III. Специальные зернистые лейкоциты, или нейтрофилы
Нейтрофилы (специальные зернистые лейкоциты, гетерофилы, псевдоэозинофилы или амфиоксифилы некоторых животных) имеют очень важное значение для клиники и физиологии.
Клетки нейтрофилов округлые, диаметром от 7,0 до 15,0 µ. В цитоплазме обильная, очень мелкая, нейтрофильная зернистость. Я д р о, по мере развития клетки, постепенно сегментируется. Зернистость ясно заметна даже в свежей неокрашенной крови. Эти при жизни клетки серебристо блестящие зёрнышки густо выполняют эндоплазму, передвигаясь с нею при амебоидных движениях клетки. Эктоплазма представляет собой тонкий гомогенный периферический слой, свободный от гранул. У некоторых животных (мыши, крысы и кошки) эерни-стость выражена очень слабо, но, однако, вопреки отрицанию Максимова, несомненно есть.
Цитоплазма оксифильна, окрашивается в бледнорозовый цвет, иногда почти бесцветна. Изредка в цитоплазме нейтрофилов встречаются небольшие участки, сохранившие базофилию, характерную для материнской клетки. Такие ясноголубые пятна получили название телец Деле (Dohle).
Окраска зернистости специальных гранулоцитов несколько различна у разных видов животных. Поэтому в последнее время для нейтрофилов предложено новое, удачное наименование — гетерофилы.
У обезьяны, собаки, кошки и свиньи зернистость имеет сродство к нейтральным краскам и при комбинациях красок по Романовскому окрашивается в розово-фиолетовый цвет. У большинства же остальных млекопитающих зернистость амфофильна, т. е. красится как кислыми, так и основными красками. У коровы, овцы, лошади и морской свинки (по Максимову) эти зёрна амфооксифильны, т. е. имеют большее сродство к кислым краскам; у кролика они окрашиваются эозином в яркокрасный цвет и поэтому называются псевдоэозинофилами.
У некоторых животных гранулы амфобазофильны. Зернистость псевдоэозинофилов кур и других домашних птиц окрашивается в яркокрасный цвет,весьма крупна и в большинстве случаев (особенно у зрелых форм) имеет палочковидную и даже веретенообразную, с заострёнными концами, форму. У более молодых форм зёрна округлы (Лебедев). Ряд авторов (Букраба, Я. Соловей) считает, что у кур нет вообще псевдоэозинофилов, а только эозинофилы. Но большинство исследователей диференцирует эозинофилов от псевдоэозинофилов, и морфологически и функционально, сближая последних со специальными гранулоцитами (Максимов, Рухлядев, Клинебергер и Карл, Лебедев). Особенно тщательное исследование разницы между эозинофильной и псевдоэозинофильной зернистостью произвёл Лебедев (1940 г.). Он установил, что при суправитальной окраске бриллианткрезиловая голубая окрашивает гранулы эозинофилов в голубовато-розовый цвет, а псевдоэозинофилов — в зеленовато-синий. Оксидазо- и пероксидазо-положительными оказались лишь эозинофилы. Окраска на липоиды по Зерту (Sehrt) дала положительный результат только с зернистостью эозинофилов. При обработке окрашенных препаратов смесью уксусной кислоты и спирта, зёрна эозинофилов сохраняют свою окраску, а верна псевдоэозинофилов обесцвечиваются. Наконец, сдвиг ядра псевдоэозинофилов у кур был идентичен с закономерностями сдвига ядра нейтрофилов при ряде патологических состояний у других животных. Следует, однако, отметить, что ранние стадии развития псевдоэозинофилов и эозинофилов, окрашенные растворами Гимза или по Паппенгейму, различать крайне трудно.
Разделение лейкоцитов на типы можно представить так:
| Лейкоциты (белые кровяные тельца) | ||||
| Гранулоциты | Агранулоциты | |||
| Имеют цитоплазматическую зернистость. Содержат оксидазу. По типу окислительного обмена отличаются более интенсивным поглощением кислорода и значительным анаэробным гликолизом | Не имеют цитоплазматической зернистости или имеют мелкую азурофильную зернистость, не определяющую функциональную значимость клетки. Оксидазы не содержат или содержат только следы по типу окислительного обмена менее интенсивно поглощают кислород и обладают вдвое слабейшей способностью к анаэробному гликолизу. | |||
| Базофилы или тучные клетки (с базофильностью в цитоплазме) | Эозинофилы (с ацидофильной зернистостью в цитоплазме | Нейтрофилы (гетерофилы), или специальные гранулоциты (с нейтрофильной зернистостью в цитоплазме) | Лимфоциты (цитоплазма голубая с перинуклеарной зоной. Округлое , темно прокрашивающееся ядро, относительно грубой структуры) | Моноциты (дымчато-серая, иногда с розоватым или лиловатым оттенком цитоплазма, несколько расчлененное, бледно окрашивающееся, тонкой структуры ядро) |
Следует иметь в виду, что так называемая «структура» ядер является, при обычных способах фиксации, в том числе и фиксации метиловым спиртом, в значительной степени результатом коллоидальной флокуляции веществ ядра. В зависимости от применяемых фиксаторов, эта структура существенно изменяется. На самом же деле, как показал П. В. Макаров (1948 г.), покоящееся нативное ядро — за исключением ядрышка — оптически пусто, без микроструктур. В период кариокинетического деления в нём возникают временные образования — хромосомы.
Поэтому в дальнейшем описании под структурой ядра следует понимать возникающие в ядре при взаимодействии с фиксирующими и красящими веществами варьирующие образования — коагуляты. В ядрах различных клеток, в зависимости от специфических коллоидально химических различий их ядерной плазмы (кариоплазмы), эти коагуляты имеют некоторые морфологические особенности, которые и дают возможность различать между собою виды клеток.
А. ГРАНУЛОЦИТЫ
I. Базофилы
Базофильные гранулоциты, или тучные клетки, обычно круглой или округло-овальной формы, диаметром 8—15 µ. (у лошадей и коров несколько более крупные). Сама цитоплазма слабооксифильна и окрашивается в бледный, розовато-фиолетовый или, иногда. сыровато-голубой цвет, но находящиеся в ней крупные округлые зёрна (гранулы) резко базофилъной природы и окрашиваются метахроматически в тёмный красно-фиолетовый или ультрамариново-фиолетовый цвет (цвет мальвы — по Крюкову).. Зёрна легко растворяются в воде и потому в препаратах, фиксированных плохо обезвоженным метиловым спиртом, часто на место верен в цитоплазме образуются белые «окошечки». При фиксации абсолютным метиловым спиртом зёрна сохраняются хорошо. Расположение гранул в цитоплазме неравномерное, рыхлое. Часто они закрывают отдельные участки ядра. По своей химической природе базофильные зёрна являются белками, близкими к гликопротеидам.
Ядро базофилов — неясной структуры, неправильно лопастное или округлое, окрашивается в фиолетово-розовый цвет. В ядре расплывчато чередуются более светлые поля оксихроматина с темноокрашенными базихроматиновыми полями.
В базофилах чрезвычайно трудно различить стадии миэлоцита — юную, палочкоядерную и сегментоядерную. Вообще сегментированность ядра выражена слабо. Практического значения, для подсчёта лейкоцитарной формулы, дифференциация базофилов по степени их зрелости не имеет, прежде всего, потому, что в крови млекопитающих их очень мало: от 0,1 до 1—2%, в среднем 0,5%. Кровь сельскохозяйственных птиц содержит 3—4% базофилов, а содержание их в крови лягушек доходит до 23%.
Вообще, содержание базофилов очень высоко у амфибий, рептилий и у некоторых рыб.
Функциональное значение базофилов не выяснено. Повидимому, они играют некоторую роль в защите организма при парентеральном введении чуждых белков. Они способны фагоцитировать и содержать окислительные ферменты. Ряд учёных считает их трефоцитами («питающие клетки» Либмана). Такие клетки, переносящие питательные вещества, особенно широко распространены у беспозвоночных, где они часто преобладают.
Клиническое значение базофилов невелико. Количество их несколько возрастает при инъекции белков, при некоторых авитаминозах (группы В) и гепатических циррозах.
II. Эозинофилы
Эозинофилы (синонимы — оксифилы или ацидофилы) — это крупные (особенно у лошади) круглые клетки, диаметром от 8,2 до 19,8)1. Очень редко попадаются карликовые формы эозинофилов (особенно у крупного рогатого скота при депрессии гемопоэза). Очень крупны Эозинофилы лошади.
Цитоплазма слегка базофилъна, бесцветна или голубоватого цвета. Зёрна ярко окрашены эозином в интенсивный красный или розово-красный цвет (по описанию Крюкова, в кирпично-красный). У птиц они скорее розовые, чем красные. У молодых форм гранулы часто окрашены базофильно и лишь постепенно, по мере созревания клетки, становятся ацидофильными. У кошек цвет верен красновато-пурпурный.
Размерь и форма гранул весьма различны. У лошади .они очень крупные (до Зµ в поперечнике], покрывают часть ядра и придают эозинофилу вид плода малины (табл. 1—2). Довольно крупные верна у эозинофилов кролика (до 1,5 µ). Значительно мельче эозинофильная зернистость овцы. У свиньи зерна очень правильной круглой формы.
Обычно зёрна эозпнофилов расположены очень тесно, у лошади они часто даже сдавливают друг друга и приобретают угловатую форму и между зёрнами трудно различить цитоплазму. Однако у некоторых животных (например, у овцы) зерна могут быть расположены сравнительно редко, особенно в молодых клетках, и тогда цитоплазма видна хорошо. Типичные эозинофилы имеются в крови почти у всех позвоночных (кроме некоторых рыб). У п т и ц (Казаринов, Лебедев) зёрна эозинофилов относительно мелки. У рептилий эозинофилы составляют большинство лейкоцитов. Ацидофильные зёрна эозинофилов рептилий, плотно расположенные в цитоплазме, то шарообразны, то овальны, иногда имеют форму ромбических кристаллоидов или, наконец, представляют собой глыбки неправильной формы. Эозинофилы амфибий весьма напоминают собой аналогичные клетки у млекопитающих. Их гранулы относительно весьма велики. У большинства рыб имеются типичные эозинофилы, чаще всего с простым, круглым ядром. У некоторых видов рыб эозинофилы атипичны, — это лимфоидные клетки с редкими, но очень крупными гранулами, в цитоплазме. Наконец, в крови некоторых видов рыб эозинофилы, невидимому, не содержатся.