И коллоидная химия (стр. 11 из 17)
16. Какой образуется общий промежуточный метаболит для АМФ и ГМФ?
17. Какие вещества участвуют в синтезе пиримидинов?
18. Назовите общий промежуточный метаболит в синтезе всех пиримидиновых нуклеотидов.
19. Назовите виды матричного синтеза.
20. Что такое репликация?
21. Назовите виды репликации.
22. Что такое транскрипция?
23. Что такое процессинг пре-мРНК?
24. Назовите свойства генетического кода.
25. Что такое триплет или кодон?
26. Что такое трансляция?
27. Назовите фазы трансляции.
28. Какой кодон является инициирующим?
29. Назовите терминирующие кодоны.
30. Какие формируются центры в рибосоме после присоединения большой и малой субчастицы?
31. Назовите белковые факторы, участвующие в синтезе белка.
32. Назовите основные стадии в трансляции.
33. Назовите основные фазы в элонгации.
34. Каким посттрансляционным изменениям подвергается синтезированный полипептид?
35. Что такое обратная транскрипция?
36. Что такое репарация?
37. Какие гормоны усиливают протеолиз?
38. Какие гормоны оказывают анаболическое действие?
5. ВОДНО-МИНЕРАЛЬНЫЙ ОБМЕН
РАБОТА 16. КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ КАЛЬЦИЯ
В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ПО МЕТОДУ ВААРДА
Цель работы: ознакомиться с титриметрическим методом определения кальция в сыворотке крови.
Задачи:
· определить содержание кальция в сыворотке крови;
· проанализировать полученные результаты и сделать выводы.
Изменение содержания кальция в сыворотке крови служит диагностическим тестом при эндокринных и неврологических заболеваниях и болезнях, вызванных недостатком некоторых витаминов (например, витамина D). В норме содержание кальция в сыворотке крови человека составляет 9-11 мг%.
Принцип метода. Кальций, находящийся в сыворотке в виде водорастворимых солей, переводится в осадок в результате реакции:
Осадок растворяется в серной кислоте:
Освободившуюся щавелевую кислоту титруют раствором марганцевокислого калия:
5H2C2O4 + 2 KMnO4 + 3H2SO4 ® 2MnSO4 + K2SO4 + 8H2O + 10CO2.
Из приведенных уравнений следует, что по количеству марганцевокислого калия, пошедшего на окисление щавелевой кислоты, можно рассчитать исходное количество кальция.
Ход работы. В одну центрифужную пробирку вносят 1 мл сыворотки крови (опытная проба), а в другую – 1 мл дистиллированной воды (контрольная проба). В обе пробирки добавляют по 1 мл 4%-го раствора щавелевокислого аммония, пробы перемешивают, оставляют на 30 минут при комнатной температуре и центрифугируют со скоростью 3000 об./мин в течение 10 минут. Надосадочную жидкость сливают, в пробирки добавляют по 4 мл 2%-го раствора NH4OH и содержимое перемешивают стеклянной палочкой. Пробы центрифугируют в течение 10 минут. Надосадочную жидкость сливают, в пробирки добавляют по 2 мл 1 н раствора H2SO4 и содержимое перемешивают стеклянной палочкой. Не вынимая палочки, пробирки погружают в кипящую водяную баню до растворения осадка. Раствор титруют горячим, помешивая палочкой, 0,01 н раствором KMnO4 до появления бледно-розового окрашивания, не исчезающего в течение 1 минуты.
Содержимое кальция в сыворотке крови рассчитывают по уравнению:
Х = 0,2 . (а - б) . 100,
где Х – содержимое кальция в сыворотке крови в мг%;
а – количество 0,01 н раствора KMnO4, пошедшее на титрование опытной пробы;
б – количество 0,01 н раствора KMnO4, пошедшее на титрование контрольной пробы;
0,2 – количество кальция (в мг), эквивалентное 1 мл 0,01 н раствора KMnO4, согласно уравнениям реакций.
Общие выводы по работе:
РАБОТА 17. ОПРЕДЕЛЕНИЕ НЕОРГАНИЧЕСКОГО ФОСФОРА
В КРОВИ
Цель работы: ознакомиться с колориметрическим методом определения неорганического фосфора в крови.
Задачи:
· построить калибровочную кривую по стандартным растворам фосфора;
· определить содержание фосфора в крови;
· проанализировать полученные результаты и сделать вывод.
Неорганический фосфор биологических жидкостей входит в состав солей фосфорной кислоты. Основное назначение солей фосфорной кислоты в биологических жидкостях и в первую очередь в крови – создание в них буферной системы. Довольно часто в диагностических целях в клинических лабораториях в крови пациентов определяют содержание неорганического фосфора. В норме в крови содержание неорганического фосфора составляет 2,5-5 мг%.
Принцип метода. Неорганический фосфат взаимодействует с молибдатом аммония в присутствии восстановителей (например, гидрохинона и сернистокислого натрия) с образованием окрашенного комплексного соединения (молибденовой сини). Интенсивность окраски раствора пропорциональна концентрации неорганического фосфата.
Ход работы
1. Построение калибровочной кривой
а) В пять пробирок вносят по 1 мл стандартного раствора фосфора, содержащего соответственно 5, 10, 15, 20 и 25 мкг/мл. В контрольную пробирку вносят по 1 мл дистиллированной воды.
б) Во все пробы добавляют по 4 мл дистиллированной воды, 0,5 мл 20%-го раствора трихлоруксусной кислоты, 0,5 мл молибденового реактива и 0,5 мл 1%-го раствора гидрохинона. Содержимое пробирок тщательно перемешивают и оставляют на 5 минут, после чего во все пробы добавляют по 2 мл карбонатсульфитного раствора и по 1,5 мл дистиллированной воды; перемешивают и оставляют при комнатной температуре на 10 минут. Пробы колориметрируют с зеленым светофильтром в кюветах с толщиной слоя 10 мм против контрольной пробы.
Внимание! Колориметрированию могут помешать образующиеся в процессе реакции пузырьки углекислого газа, поэтому перед измерением их необходимо осторожно снять со стенок кювет с помощью пастеровской пипетки и быстро измерить оптическую плотность растворов.
2. Определение фосфора в крови
В центрифужную пробирку вносят 3 мл дистиллированной воды, 1 мл крови и 1 мл 20%-го раствора трихлоруксусной кислоты, смесь перемешивают и оставляют на 10 минут (для осаждения белков). Затем пробы центрифугируют 5 минут при 1500 об./мин и 1 мл надосадочной жидкости отбирают в другую пробирку. Для приготовления контрольной пробы в другую пробирку вносят 1 мл дистиллированной воды. Далее в обе пробирки приливают реактивы в той же последовательности, как описано в пункте б) при построении калибровочной кривой.
Расчет: концентрацию фосфора в пробе определяют по калибровочной кривой и рассчитывают его содержание в крови в мг% по формуле:
Х = (А ´ 5 ´100) / 1000 = А / 2 (мг%),
где А – количество фосфора в пробе, определенное по калибровочной кривой;
А ´5 – количество фосфора в 1 мл крови;
100 – для пересчета количества фосфора в 100 мл крови;
1000 – для перевода мкг в мг.
Результаты:
| № | Содержание | Е | ||||
| проб | фосфора, мкг/мл | Е1 | Е2 | Е3 | Есред. | |
| 1 | 5 | |||||
| 2 | 10 | |||||
| 3 | 15 | |||||
| 4 | 20 | |||||
| 5 | 25 | |||||
Калибровочная кривая
Расчет по формуле:
Общие выводы по работе:
РАЗДЕЛ 6. ГОРМОНЫ
РАБОТА 18. КАЧЕСТВЕННЫЕ РЕАКЦИИ НА ГОРМОНЫ
Цель работы: ознакомиться с некоторыми химическими свойствами готовых препаратов гормонов.
Задачи:
· проделать перечисленные ниже химические реакции;
· проанализировать полученные результаты и сделать вывод.
1. Качественные реакции на инсулин
а) Реакция Геллера. К 10 каплям концентрированной азотной кислоты осторожно по стенке пробирки приливают равный объем (10 капель) раствора инсулина. Пробирку наклоняют под углом 45о так, чтобы жидкости не смешивались. На границе двух жидкостей образуется белый аморфный осадок в виде небольшого кольца.
б) Биуретовая реакция. К 10 каплям инсулина добавляют 5 капель 10%-го раствора едкого натра и 1 каплю 1%-го раствора сернокислой меди. Жидкость окрашивается в фиолетовый цвет.
в) Реакция Фоля. К 5 каплям раствора инсулина приливают 5 капель реактива Фоля и кипятят. Через 1-2 минуты появляется бурый или черный осадок сульфида свинца.
2. Качественные реакции на адреналин
По химической природе адреналин является производным пирокатехина. Он легко окисляется, превращаясь в неактивный хинон – адренохром (красного цвета):
Адренохром далее полимеризуется с образованием высокомоле-кулярного коричневого пигмента.
а) Реакция с хлорным железом. При взаимодействии адреналина с хлорным железом образуется зеленое комплексное соединение типа фенолята.
В пробирку вносят три капли раствора адреналина (1:1000) и 1 каплю 1%-го раствора хлорного железа. Жидкость приобретает зеленое окрашивание. При добавлении 1 капли концентрированного аммиака окраска переходит в красную вследствие образования адренохрома, а затем в коричневую
б) Диазореакция. В результате взаимодействия адреналина с диазосоединениями образуются азокрасители.
В пробирку вносят по 3 капли 1%-го раствора сульфаниловой кислоты, 5%-го раствора азотистокислого натрия, 5 капель раствора адреналина (1:1000) и 3 капли 10%-го раствора углекислого натрия. Жидкость окрашивается в красный цвет.