И коллоидная химия (стр. 7 из 17)
Ход работы. 5-10 мг никотиновой кислоты растворяют при нагревании в 10-20 каплях 10%-го раствора уксусной кислоты. К нагретому до кипения раствору добавляют равный объем 5%-го раствора уксуснокислой меди. Жидкость становится мутной, окрашивается в голубой цвет, а при стоянии выпадает осадок синего цвета.
5. Реакция на аскорбиновую кислоту
а) Восстановление феррицианида калия витамином С
Ход работы. В двух пробирках смешивают 1 каплю 5%-го раствора К3Fe(CN)6 c 1 каплей 1%-го раствора FeCl3. В одну из пробирок к зеленовато-бурой жидкости прибавляют 5-10 капель 1%-го раствора аскорбиновой кислоты, а в другую – столько же дистиллированной воды. Жидкость в первой пробирке приобретает зеленовато-синюю окраску, выпадает синий осадок берлинской лазури; во второй пробирке (контроль) зеленовато-бурая окраска жидкости остается без изменения.
1. аскорбиновая + 2К3Fе(СN)6 + 2КОН ® дегидро- + 2К4Fе(СN)6 + 2Н2О кислота феррицианид аскорбиновая ферроцианид
калия кислота калия
2. 3К4Fе(СN)6 + 4FеС13 ® Fе4[Fе(СN)6]3 + 12КСl
ферроцианид берлинская
калия лазурь
б) Реакция с 2,6-дихлорфенолиндофенолом (краской Тильманса)
Ход работы. В пробирку с 2,6-дихлорфенолиндофенолом вносят 0,5 мл 0,1%-го раствора HСl и по каплям 0,1%-го раствора аскорбиновой кислоты. Наблюдается обесцвечивание 2,6-дихлорфенолиндофенола.
6. Реакция на витамин А с концентрированной
серной кислотой
Принцип метода. При добавлении концентрированной серной кислоты к хлороформенной эмульсии рыбьего жира образуется красное окрашивание, переходящее в красно-бурое.
Ход определения. В сухую пробирку вносят 1 каплю рыбьего жира и 5 капель хлороформа, перемешивают и добавляют 1 каплю концентрированной серной кислоты.
7. Реакция на витамин D (анилиновая проба)
Принцип метода. При нагревании рыбьего жира, содержащего витамин D со смесью анилина и концентрированной HCl, раствор приобретает красную окраску.
Ход работы. В сухую пробирку вносят 1 каплю рыбьего жира, 5 капель хлороформа, встряхивают и добавляют 1 каплю анилинового реактива, при нагревании желтая эмульсия принимает красную окраску.
Общие выводы по работе:
РАБОТА 9. КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ АСКОРБИНОВОЙ КИСЛОТЫ В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ И МОЧЕ
Цель работы: ознакомиться с одним из методов количественного определения витамина в пищевых продуктах и биологических жидкостях.
Задачи:
· определить содержание витамина С в пищевых продуктах и моче;
· сравнить полученные результаты и сделать выводы.
Принцип метода. Метод основан на способности витамина С восстанавливать 2,6-дихлорфенолиндофенол:
2,6-дихлорфенолиндофенол в щелочной среде имеет синюю окраску, в кислой среде – красную, в восстановленном состоянии – бесцветную:
1. Определение содержания витамина C
в плодах шиповника
Ход работы
а) Гомогенизация биоматериала и экстракция витамина С
1 г сухих плодов измельчают в фарфоровой ступке с 2 мл дистиллированной воды, смесь количественно переносят в мерную колбу на 25 мл и доводят объем водой до метки. Через 10 минут смесь фильтруют через бумажный фильтр в мерную пробирку.
б) Количественное определение витамина C в экстракте
К 2 мл полученного фильтрата добавляют 2-3 капли 10%-го раствора соляной кислоты и 2 мл дистиллированной воды. Содержимое переливают
в колбочку на 50 мл и титруют 0,001 н раствором 2,6-дихлорфенол-
индофенола до появления розовой окраски, не исчезающей в течение 30 секунд.
Расчет. Содержание витамина C рассчитывают по формуле:
Х = (0,088. А. 25 . 100) / Б. В = (мг%),
где Х – содержание аскорбиновой кислоты в мг%;
А – количество раствора 2,6-дихлорфенолиндофенола (в мл), пошедшее на титрование;
В – количество сухого вещества в г, взятое для анализа;
Б – количество вытяжки в мл, взятое для титрования;
25 – общее количество вытяжки в мл;
0,088 – количество аскорбиновой кислоты в мг, эквивалентное
1 мл 0,001 н раствора 2,6-дихлорфенолиндофенола.
2. Определение содержания витамина С в хвое, картофеле
и других пищевых продуктах
а) Гомогенизация биоматериала и экстракция витамина С
Этот этап работы выполняют так же, как в предыдущем случае (при определении содержания аскорбиновой кислоты в шиповнике).
б) Количественное определение витамина C в экстракте
10 мл фильтрата* приливают в колбочку на 50 мл, подкисляют 2-3 каплями 10%-го раствора соляной кислоты и титруют так же, как в предыдущем случае.
*Примечание: если исходный цвет фильтрата сильно окрашен (например, у моркови или петрушки), берут 2 мл фильтрата и 8 мл дистиллированной воды, но это учитывают при расчетах.
Расчет делают по той же формуле, что и при определении витамина C в шиповнике, только количество вытяжки (Б), взятое для титрования, будет равно 10 мл.
3. Определение содержания витамина С в моче
Ход работы. В коническую колбу вносят 10 мл мочи и 10 мл дистиллированной воды. Добавляют 1 мл концентрированной уксусной кислоты и титруют 0,001 н раствором 2,6-дихлорфенолиндо-фенола до появления розовой окраски, не исчезающей в течение 30 секунд.
Расчет:
Х = (0,088 .А . 100) / 10 = (мг%),
где А – количество 0,001 н раствора 2,6-дихлорфенолиндофенола в мл, пошедшее на титрование;
10 – количество мочи в мл, взятое на титрование;
100 – коэффициент для выражения результата в мг%;
0,088 – эквивалент аскорбиновой кислоты.
Общие выводы по работе:
Вопросы для тестового контроля
1. Что такое витамины?
2. На чем основана классификация витаминов? Приведите примеры.
3. Какие витамины относятся к жирорастворимым?
4. Какие Вы знаете водорастворимые витамины?
5. Что такое провитамины, антивитамины?
6. Что такое гипо-, гипер- и авитаминоз?
7. Избыток каких витаминов может вызвать гипервитаминоз? Почему?
8. Перечислите основные различия в метаболизме водо- и жирорастворимых витаминов.
9. Какие соединения относят к витамину A? Какова его биологическая роль? Назовите основные симптомы гиповитаминоза A, источники поступления этого витамина в организм.
10. Назовите основных представителей витаминов группы D. Какие соединения являются активной формой витамина D? Какие органы принимают участие в образовании активной формы витамина D?
11. Какова биологическая роль витамина D?
12. Какие изменения появляются при гипо- и гипервитаминозе D?
13. Какие соединения относятся к витаминам группы K?
14. В каких биологических реакциях участвует витамин K? Какие симптомы характерны для гипо- и гипервитаминоза К?
15. Какие соединения относят к витамину Е?
16. Какие симптомы характерны для гипо- и гипервитаминоза Е? Какова биологическая роль этого витамина?
17. Какие соединения относятся к витамину F? Каковы его биологическая роль и клинические признаки гиповитаминоза F?
18. Структура и биологическая роль витамина В1, клиническое проявление гиповитаминоза B1.
19. Структура и биологическая роль витамина В2, клиническое проявление гиповитаминоза B2.
20. Структура и биологическая роль витамина В3, клиническое проявление гиповитаминоза B3.
21. Структура и биологическая роль витамина В5, клиническое проявление гиповитаминоза B5.
22. Структура и биологическая роль витамина В6, клиническое проявление гиповитаминоза B6.
23. Структура и биологическая роль фолиевой кислоты
(витамина Вс), клиническое проявление гиповитаминоза этого витамина.
24. Структура и биологическая роль витамина В12, клиническое проявление гиповитаминоза B12.
25. Структура и биологическая роль витамина C, клиническое проявление гиповитаминоза C.
26. Структура и биологическая роль витамина H, клиническое проявление гиповитаминоза H.
27. Структура и биологическая роль витамина P, клиническое проявление гиповитаминоза P.
РАЗДЕЛ 5. ОБМЕН ВЕЩЕСТВ
5.1. ХИМИЯ И ОБМЕН УГЛЕВОДОВ
РАБОТА 10. ОРТОТОЛУИДИНОВЫЙ МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГЛЮКОЗЫ В КРОВИ
Цель работы: ознакомиться с одним из распространенных методов количественного определения в крови основного показателя углеводного обмена - глюкозы.
Задачи:
· определить содержание глюкозы в крови;
· проанализировать полученные результаты и сделать выводы.
Принцип метода. Глюкоза при нагревании с ортотолуидином в растворе уксусной кислоты дает сине-зеленое окрашивание, интенсивность которого прямо пропорциональна концентрации глюкозы и определяется на фотоэлектроколориметре:
С ортотолуидиновым реактивом реагируют все альдогексозы, но их содержание в крови невелико, поэтому метод позволяет определить практически одну глюкозу.
Ход работы
а) Осаждение белков крови. В две центрифужные пробирки наливают по 0,9 мл 3%-го раствора трихлоруксусной кислоты, затем в одну из них вносят 0,1 мл крови (или сыворотки крови), а в другую – 0,1 мл стандартного раствора глюкозы (концентрация глюкозы в стандартном растворе составляет 100 мг%). Содержимое пробирок перемешивают и центрифугируют при 3000 об/мин в течение 10 мин.