Б. разделяются на 5 основных фракций: альбумин и 4 глобулиновые: а1 - , а2 - ,B - , у – глобулины, содержание котор. опред фотометрически или с использованием денситометрии.
КДЗ – исследования Б.Ф. - комплексная оценка изменений всех выделяемых на носителе белк.фракций.
Диспротеинемия – наруш.соотношения между разл. Б.фракц.
Паропротеинемия – появл в плазме крови патологических,
не встреч в норме Б. - парапротеинов.
Типы измен.:
- о. в. Процессы - Альбумин знач.сниж., увелич к - во: а1 - ,а2 - глобулиов.
- хр. в. проц. - общ. Б. не измен., альбумин умеренно сниж., увелич. а1 - , а2 - , B - , у – глобулины.
- синдром сниж. почечн. функции - знач. сниж. Альбумина, умеренно сниж. а2 - ,B - глобулины. (за счет сниж. ЛПОНП), при умер. сниж. у – глобулинов (G и А) – вследствии повыш. проницаемости почечного фильтра).
- злок.новообразования – резкое знач. сниж. Альбумина и значит. Увелич. всех глобул. фракц.
- гепатиты - (в следствии токсического поврежден.печени) и т.д.
Клинико-диагностическое значение исследования содержания мочевины, методы определения
Мочевина предст. собой диамид уголоной кислоты, образ. в печени в процессе обезвреж. аммиака. М. свободно проходит через мембраны клеток паренх. орг. и Er.
Абсолютная гиперазотемия - Повыш.содержание мочевины вызывается усиленным образованием компонентов остаточного азота (активация протеолиза и катаболизма белка), либо задержкой азотистых шлаков при наруш. выделит. функции почек при их патологии: хр. почечн. недост., о.и хр. гломерулонефрит, пиелонефрит, амилоидоз, поликистоз и др., при уменьшении фильтрации в клубочках почек из - за ухудшения центральной гемодинамики (у больных с декомпенсацией сердечно - сосудистой деятельности).
Внепочечная задержка гиперазотемия – при наруш. оттока мочи (камни мочевывод. путей, сдавл. опухолью, аденома и гепертрофия предст.жел.)
Метаболическая (продукционная) гиперазотемия – при усил. распаде белков (патологич. состояния, при инфекц. заб. протек. с лихорадкой и прогрессирующем распадом тканей – сепсис - дефтерия – скарлатина - круп. пневмония – туберкулез); сах. диабете, злок. новообразов., о. атроф. и тяж. цирозах печени, ожогах, перитонитах,
о. киш. непрох., гиперфункции коры надпочечников, о. инф. миокарда, отравл. ядами (мышьяком, фосфором, щелочами и др.)
Относительная азотемия - у больн. с явлениями сгущения крови при профузных поносах, усиленном потоотделении.
Методы определения сод. Мочевины – на 2 осн. группы:
Ферментативные (уреазные) и неферментативные (газомтрические или гипобромные, ксантигидроловые, диацетилмонооксимные, гипохлоридные)
Полуколичественные – диагност. Тест - полоски.
Колориметрический методы – осн. на реакц. Фирона, сост.в образ. окраш. прод. при взаимодейств. Мочевины и диацетилмонооксимом.
Nв сыв.крови. - 2.5 - 8.3 ммоль/л; в сут.моче – 330,0 – 582,8 ммоль/л.
Более точными и специфич. явл. ферментативные методы.
- с прим.препар.уреазы.
Опр.мочев. - уреазным фенолгипохлоридным методом:
М. под действ. уреазы гидролизируется с обр. карбоната аммония, ионы аммония в присутствии нитропрусида с фенолом и гипохлоритом - образ. окраш. комплекс. интенсивн. окр. = конценрации мочевины.
Nв сыв.крови. - 1.7 - 8.3 ммоль/л (100 - 500мг/л);
в сут. моче – 333 – 583 ммоль/л. (20 - 35 г/сут.)
Определение креатинина, геморенальные пробы, клиническое значение
Опред. креатинина:
неферментативн. (колориметрические и кинетические –
реакция образования окраш. комплекса с пикриновой кислотой).
энзиматические
кинетический метод - реакция Яффе. (СОЛАР)
У мужчин - 53 – 110 ммоль/л
У женщ. - 44 – 95 ммоль/л
КДЗ – увелич. Ретанционное – наруш. почек любого происхождения
снижение.
Увеличение продукционное – при кишечн. непроход., о. атроф. печени, пневмонии, лихорад.сост.
Снижение – уменьшение массы тела - мышечн.дистрофия, атрофии, параличи, парезы и др.
Для диагностики – расчет клиренса креатинина (геморенальная проба или клиренс теста):
Метод основан расчет очистительной способности почек – клиренса (чистить) - Коэффициент очищения. Сравнение содержания в - в в крови и в моче.
Повышение концентрации азота и его компонентов в крови свидетельствует о задержке азотистых «шлаков» в следствии нарушения почечного фильтра.
Клинико–диагностическое значение определения ферментов. Методы исследования
Ферменты (Энзимы) – спец. белки, роль – биокатализаторов (ускорителей хим. реакций) делятся на - простые (сост.только их аминокислот); - сложные – двукомпонентные – белковый компонент + апофермент, простетическая группа + кофермент – таких ферментов большинство. К этой группе относятся – трансаминазы, ЛДГ, ПДГ, транскетолазу.К простетической гр. в молекуле энзима (фермента) + витамины, нуклеотиды, углеводы, некатор. металлы, ост. фосфорн. кислоты и др. соединения.
Ингибиторы – подавляют ферментативную реакцию.
Активаторы – повыш.скорость ферм.реакций.(Са+, Мg+, К+, Na+,
Сl - (анион) и др.)
В печени содерж. - АЛТ, АСТ, ЛДГ, ЛАП, ЩФ;
В сердце – КК, ЛДГ, АСТ;
В поджелуд. жел. – а – амилаза (диастаза), липаза, ЛДГ;
В костной ткани – ЩФ;
В предстательной жел. – КФ
Методы исслед.:
1.Колориметрические – инкубац.сывор.с субстрактом в буфере, опред.время, реакцию останавливают и образующие продукты при помощи химической реакции определяют, либо замеряют количество оставшегося субстракта.
2.Спекторофотометрические – (кинетические) - непрерывно или периодически в ходе ферментативной реакции определяют потребление субстракта или кофермента, либо образование продукта.
КДЗ – ферментная диагностика используется для:
- для распознавания наследственных нарушений обмена веществ (первичные наслед.энзимопатии)
- для диагностики и дифференциальной диагностики приобретенных заболеваний (вторичн. приобрет. энзимопатии) – можно выявить особенность протекания болезни почти на молекулярном уровне.
Повышение активности ферментов – за счет выхода фермента из органов или тканей в кровяное русло.
Определение активности аминотрансфераз, клинико-диагностическое значение
Аминотрансферазы – это ферменты, осуществ. процессы межмолекулярного переноса аминогрупп, т.е. трансаминирование (переаминирование) - процесса. Трансаминирование играет ключев. Роль в промежуточном обмене, обеспечивает синтез и разрушение отдельных аминокислот в организме. АСТ и АЛТ.
Методы определения активности аминотрансфераз в сыворотке крови делятся на 2 основные группы:
Колориметрические (конечной точки.)
Кинетические (спекторофотометрические)
КДЗ – для диагностики
инфаркта миокарда АСТ, который не диагносцируется электрокардиографом (кардиограмма)
- (гемолиз Er – не искажает результат);
забол. печени АЛТ (гемолиз Er – искажает результат т.к. в 6 раз превышает содержание внутриклеточно)
(вирусный, токсич. Гепатит), мышечной патологии и др.
В N АСТ –до 31 Е/л
В N АЛТ –до 32 Е/л
Определяется на «Хитачи»
Клинико-диагностическое значение определения активности фосфатаз
Фосфатазы – ферменты отщепляющие остаток фосфорной кислоты от ее органических эфирных соединений.
ЩФ – содержится практически во всех тканях человека, прежде всего в костной тк., паренхиме и стенках желчных протоков печени, канальцев почек, предстательной и молочной железе, клетках слизистой оболочки кишечника, плаценте. Особенно много в растущих костях, желчи и плаценте, в биологических жидкостях тела (мочу, кал, слюну…).
КФ – кислая фосфатаза - фермент – содержится главным образом в предстательной железе, активность её в 1000 раз больше чем в костной ткани, печени, селезенке и почках.
Колориметрические (конечной точки.)
Кинетические (спекторофотометрические) в N ЩФ у муж.0,90 – 2,29; у жен. 0,74 – 2,10; у детей 1,20 – 6,30.
КДЗ – возрастание активности ЩФ – 2 вида патологий: костные заболевания, связан.с пролиферацией остеобластов, и заб. сопровожд. явлениями холестераза (заб.печенит – желтуха, закупорка желчных протоков камнями, спайками,опухолью, лейкимия с разрушением L и выход фермента в кровь)
Снижение активности ЩФ – при замедл. росте детей, при гипотиреозе, авитаминозе С, старч.остеопарозе, при накоплении радиоактивн.в - в в костях.
Повыш.активности КФ –указ на новообразования в предст.железе (в N ЩФ), после операт.вмеш. на предст.жел., биопсия.
Определение активности а - амилазы в сыворотке крови и моче, принцип метода
а - амилаза (диастаза) – фермент - осущ. гидролитическое расщепление полисахаридов (крахмал, гликоген, амилозы и др.продуктов содержащих остатки глюкозы) додекстринов и мальтозы.
Метод определения активности а - амилазы по Каравея (микрометод)
Метод базируется на колориметрическом определении концентрации крахмала до и после его ферментативного гидролиза.
В N в сыворотке крови 16 - 30 г/(ч.л), в моче 28 - 160 г/(ч.л)
Определение активности а – амилазы в биожидкостях энзиматическим методом по конечной точке: интенсивность окраски = активности фермента.
КДЗ: значительное возрастание активности фермента – при заболеваниях поджелудочной железы: о.панкреатит – в сыворотке крови активность а - амилазы повышается и достигает максимума к 12 - 24 ч после развития панкреатита и снижается на 2 - 6 сутки, а в моче может оставаться повышенной до 7 суток. Реже встречаемое или не столь выраженное увеличение - при о.холецистите и др.заб. желчевыводящих путей, перфорации пищевода, язве желудка, при заб. слюнных желез и др.заб.