Информативными показателями неспецифической резистентности организма являются исследования гемолитической активности комплемента, фагоцитарной активности лейкоцитов (определение % фагоцитов, фагоцитарного числа, количества активных фагоцитов, абсолютного фагоцитарного показателя, индекса завершенности фагоцитоза) и общей окислительно-восстановительной активности нейтрофилов в тесте восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-тест).
Для выяснения патогенетических механизмов нарушения функционирования иммунной системы дополнительно рекомендуется оценка главных ее составляющих, включая распознавание, активацию, пролиферацию, дифференцировку и регуляцию.
Опасность иммунотоксического действия оценивается с учетом
соотношения между пороговой концентрацией (Lim ), установленной
im
по влиянию веществ на систему иммунитета, и порогом хронического
общетоксического действия. В том случае, если Lim < Lim ,
im ch
вещество регламентируется по иммунотоксическому действию (ПДК
принимается на уровне недействующей концентрации). Если в
результате эксперимента Lim < Lim , уровень ПДК устанавливается
ch im
без учета иммунотоксических свойств.
При ускоренном обосновании ПДК или установлении ОБУВ
проводится сопоставление Lim и недействующей концентрации с
im
величиной гигиенического норматива, рассчитанной по параметрам
общетоксического действия. Если расчетное значение ОБУВ находится
на уровне или выше недействующей концентрации по
иммунотоксическому действию, нормирование вещества осуществляется
с учетом его иммуномоделирующих свойств. При более высоких
значениях Lim по сравнению с расчетной величиной ОБУВ уровень
im
гигиенического норматива устанавливается по общетоксическому
действию вещества.
2.2.5. Оценка местного раздражающего и кожно-резорбтивного действия. Изучение местного раздражающего действия на кожу и слизистые оболочки и резорбции веществ через неповрежденную кожу проводится в соответствии с МУ [38]. Для этих целей рекомендуется также использование метода Драйза [63].
При наличии у исследуемого вещества местного раздражающего или кожно-резорбтивного действия вносится пометка "требуется специальная защита кожи и глаз".
2.2.6. Обоснование ориентировочных безопасных уровней
воздействия ЛС. При обосновании ОБУВ ЛС целесообразно провести
предварительно расчет величины порога хронического ингаляционного
действия (Lim в мг/куб. м) с использованием экспериментально
ch
установленных параметров токсикометрии (ЛД50 в/ж, КВР, K ,
кум
Lim , Lim ), Z и суточных терапевтических доз (МСТД и
ac ac pharm sp
ВСТД в г):
lg Lim = 0,61lg Lim + 0,36lg МСТД - 0,27; (12)
ch ac
lg Lim = 0,82lg Lim + 0,36lg ВСТД - 0,78; (13)
ch ac
lg Lim = 0,7lg МСТД + 0,82; (14)
ch
lg Lim = 0,74lg Lim - 0,83lg Z - 0,46. (15)
ch ac sp
Достоверное влияние данных показателей на прогнозируемую
величину Lim установлено также при анализе параметров
ch
токсикометрии группы промышленных аэрозолей:
lg Lim = 0,72lg Lim + 0,11lg ЛД50 в/ж + 0,33lg K +
ch ch кум
+ 0,18lg КВР - 0,66lg Z - 1,11; (16)
sp
lg Lim = 0,59lg ЛД50 в/ж + 0,31lg K + 0,31lg KBР -
ch кум
- 0,64lg Z - 1,51, (17)
sp
где:
K - коэффициент кумуляции по Ю.С. Кагану и В.В. Станкевичу
кум
при введении 1/10 ЛД50;
КВР - коэффициент видовых различий.
Величина расчетного Lim в последующем послужит основой для
ch
надежного прогноза ОБУВ.
2.2.6.1. Обоснование ОБУВ (мг/куб. м) проводится путем расчета:
- по значениям минимальной и высшей суточной терапевтических доз (МСТД и ВСТД в г) на стадии предварительной токсикологической оценки или в случае принадлежности вещества к фармакологической группе, представители которой имеют утвержденную в законодательном порядке величину ПДК в воздухе рабочей зоны;
- по установленным в законодательном порядке санитарным нормативам для атмосферного воздуха или воды водоемов санитарно-бытового назначения, обоснованным по токсикологическому признаку вредности.
В других случаях для обоснования ОБУВ необходимо дополнительно использовать уравнения, учитывающие параметры токсикометрии (среднесмертельные дозы при пероральном и внутрибрюшинном введении, порог острого действия, коэффициент кумуляции при введении 1/10 ЛД50, коэффициент видовых различий, зона специфического действия).
Для установления ОБУВ рекомендуется производить расчеты по нескольким уравнениям с последующим вычислением среднегеометрической величины.
2.2.6.2. Расчет ОБУВ по МСТД и ВСТД не рекомендуется проводить:
- при наличии у вещества избирательного раздражающего, сенсибилизирующего действия или способности вызывать отдаленные эффекты;
- для веществ, являющихся физиологически необходимыми компонентами питания человека (например, витамины, ферменты и др.);
- для веществ, предназначенных для местного применения или парентерального введения.
Обоснование ОБУВ вышеуказанных веществ должно проводиться по аналогии с ранее нормированными фармакологическими препаратами или с использованием результатов подострого эксперимента, а также по уравнениям регрессии, полученным при анализе общей совокупности промышленных аэрозолей (п. 2.2.6.4).
2.2.6.3. Расчет ОБУВ по величине МСТД, ВСТД (г), ЛД50 (мг/кг)
и Lim (мг/куб. м):
ac
lg ОБУВ = 0,77lg МСТД + 0,34; (18)
lg ОБУВ = 0,8lg ВСТД - 0,06; (19)
lg ОБУВ = 0,21lg ЛД50 в/бр + 0,55lg МСТД - 0,33; (20)
lg ОБУВ = 0,45lg Lim + 0,5lg МСТД - 0,43; (21)
ac
lg ОБУВ = 0,49lg MСТД + 0,42lg Lim +
ac
+ 0,11lg ЛД50 в/ж - 0,75. (22)
При расчете используются ЛД50 для наиболее чувствительного
вида животных и наименьшее значение Lim , установленного по
ac
изменению интегральных и специфических (Lim ) показателей.
ac pharm
2.2.6.4. Расчет ОБУВ по параметрам токсикометрии:
lg ОБУВ = 0,78lg Lim + 0,87lg K - lg Z - 1,96; (23)
ac кум sp
lg ОБУВ = 0,62 ЛД50 в/ж + 0,78lg K +
кум
+ 0,25lg KBP - 0,97lg Z - 2,71; (24)
sp
lg ОБУВ = 0,66lg Lim + 0,18lg ЛД50 в/ж +
ac
+ 0,78lg K - lg Z - 2,25. (25)
кум sp
При расчетах используется значение K , установленного
кум
методом Ю.С. Кагана при введении 1/10 ЛД50.
Уравнения, в которые входит ЛД50 в/ж, не рекомендуется
использовать для прогнозирования ОБУВ малотоксичных веществ (ЛД50
более 5 г/кг).
Расчет ОБУВ аэрозолей ЛС в воздухе рабочей зоны по величине
среднесуточной ПДК в атмосферном воздухе и максимальной
недействующей дозы для воды водоемов требует учета значения порога
острого ингаляционного воздействия (Lim или Lim ):
ac ac pharm
lg ОБУВ - 0,3lg ПДК + 0,67lg Lim - 0,61; (26)
с.с. ac
lg ОБУВ = 0,68lg Lim + 0,32МНД (мг/кг) - 0,61. (27)
ac
2.2.6.5. Ориентировочный расчет вероятностного значения
безопасного уровня воздействия может быть проведен также с
использованием собственной модификации формулы Габера:
МСТД x 1000 x K
1
ОБУВ = ----------------; (28а)
V x t x K
2
ВСТД x 1000 x K
1
ОБУВ = ----------------, (28б)
V x t x K
3
где:
V - объем легочной вентиляции человека (куб. м/ч);
t - время работы (ч);
K - коэффициент, отражающий степень задержки аэрозоля в
1
организме (в долях единицы);
K - коэффициент перехода от МСТД к уровню воздействия (ПДК,
2
ОБУВ), отвечающий критериям безопасности для работающих и их
потомства;
K - коэффициент перехода от ВСТД к уровню воздействия (ПДК,
3
ОБУВ), отвечающий критериям безопасности для работающих и их
потомства.
При проведении расчетов величину произведения V x t
целесообразно принимать равной 10 куб. м [61, 62], K = 1,0.
1
Среднее значение K для ранее нормированных ЛС при расчете по МСТД
2
составляет 30, а K при расчете по ВСТД - 100. Величины K и K
3 2 3
для ЛС отдельных фармакологических групп, обладающих специфическим
избирательным действием (гормоны, цитостатики, сульфаниламиды и
др.), могут быть значительно выше приведенных значений
(300 - 500).
В связи с этим при практическом применении вышеприведенного
уравнения желательно предварительно установить значение K и K
2 3
для ранее нормированных ЛС исследуемой фармакологической группы и
только в случае незначительных колебаний этих величин можно
использовать среднюю величину коэффициента для расчета ОБУВ
изучаемого ЛС.
2.2.7. Полная токсикологическая оценка.
2.2.7.1. Проведение хронического токсикологического
эксперимента.
Хронический токсикологический эксперимент проводится в
соответствии с рекомендациями (п. 2.1.1) настоящих МУ. Выбор
концентраций для проведения хронического ингаляционного
воздействия осуществляется с учетом величин Lim , ОБУВ (раздел
ac
2.2.6), результатов подострого опыта (раздел 2.2.3), а также
прогнозируемой величины порога хронического действия (формулы 12 -
17).
Уровень порога хронического ингаляционного действия может быть
также рассчитан по следующим формулам:
lg Lim = 0,45lg Lim + 0,5lg МСТД; (29)
ac ac
lg Lim = 0,56lg Lim + 0,13lg ЛД50 +
ch ac
+ 0,33lg K - 0,89; (30)
кум
lg Lim = 0,65lg Lim + 0,36lg K - 0,64, (31)
ch ac кум
где K - коэффициент кумуляции по Ю.С. Кагану и
кум
В.В. Станкевичу.
Условия эксперимента, критерии для установления порогов вредного действия должны соответствовать требованиям к постановке исследований для обоснования санитарных стандартов вредных веществ, гигиеническим критериям для обоснования необходимости разработки ПДК и ОБУВ (ОДУ) вредных веществ [25, 26] и понижениям раздела 2.1 настоящих МУ.
В процессе хронического эксперимента должны быть установлены пороговая и недействующая концентрации по интегральным и специфическим фармакологическим показателям, определена зона специфического действия, выявлены органы и системы организма, чувствительные к действию исследуемого вещества.
2.2.7.2. При наличии показаний, в частности в случае принадлежности вещества к классу ЛС, действующих преимущественно на центральную нервную систему, или структурном сходстве с ЛС, способными вызывать физическую или психическую зависимость, желательно исследовать возможность развития синдрома воздержания (абстиненции) после прекращения воздействия вещества. С этой целью в первый день восстановительного периода (через сутки после прекращения воздействия), а также в различные сроки этого периода проводится исследование состояния нервной системы, поведенческих реакций, зоосоциального поведения и др. Статистически достоверное изменение исследуемых показателей является признаком вредного действия вещества (лекарственная зависимость). Аналогичные исследования рекомендуется проводить при наличии данных о возможности развития синдрома отмены при воздействии препаратами других фармакологических групп.