-активних точок в режимі "Поиск" лікування в автоматичному режимі "АВТ" переключення полярності.
- тумблер В4 "Род работ" для лікування в автоматичному режимі при дії на біологічне-активні точки методами "Возбуждение" і "Торможение",
- тумблер "Питание" для включення батареї живлення,
- гнізда "Вуход" для підключення відповідних жгутів і сполучення біологічно-активних точок а приладом в режимі пошуку біологічно-активних точок і лікування,