Клинико-диагностическое значение определения общей активности ЛДГ и её ферментов
ЛДГ (лактатдегидрогеназа) – гликолитический фермент, обратимо катализирующий окисление L - лактата (молочной кислоты) в пируват (пировиноградную кислоту)
В плазме выявлено 5 изоэнзимов ЛДГсостоящих из субединиц:
М (muscie) и H (heart) - 5 изоформ:
ЛДГ – 1 (НННН), ЛДГ – 2 (НННМ), ЛДГ - 3 (ННММ), ЛДГ - 4 (НМММ),
ЛДГ - 5 (ММММ)
ЛДГ - 1 –в основном находится в сердце.
ЛДГ - 5 – в печени.
Методы определения:
кинетические – на оптическом тесте Варбурга в N 174 - 516 Е/л
2.колориметрические – согласно которым определяется количество образовавшегося продукта или потребляемого субстракта после фиксированного инкубационного периода.
КДЗ: - при о.гепатите активность увеличена ЛДГ отмечается в первые недели желтушного периода - (ЛДГ_4, ЛДГ - 5) в первые 10 суток.
У больных инфарктом миокарда повышается активность фермента в первые 8 - 10 часов после начала приступа, максимума к 24 - 36 часам – (ЛДГ - 1, ЛДГ - 2)
Увеличению активности ЛДГ способствует прием алкоголя, некоторых лекарств. препаратов (анаболических стероидов, тестостерона, обезболивающих препаратов, сульфониламида, кодеина,и др.преп.)
Регуляция углеводного обмена, роль углеводов в организме. Определение содержания глюкозы в организме
Углеводы – органические вещества в состав которых входит углерод, водород и кислород.
Роль углеводов:
Энергитическая, пластическая (синтез сложных ферментов, белков, нуклеиновых кислот, входят в состав клеточных мембран, участвуют в построении клеток опорно - двигательного аппарата), защитная (входят в состав слизи, секретируемых желез, способствуют обезвреживанию и выведению токсических веществ), Депонирующая (запас.питательных веществ в печени в виде гликогена – распадается до глюкозы), Специфическая – связаны с белками, определяют специфичность групп крови человека.
Регуляция углеводного обмена: выделяют 3 уровня: нервный, гормональный и тканевый; регулируется ЦНС и эндокринной системой.
ЦНС - > в печень – распад гликогена – глюкозы - >доNуровня глюкозы вкрови - > ЦНС - в поджелудочную железу,и из B - клеток островкового аппарата –> инсулин (способств.усвоению глюкозы тканями).
В плазме крови в наибольшем количестве – глюкоза (является ценнейшим питательным в - вом особенно для мозга).
Колориметрические методы делятся на ферментативный и неферментативный (образование окрашенных соединений - ортотолуидиновый метод, прост в исполнении, точен и специфичен - , ручной метод, влечет – канцерогенез). Шире используют энзимные реагенты – глюкозооксидазный
(количество связанного кислорода или образов.перекиси водорода = содержанию глюкозы) и гексогеназный.
Гексокиназный - Ферментативный метод опр.глюкозы (глюкоза под воздействием гексокиназы и АТФ превращ.в глюкозо - 6 - фосфат, который при взаимодействии с окисленным НАД под влиянием Г - 6 - ФДГ преобразуется в глюконат - 6 - фосфат и восстановленный НАД) - позволяет получить результаты за меньший промежуток времени (3мин) с применением спекторофатометра снабженного термостатируемым кюветным отделением, или полу - автоанализатора.
В N в сыворотке 4,2 – 6,1ммоль/л
В N в моче до 0,8 ммоль/л
Полуколичественный и количественный экспресс – определение глюкозы в крови и в моче с использованием методологии «сухой химии» - визуальной или фотометрической оценки исследуемой жидкости.
(Тест полоски)
Клинико-диагностическое значение определения липидов. Методы определения уровня холестерина
Липиды - гр. разных по хим. природе биологич. важных в - в, проявл близкие по физич. и физико - хим. свойствам. Их обьедин. способн. хорошо раствор. в жиров. растворителях и незначительно в воде. Вместе с белками и углеводами сост. основной субстракт мембран клеток.
К липидам относят – жиры (нейтральные) - триглицириды, холестерин (общ.своб.и связ.), фосфолипиды (липиды содерж. обяз.компонент - фосфор), гликолипиды.
Методы определения холестерина – на автоматическом анализаторе «Хитачи» или метод определения общего холестерина (метод Илька) колориметрический метод (длина волны 590 - 630нм(ФЭК),норма Холест. 3.0 - 5.2ммоль/л
- принцип: ХС в присутствии уксусного ангидрида, смеси уксусной и серной кислоты дает зеленое окрашивание, интенсивность которого = содержанию холестерина.
КДЗ:
Гиперхолестеринемия – фактор риска коронарного атеросклероза, ИБС и инфаркта миокарда. Генитические нарушения в обмене ЛП.
Вторичная Гиперхолестеринемия - при забол.печени (обтурационной желтухе), поражениях почек (гломерулонефрит), злокачественных образованиях поджелудочной железы и простаты, подагре, гипертонической бол., эндокринных расстройствах, гипотериозе, сах.диабете, хр.алкоголизме, гликогенозе 1т., ожирении.
Снижение уровня холестерина – гипохолестеринемия – при голодании, при поражении ЦНС, умственной отсталости, гипертиреозе, о.инф.заб., о.панкреатите, и др.заб.
Исследование пигментного обмена. Виды желтух, методы определения билирубина в сыворотке крови
Источниками образования пигментов служат Hb. Erживут 100 - 120 дней. При разрушении в кост.мозге, силезёнки, печени - происходит распад Hb – образуется пигмент зелёного цвета – вертоглобин. ®на железоглобин и глобин®биливердин, под воздействием ферментов® биллирубин (номальная составляющая часть крови) не прямой, свободный.
Далее неконьюгированный биллирубин поступает в печень под действием трансферазы соединяется с глюкороновой кислотой и образует коньюгированный (прямой, связанный) биллирубин – водорастворим, выделяется мочёй, поступает в желочный пузырь ® кишечник, в тонком кишечнике, под влияние флоры восстанавливается до стеркобиллиногена и мезобиллирубиногена, выделяется с калом, окисляется до стеркобиллина; через большой круг кровообращения. Через почки выделяется с мочёй в виде уробиллиногена, окисляясь воздухом превращается в уробелин.
Норма биллирубина 8,6 – 20,5 мкМоль/л
Определение биллирубина в сыворотки крови – метод основан – коньюгированный биллирубин даёт с деазореактивом (сульфаниловая кислота) розовое окрашивание, а не коньюгированный биллирубин даёт окрашивание после добавления кофеина. По интенсивности окрашивания судят о содержании общего билирубина (коньюгированный + неконьюгированный).
Норма общего 11,1 мкмоль/л
Коньюгированный 2,58 мкмоль/л
Неконьюгированный 8,56 мкмоль/л
Методы исследования желудочного содержимого. Клинико-диагностическое значение
Определяется общая кислотность, свободная НСL и связан.
НСL.
в Nобщ. – 40 - 60 ммоль/л.
Своб.НСL – 20 - 40 ммоль/л.
Связ.НСL - 10 - 20 ммоль/л.
Кисл.ост. - до - 10 ммоль/л.
Гиперсекреция – язв.б - нь ЖКТ, желчнокаменная б - нь, гастродуодениты.
Гипосекреция – гастриты, рак, злокачеств.опухоли, анемия.
Отсутствие НСL - ахлоргидрия.
Отсутствие НСL и пепсина – ахилия.
Метод - зондовый: Титрование по Михаэлису.
Реактивы: - 0,1Н – NaOH (едкий натрий), 1% - спирт.р - р. Фенолфталеина 0,5% - р - р. диатиламидоазобензола.
I отметка – розово - желтое окрашивание – св.HCL
II отметка - лимонно желтое окрашивание
III отметка - розовое окрашивание – общая кислотность.
При отсутствии св.HCL определяют её дифицитом, титруют до розово - желтого окрашивания 0,1H - HCL.
Метод Топфера (зондовый метод иссл.) - прим.для титров.сока, в котор.отсутств.св.HCL.
Дефицит HCL - опр.из любой пробы, кроме натощак - отсутствует св.HCL.
Опр.дебита HCL - иссл.абсолютную величину продукции HCL во времени дебит - час HCL.
Опред.молоч.к - ты - реакция Уфельмана в натощаковой пробе при отс.св.HCL. Молоч.к - та появл.при выраж.ахлоргидрии, заст.явл.в жел.,онкообр.,
при патол.брожении - палочкой молочнокислого брожения - указ.на отсутствие св.HCL.
Беззондовые методы иссл.желуд.сока: с применением ацидотеста 9опр.кослотообразующую, пепсинообр.и эвакуаторно - моторную фун.желудка. (больн.опор.мочев.пузырь и выпивает 3 тест - драже, отмеч.время, через 10 мин. Пьет 200мл.воды, через 1ч30мин. - собир. 1порц.мочи, через 1ч.30мин. повтор. 1порц. Иссл..уропепсин - 1мл.,
1 и 2 порц довод.до 200 мл.в колбе - 2.5 мл+2,5 HCL - коллориметрировать при зеленом светофильтре в кювете 5 мл.
в Nпочти одинакова = 1 - 1,5
При замедленной эвакуации больше 1,5
При ускоренной - меньше 1
Исследование функционального сост.желудка после введения стимулятора: стимуляция капустн.соком, хлеб.завтрак, 2 кофеин.табл.или 0,1 мл.0,1% гистамина на 10кг.веса пациента.
Опр.на ФЕК - в N у жен.0,15 - 0,25, у муж.0,15 - 0,30
Исследование дуоденального содержимого, методы и клиническое значение
Производят дуоденальное зондирование и получают несколько отдельных фракций сока – его исследование – установить функцианальное состояние желчевыводящих путей, желчного пузыря и локализацию патологического процесса (III порции).
1 - фаза –желчевыделение из общего желчн. протока - сфинктра до 10мл.
2 - фаза - соотв.периоду закрытия сфинктра (2 - 6 мин не выдел.желчь)
3 - фаза – получение желчи А (3 - 5 мин.)
4 – фаза – получение желчи В – пузырной – в результате сокращения пузыря.,
5 – фаза – получение желчи С – из печеночных протоков.
В N все порции прозрачны, почти не содержат клеточных элементов, pH желчи 6.6 0 7.6.
Изменение цвета, появление слизи, хлопьев, обнаружение L, эпителия – говорит о восп.процессах, холецистите.
Так же велика роль биохимического исследования желчи, что позволяет улучшить диагностику заболеваний желчевыводящих путей, концентрационной функции желчного пузыря, факторах риска образования камней. Исследуют в порциях содержание билирубина, холнстерина.