Наиболее предпочтительна нагрузка изучаемым веществом в дозах, превышающих порог однократного действия в 2 - 5 раз - в зависимости от способности к кумуляции.
После материальной нагрузки, особенно изучаемым веществом, животных выводят из эксперимента.
4.8.7. В результате подострого опыта определяется пороговая
доза подострого эксперимента (ПД ) - доза ЛС, при энтеральном
пэк
поступлении которой в организм в течение 30 дней возникают
изменения, минимальные по статистическим и биологическим
критериям.
В отличие от гигиены труда, при оценке опасности загрязнения окружающей среды учитывается неблагоприятное влияние ЛС на организм всей совокупности человеческой популяции, включая детей, стариков, больных и т.п., на протяжении всей жизни. Поэтому показателем вредного действия считаются любые начальные изменения отдельных функциональных показателей. При этом важна дифференциация закономерных проявлений токсического действия веществ от случайных изменений.
После установления ПД определяется способность веществ к
пэк
кумуляции по отношению ЛД50/ПД , класс опасности и коэффициент J
пэк
для прогноза пороговой дозы хронического действия (Приложение 9).
Величина коэффициента J зависит от способности веществ к
кумуляции и степени изученности класса соединений, к которому
относится изучаемое ЛС. Поскольку ЛС, как правило, относятся к
изученным классам веществ с известным механизмом действия,
допустимо использовать коэффициент J для прогноза ПД по ПД .
1 хр пэк
4.8.8. Коэффициент запаса для расчета МНД определяется по таблице (Приложение 10), исходя из класса опасности вещества по кумуляции и по способности вызывать отдаленные эффекты. Из рассчитанных МНД выбирается наименьшая.
4.9. Проведение хронического санитарно-токсикологического опыта
4.9.1. Хронический опыт проводится в случаях, указанных в МУ [33]. Кроме того, хронический опыт проводят, если в подостром опыте выявлены новые виды эффектов, развитие которых соизмеримо с длительностью жизни, например изменение костной системы, героэффект.
Условия проведения хронического опыта представлены в [33].
4.9.2. На основании хронического эксперимента определяется
пороговая доза (ПД ). В соответствии с Приложением 10
хр
определяется допустимая суточная доза при пероральном поступлении
(ДСД) и МНД в миллиграммах на 1 кг веса тела. Если вещество
является летучим, легко проникающим через кожу и достаточно широко
распространено в окружающей среде, МНД устанавливается в процентах
от допустимой суточной дозы в соответствии с существующими
методиками и рекомендациями.
4.9.3. Оценка токсичности и опасности вещества проводится по классификации (Приложение 9). При этом предпочтение отдается результатам хронического опыта перед подострым.
4.10. Обоснование величины ПДК (ОДУ) ЛС в воде
Для обоснования величины ПДК (ОДУ) исследуемого вещества в воде сопоставляются пороговые величины по органолептическому и общесанитарному признакам вредности и максимальная недействующая концентрация по токсикологическому признаку вредности (МНК).
4.10.1. МНК рассчитывается из величины МНД с учетом среднего веса человека и суточного водопотребления (включающего питьевую воду и используемую для приготовления пищи, чая, кофе) по формуле:
МНД (мг/кг) x M (кг)
МНК (мг/л) = -------------------- = МНД x K,
V (л)
где:
M - средняя масса взрослого человека;
V - объем суточного водопотребления;
K - обобщенный коэффициент пересчета МНК по МНД.
Для России, с учетом районов с жарким климатом, в которых недопотребление реализуется в основном за счет воды и чая и составляет в сутки не менее 3 л, а также принятого среднего веса на уровне 60 кг, расчет МНК осуществляется по формуле:
МНК = МНД x 20.
4.10.2. Величина МНК сопоставляется с пороговыми концентрациями по органолептическому и общесанитарному признакам вредности, и наименьшая из них принимается в качестве ПДК (ОДУ). Класс опасности устанавливается по таблице (Приложение 6) с учетом стабильности (Приложение 8).
4.11. Нормирование препаратов смешанного состава
4.11.1. Согласно действующему санитарному законодательству регламентация смесей веществ в воде водных объектов может быть проведена лишь при наличии ВФС или ФС.
4.11.2. Технологические лекарственные смеси постоянного (фиксированного) состава, определенные ФС, подлежат изучению как одно вещество с установлением суммарных пороговых концентраций веществ, действующих в составе смеси, по влиянию на органолептические свойства воды и санитарный режим водоемов, а также суммарных максимальных неэффективных доз по общетоксическим и специфическим эффектам. На этой основе устанавливают, как обычно, лимитирующий признак вредности и класс опасности изучаемой смеси. Суммарная нормативная величина, найденная по лимитирующему признаку вредности, предназначена для использования при решении вопросов предупредительного санитарного надзора, для расчета ПДВ и т.д., т.е. может использоваться в качестве ОДУ.
4.11.3. Для обоснования ПДК требуется определить индикаторные вещества, т.е. компонент смеси, по которому следует проводить аналитический контроль за реальным содержанием нормируемой смеси в воде в пределах суммарного норматива. Выбор индикаторного вещества необходимо проводить на основе критериев и принципов, приведенных ниже в порядке приоритетности:
- выявление наиболее токсичных и опасных компонентов и/или продуктов их трансформации;
- изучение сравнительной стабильности компонентов смеси в воде, в том числе по показателям биоразлагаемости;
- учет относительной массы (процентного содержания) ЛС, входящих в состав смеси;
- учет компонентов, определяющих технологическое предназначение препарата;
- наличие метода определения индикаторного вещества в воде.
Учитывают также характеристики биологической активности компонентов по данным литературы или по химической структуре, общие закономерности биотрансформации в организме и превращений в воде. Особого внимания требуют продукты трансформации, которые могут оказаться более токсичными и опасными, чем компоненты смеси. С другой стороны, в исходный состав смеси могут входить одно или более веществ, ранее не изученных по токсикологическим и гигиеническим критериям. В подобных случаях может возникнуть необходимость в дополнительном изучении индивидуального действия этих веществ (главным образом тогда, когда такое вещество может выступать как индикатор смеси). Гигиеническое нормирование смеси проводится согласно [60].
4.12. Особенности нормирования лекарственных средств в зависимости от их фармакологических свойств
С гигиенических позиций ЛС с учетом технологии производства и применения могут быть условно разделены на 5 групп, различающихся по некоторым особенностям научного обоснования нормативов в воде [63]:
1-я - ЛС с преимущественным действием на функциональное состояние отдельных органов и систем;
2-я - химиотерапевтические средства, например сульфаниламиды, антибиотики;
3-я - ЛС, влияющие на обмен веществ, витамины, адаптогены, эссенциальные средства;
4-я - ЛС для наружного применения;
5-я - полупродукты синтеза фармакологических препаратов.
Для каждой из перечисленных групп требуются дополнительные или уточняющие методические подходы.
4.12.1. При нормировании ЛС 1 группы следует рассматривать терапевтические дозы как действующие и изучать в подострых и хронических опытах дозы более низкие, чем терапевтические. Методы исследования должны включать как показатели, связанные с механизмом терапевтического действия, так и характеризующие побочные эффекты и противопоказания. Обязательно применение специфических дополнительных нагрузок.
4.12.2. При нормировании ЛС 2 группы - химиотерапевтических средств - следует учитывать их относительно малую токсичность наряду с высокой антимикробной и сенсибилизирующей активностью, что обусловливает необходимость изучать дисбиотическое действие на микробиоценоз организма подопытных животных и аллергенные эффекты.
Принимая во внимание то, что антибиотики и сульфаниламиды часто и длительно используются населением для лечения и в том числе - самолечения, необходимо в подострых и хронических опытах применять чередующиеся нагрузки изучаемым веществом в терапевтических дозах по системе, адекватной схеме лечения человека, но с учетом отличий длительности жизни и скорости обменных процессов у животных.
4.12.3. Фармакологические свойства химиотерапевтических ЛС находят отражение в их влиянии на процессы естественного самоочищения водных объектов, что требует специального изучения динамики роста и отмирания сапрофитной микрофлоры.
4.12.4. Наибольшие сложности возникают при гигиеническом нормировании препаратов 3 группы. В случае гигиенического нормирования ЛС, являющихся компонентами питания, необходимо учитывать суточную потребность человека в этих веществах.
При планировании исследований по нормированию ряда ЛС в воде следует принимать во внимание особенности поведения вещества в зависимости от пути поступления в организм.
4.12.5. При изучении токсичности ЛС наружного применения (4 группа) наряду с общепринятой программой исследований обязательным дополнительным элементом является углубленное изучение местного раздражающего и кожно-резорбтивного действия.
4.12.6. При обосновании ПДК и ОДУ полупродуктов синтеза лекарственных средств (5 группа) план исследований максимально приближается к общепринятому. Однако и в этом случае полезно учитывать фармакологические свойства конечных продуктов.